最新B型利钠肽及N末端B型利钠肽前体实验室检测与临床应用中国专家共识.docx

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1、最新B型利钠肽及N末端B型利钠肽前体实验室检测与临床应用中国专家共识摘要B型利钠肽(BNP)及N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)是心脏功能生物标志物,同时也是心力衰竭诊断与鉴别诊断、病情严重程度及预后评估的首选生物标志物。但随着临床研究不断深入,以及新型心力衰竭治疗药物的广泛应用,BNP/NT-proBNP的实验室检测和临床应用面临诸多问题需进一步达成共识:(1)BNP和NT-proBNP,哪个更“好用”?是否需要同时开展BNP和NT-ProBNP检测?(2)BNP/NT-PrOBNP体外稳定时间是否与其体内半衰期相同?(3)BNP或NT-proBNP各检测平台间的一致性如何?BNP与

2、NT-proBNP检测结果是否可以相互换算?(4)影响BNP/NT-proBNP检测的因素众多,如何保证BNP/NT-proBNP检验质量?如何开展性能验证?(5)如何标准化报告BNP/NT-proBNP检测结果?解释BNP/NT-proBNP检测结果时需要考虑哪些影响因素?(6)是否需要建立中国人群BNP/NT-proBNP参考区间及医学决定水平?(7)排除和诊断心力衰竭的BNP/NT-proBNP界值是否适用于射血分数保留的心力衰竭?评估心力衰竭预后的BNP/NT-proBNP目标值是多少?预防心力衰竭的BNP/NT-proBNP干预界值是多少?如何确定心力衰竭患者BNP/NT-proBN

3、P监测频率?(8)肾功能不全、肥胖等患者排除和诊断心力衰竭的BNP/NT-proBNP界值如何确定?(9)BNP/NT-proBNP均可用于奈西立肽、沙库巴曲/缴沙坦等新型心力衰竭治疗药物的疗效评价及相关患者的预后评估吗?(10)除心力衰竭外,BNP/NT-proBNP还可应用于哪些疾病?鉴于此,中国医师协会检验医师分会心血管专家委员会组织国内检验专家以及临床专家撰写了本共识,针对上述10个关键问题,从检验和临床两个角度分别阐述了BNP/NT-ProBNP最新研究进展和国内现阶段应用要求,用以指导和规范BNP/NT-proBNP实验室检测与临床应用。利钠肽(natriureticpeptide

4、s,NPs)家族中的B型利钠肽(BTypenatriureticpeptide,BNP)及其无活性同源片段一N末端B型利钠肽前体(N-terminalpro-B-typenatriureticpeptide,NT-proBNP)已在临床应用超过20年,对疑似心力衰竭(简称:心衰)的诊断和预后评估具有重要价值,被多个临床实践指南作为I级推荐口。随着临床研究不断深入,以及新型心衰治疗药物的广泛应用,BNP/NT-proBNP的实验室检测和临床应用有多个问题需进一步达成共识。鉴于此,中国医师协会检验医师分会心血管专家委员会组织国内检验专家以及临床专家撰写了本共识,从检验和临床两个角度分别阐述了BNP

5、/NT-proBNP最新研究进展和国内现阶段应用要求,用以指导和规范BNP/NT-proBNP实验室检测与临床应用。制定过程及推荐意见分级一、制定过程本共识由来自全国临床检验、心血管疾病、急诊医学等相关领域的多学科专家历经7个月4轮共同讨论制定。专家委员会讨论了共识题目、需要解答的关键问题、证据检索与分类,以及推荐意见分级等;并对有争议的问题进行公开讨论改进,并逐一调整和反馈。二、证据检索与推荐意见分级在制定推荐意见时,专家委员会使用了基于所有可用数据的循证方法。分别在PUbMed、中国期刊全文数据库(CNKI).中文科技期刊数据库(维普)、万方全文数据库中采用倒查法检索了2000年以后的相关

6、文献,检索的文献类型包括病理生理和机制研究、随机对照试验、荟萃分析、描述性研究、队列研究和综述等。专家委员会对推荐意见进行了以下分级:(1)强推荐;(2)推荐;(3)弱推荐。NPs病理生理学NPs家族包括5个已知成员:A型利钠肽(A-typenatriureticpeptide,ANP)、BNPC型利钠肽(Otypenatriureticpeptide,CNP)、D型利钠肽(D-typenatriureticpeptide,DNP)和尿扩张素;均具有1个17-氨基酸二硫环的活性结构。其中,与心脏内分泌相关的是ANPBNP和DNPoNPs受体有3种:利钠肽受体A(natriureticpepti

7、dereceptor-A,NPR-A)、利钠肽受体B(natriureticpeptidereceptor-B,NPR-B)和利钠肽受体C(natriureticpeptidereceptor-C,NPR-C)4ONPR-A.NPR-B为颗粒型鸟甘酸环化酶受体,介导NPs生物学功能;NPR-C细胞内结构域较NPR-A/B短,无鸟甘酸环化酶活性,主要负责NPS清除。ANP主要由心房肌细胞分泌,BNP主要由心室肌细胞分泌,NPR-A是ANP和BNP的主要受体。ANP/BNP与NPR-A结合后通过增加细胞内第二信使环磷酸鸟昔(cyclicguanosinemonophosphate,cGMP)的生成

8、,发挥利钠、利尿和扩张血管作用(降低血压和心脏前/后负荷)o同时,ANP和BNP还具有抑制心肌纤维化和心肌重构等生物学功能,是反映心脏功能的生物标志物。尿扩张素来自ANP前体,定位于肾远端小管,与NPS受体亲和力较小,主要调节肾内钠、氯转运。DNP通过NPS受体和CGMP信号通路发挥生物学功能,具有较强地利钠、利尿和降血压作用。与其他NPS不同,CNP是一种旁分泌激素,在调节局部血管张力和细胞生长中发挥重要作用O目前,临床实验室检测的NPS相关项目包括BNP、NT-proBNP、BNP前体(Pro-B-typenatriureticpeptide,proBNP)和心房利钠肽前体中间片段(mid

9、regionofpro-atrialnatriureticpeptide,MR-proANP),后两种项目目前国内没有开展,因此,本共识将着重讨论BNP和NT-proBNPo人BNP编码基因(NPPB)的初始表达产物是PrOBNP前体(precursorpro-B-typenatriureticpeptide,pre-proBNP),被信号肽酶剪切掉N端26个氨基酸成为proBNP,proBNP进一步被蛋白水解酶裂解为等摩尔两部分,并分泌到外周循环中:N端无生物学活性的直链NT-proBNP,即NT-PrOBNPr76;C端具有生物学活性的环状BNP,即BNP132(图1)。NT-PrOBNP

10、在体内的半衰期为90min,而BNP的半衰期仅有20min。健康状态下,ANP是外周循环中主要的NPs,BNP浓度仅为ANP的1/10左右2o而在缺血、应激及心室容积压力增大等病理状态下,BNP合成释放显著增加,成为外周循环中主要的NPs,如心衰患者BNP/NT-ProBNP水平升高200300倍,甚至更高(图2)。健康个体和患者间BNP/NT-proBNP水平的巨大差异使其成为心脏功能的理想指标。BNP/NT-proBNP生JS功IL抑制RAAS/SNS,利纳、利尿、舒张 出管、抗奸健化、抗。夙*构升 年的发加、女性、胃功能不A、 房及黄宛等:洋地黄和外源 怪畲BNP成分药 ft JEW.

11、RAAS/SNS相关窿京抑制剂ARNh使AWZBNP升穴.NT-ProBNPHfiiBKP/XrProBXP检Ie具有重要阴性博除饰值ANP/MR-proANP BNP332BNP329、BNP432、BNP43hBNP429、BNP5”32、BNP531BNP529BNP527和BNP526等,体外细胞实验结果显示这些BNP短肽段的生物活性与BNP32完整肽段相比差异无统计学意义c,3o为降低不同BNP检测平台间的差异,最佳的抗体靶表位位于BNP626区段(包含环状区在内),这可避免漏检N端或C端被降解的BNP短肽段。2.NT-proBNP实验室检测:绝大多数NT-proBNP商业化检测方法

12、采用相同的抗体和校准品,但不同平台间仍有8%23%的差异回。NT-proBNP检测与PrOBNP存在交叉,但不与BNP交叉。检测的物质为NT-proBNP和proBNP混合物。糖基化修饰对于识别NT-proBNP中心区的检测方法有负性影响,这类方法学仅能识别非糖基化NT-proBNP或proBNP,但是无法识别糖基化NT-proBNP或proBNP,可能导致NT-proBNP真实水平被低估口们。因此,NT-ProBNP检测抗体的靶表位推荐选用NT-proBNP非糖基化位点区域,以减少糖基化的影响口.。高效液相色谱质谱联用法(highperformanceliquidchromatography

13、coupledmassspectrum,HPLC-MS)、离子交换色谱质谱联用法(ionexchangechromatographyMS,IEC-MS)和毛细管电泳质谱联用法(capillaryelectrophoresiscoupledMS,CE-MS)也是检测BNP/NT-proBNP的方法之一,主要用于基础研究和心衰精准诊断20。心衰患者外周循环中的proBNP水平远高于BNP水平,由于BNP与proBNP的检测存在交叉,外周循环中BNP浓度并不能反映心衰患者体内的活性BNP水平。体内活性BNP水平可通过质谱方法直接检测,亦可通过检测其下游因子一cGMP来间接评估,cGMP水平高提示体内

14、活性BNP水平高,反之,则活性BNP水平低。BNP/NT-ProBNP肽段多样化是实现其标准化的难点。目前,尚无参考物质可用,无法实现BNP/NT-ProBNP标准化。建议开发BNP/NT-ProBNP的高阶参考方法和互换性参考物质,并通过标准化降低BNP/NT-proBNP检测差异对检测结果可比性的影响。【推荐意见1】(1)同一医疗机构应采用同一种BNP/NT-proBNP检测方法(强推荐);(2)BNP和NT-proBNP不呈完全平行关系,检测结果不能互相转换(强推荐);(3)不同检测平台间的BNP/NT-proBNP结果不能互相比较,应在同一检测平台进行BNP/NT-proBNP连续监测(强推荐);(

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