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1、碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)在临床的应用基本属于常规筛查的染色法。(1)原理(偶氮偶联法):血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.49.6的条件下将基质液中的Q-磷酸蔡酚钠水解,产生Q-蔡酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。(2)结果判断:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀(一)灰褐色沉淀,为O分。(+)胞质出现灰褐色沉淀,为1分。(+)胞质深褐色沉淀,为2分。(+)胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀,但密度较低,为3分。(+)胞质全被深黑色团块沉淀所充满,密度高,甚至遮盖胞核,为4分。(3)参考值:成熟中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)的积分值为7
2、51。由于各实验室的实验条件不同,正常值也有差异,应建立本实验室的正常值。这里的正常值仅供参考。(4)临床意义:生理变化:年龄变化:新生儿NAP活性增高,以后下降。儿童期各年龄大致相似,成年期较儿童期活性减低,老年期更低。应激状态下的变化:紧张、恐惧、激烈运动等NAP活性可增高。月经周期中的变化:经前期增高,行经后降低,经后期恢复。妊娠期的变化:妊娠23个月的NAP积分值轻度增高,以后逐月增高,分娩时达高峰,产后则恢复正常。病理性变化:感染:细菌性感染时NAP积分值增高。在细菌性感染中球菌性感染较杆菌性感染为高;在球菌性感染中,急性较慢性为高。病毒性感染时,NAP积分值一般无明显变化。因此本染
3、色法有时可帮助鉴别细菌性感染和病毒性感染;血液病:慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低,常为“0”,缓解时NAP积分值上升到正常。类白血病反应时的NAP积分值明显增高,中性杆状核粒细胞的碱性磷酸酶活性增强,甚至中性晚幼粒细胞也呈阳性反应。因此本法常用来鉴别慢粒和类白血病反应及观察慢粒疗效的指标之一;急性粒细胞白血病时NAP积分值减低,急性淋巴细胞白血病时NAP积分值一般增高,因此本法可作为鉴别急粒和急淋的方法之一;急性单核细胞白血病时NAP积分值一般减低,有时可正常;粒细胞白血病合并细菌性感染时NAP积分值可增高,但不如单纯细菌性感染增高的明显;再生障碍性贫血的NAP积分值增高,当病情好转时
4、,NAP积分值可下降,完全缓解时NAP活性可恢复到正常,因此本法对再障的诊断、疗效观察和估计病情均有一定意义;阵发性睡眠性血红蛋白尿的NAP积分值减低,因此本法可作为鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血的方法之一;真性红细胞增多症的NAP积分值升高,而继发性红细胞增多症的NAP积分值无明显变化。因此本法可用来鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症;骨髓增生异常综合征的NAP积分值减低;其他其他应用肾上腺皮质激素、雌激素和ACTH后NAP积分值增高。3在碱性磷酸酶(NAP)积分可以用来区别再生障碍性贫血和PNH,再障的时候NAP增高、PNH时NAP积分降低。这个谁都知道。但是百思不得其解
5、。碱性磷酸酶染色的原理是几乎只在成熟的中性粒细胞中才能是阳性的,中性粒细胞碱性磷酸酶临床意义:(1)慢粒细胞白血病(慢粒)的诊断及其与类白血病的鉴别:慢粒时,NAP积分值一般常为O分,个别可正常。在类白血病则积分显著增高。如慢粒合并感染或急变时可增高。(2)急性白血病细胞类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病,NAP积分增高或正常,急性粒细胞白血病则降低,急性单核细胞白血病不定。(3)再生障碍性贫血(再障)与阵发性睡眠性血红蛋白尿的鉴别:急、慢性再障,积分增高,后者可明显降低。(4)白血病前期(白前)与再障鉴别:白前积分降低,而后者增高。(5)细菌性肺炎与病毒性肺炎鉴别:细菌性肺炎增高,后者降低。(6)真性与继发性红细胞增多症的鉴别:前者增高,后者若无感染则正常。(7)绿色瘤与神经母细胞瘤的鉴别:前者积分降低,后者则增高。参考值:NAP染色只在中性分叶核、杆状核粒细胞中,偶在中性晚幼粒细胞中出现阳性,其他细胞一般阴性。NAP的正常值与实验室的