油料粗蛋白质测定法编制说明.docx

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1、中华人民共和国国家标准油料粗蛋白质的测定法编制说明国家标准GB/T14489.2-1993油料粗蛋白质的测定法的修订工作,是国家标准化管理委员会2006年制修订国家标准项目计划下达的任务,项目编号为20062729-T-449o前言油料粗蛋白含量是油料检测中的一项重要技术指标。随着标准化工作在行业中的地位和作用的不断加强,社会对标准的需求不断增加,我国国家标准中存在的陈旧老化、总体技术水平低、体系结构不合理等一系列问题已经严重影响了标准的市场适应性。现有的GB/T14489.2-1993油料粗蛋白质的测定法是1993年制定的,距今已经15年了,有必要对原标准进行修订。一、工作基本情况油料粗蛋白

2、质的测定法标准的修订是根据国家标准化委员会2006年制修订国家标准项目计划的要求启动的,项目编号为20062729-T-449。按照国家标准委员会和国家粮食局的要求,由国家粮食储备局无锡科学研究设计院负责修订本标准。该项任务下达后,我院成立了标准起草工作小组,根据项目内容确定了该项工作的具体实施方案和工作计划,按照课题任务要求,迅速开展工作。本标准制定的主要工作过程为:1.1 查询资料本起草小组查阅了大量的国内外科技文献及有关国家的相关标准资料,并对搜集到的资料进行分析、研究等。通过查询国内有关油料粗蛋白测定的行业标准和国家标准有:GB5511-1985粮食、油料检验粗蛋白质测定法GB9823

3、-1988油料饼粕总氮含量的测定方法GB/T6432-1994饲料中粗蛋白测定方法GB/T5009.51985食品中蛋白质的测定方法SN-T0803.9-1999进出口油料粗蛋白质检验方法国际标准有:ISO5983-2005AnimalfeedingStuffs-Determinationofnitrogencontentandcalculationofcrudeproteincontent-KjeldahlmethodISO204832006Cerealsandpulses-Determinationofthenitrogencontentandcalculationofthecrudepr

4、oteincontent-Kjeldahlmethod2001年11月21日国家质量监督检验检疫总局发布施行的采用国际标准管理办法中明确提出采用国际标准的原则为:采用国际标准,应当符合我国有关法律、法规,遵循国际惯例,做到技术先进、经济合理、安全可靠。制定、修订我国标准应当以相应国际标准(包括即将制定完成的国际标准)为基础。对于国际标准中通用的基础性标准、试验方法标准应当优先采用。本着以上原则,通过研究GB/T14489.2-1993油料粗蛋白质的测定法和其他标准内容,编制小组认为修订标准油料粗蛋白质的测定法是目前比较经典的蛋白质测定方法,可参考其他国家和国际标准,保留原标准中的常量法,并增加

5、目前使用广泛的半微量法和仪器法。1.2 编制油料粗蛋白质的测定法国家标准征求意见稿本标准是对原国家标准GB/T14489.2-1993油料粗蛋白质的测定法的修订,同时参考国内外有关标准。为使修订的标准更符合我国油料检测的实际情况,我们同国内的相关大型油脂加工企业和质量检测部门进行了沟通,有:东海粮油(张家港)有限公司、黄海粮油(山东)有限公司、山东鲁花集团有限公司、嘉里粮油(青岛)有限公司、国家粮食局西安粮油食品质量监督检验测试中心、江苏省粮食局粮油质量监测所、浙江省粮油质检站、湖北省粮油食品质量监测站和国家粮食局无锡粮油食品饲料质量监督检验测试中心等数家单位进行了交流、沟通。在参阅有关国内外

6、标准的基础上,结合自身掌握的数据,起草小组不断征求意见进行修改,编制了油料粗蛋白质的测定法国家标准征求意见稿。1.3 编写编制说明本起草小组对油料粗蛋白质的测定法国家标准编制说明进行了编写,其主要内容为工作基本情况、任务来源及工作过程、国家标准编制原则、确定国家标准主要内容的论据、主要试验的分析、综述报告,技术经济论证,预期的经济效果、与有关的现行法律、法规和强制性国家标准的关系、国家标准作为强制性国家标准或推荐性国家标准的建议、贯彻国家标准的要求和措施建议等六项。同时,组织征求全国范围内具有代表性的相关部门和企业的意见,发出国家标准征求意见表及油料粗蛋白质的测定法征求意见稿。1.4 征求意见

7、,完善标准草案,修改编制说明对征求到的意见进行汇总,根据汇总意见进行修改、完善、制定标准草案送审稿,并修改编制说明。组织专家及有关生产厂家等进行标准草窠的审查工作。1.5 根据审查意见进行修改、完善,制定标准草案报批稿,并修改编制说明,上报国家标准技术审查机构等相关部门申请批准为国家标准。二、国家标准的编制原则我国标准修订基本按以下原则进行:采用国际标准,应当符合我国有关法律、法规,遵循国际惯例,做到技术先进、经济合理、安全可靠。制定、修订我国标准应当以相应国际标准(包括即将制定完成的国际标准)为基础。对于国际标准中通用的基础性标准、试验方法标准应当优先采用。标准格式编写上按照GB/TL1标准

8、化工作导则第一单元:标准的起草与表述规则第1部分,标准编写的基本规定进行。三、几种标准的对比序号内容GB14489.2-1993GB/T5511-85SN/T0903.9-1999ISO20483-2006谷物和豆类ISO5983-2005动物饲料方法常量法半微量法常量法仪器法常量法1试剂硫酸GB625浓硫酸+过氧化氢+水1.84gmL18molL,0.05mol/L18molL,0.05mol/L二氧化钛无无无二氧化钛无NaOH40%40%40%40%NaOH0.1mol/L或0.25molL硼酸4%2%2%40gL40gL指示剂0.1%甲基红乙醇溶液+0.5%嗅甲酚绿乙醉溶液等体积混合甲基

9、红乙醇溶液+甲基蓝乙醉溶液等体积混合0.遇甲基红乙醇溶液+0.5%澳甲酚绿乙醇溶液等体积混合1份0.1%甲基红溶液+5份0.1%浪甲酚绿乙醇溶液混合2g甲基红+Ig甲基蓝混合溶解在100Ornl乙醇(95%)中盐酸0.1mol/L0.1mol/L0.1mol/L硫酸硫酸催化剂硫酸铜0.5g,硫酸钾10g,硫酸20InI硫酸铜10g,硫酸钾100g,硒粉0.2克,研细过筛备用硫酸铜0.5g,硫酸钾10g,硫酸20ml硫酸铜0.3g,硫酸钾10g,二氧化钛0.3g,硫酸20ml硫酸铜0.9-1.2g,硫酸钾15g,每克干物质中加硫酸20ml,再加6-12ml2粉碎机粉碎后全部通过40目筛无粉碎后全

10、部通过1.Oinm筛孔粉碎后全部通过0.8mm筛孔无3凯氏烧瓶250ml50ml500ml无800ml4称样0.5Tg(含氮量:5-8Omg)0.2-0.3g(含粗蛋白10-30mg)含氟量20-10Onlg含氮量:5-200mg,最好大于0.02克含氮量:5-200mg,最好大于0.02克5消化通风橱内电炉,消化液体透明后加热l-2h通风橱内电炉,消化液体透明后加热IOmin通风橱内电炉,消化液体透明后加热l-2h消化液体透明后加热2h420土10度消化装置上消化,2小时后冷却6蒸除消化液加50-100蒸饱水,50ml4%硼酸,40%80mlNaOH消化液转入50ml容量瓶,30ml1%硼酸

11、,40%1mlNaOH50ml4%硼酸,40%80mlNaOH消化液加50ml蒸蝴水消化液加250-35OmI蒸储水+25ml硫酸五、新旧国家标准的总体对比1 .按GB/T1.1-2000标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则进行了修订;2 .修订了定义和原理3 .参照IS0664修订了试样制备;4 .对试剂和仪器重新说明5 .分析步骤中增加了半微量和仪器法6 .对计算公式进行了修订以下为新旧标准的对比六、修订标准的主要论据L硼酸原标准GB14489.2-1993中浓度为4%,经过我们的调查了解,4%的硼酸颜色偏深,在后面滴定中对中点颜色的判断增加了难度,参照其他国家标准,将硼酸浓度改为

12、2%.2.半微量法、仪器法凯氏定氮法由KJELTEC于1833年首先提出,经长期改进,已演变为现在的常量法,微量法,半微量以及自动定氮仪法,是最经典的蛋白质测定方法。目前最广泛应用的是半微量凯氏定氮法和仪器法。但常量法、半微量法前处理消化费时,大批量样品的消化和测定较为困难,蒸储定氮及滴定操作十分繁琐,并且蒸储容易倒吸。自动定氮仪则具有自动消化、蒸储、吸收、滴定、数定显示及结果打印等功能。操作简单、省时快速、准确。可大批量测定样品,大大提高了工作效率。采用自动定氮仪法测定蛋白质,操作方法简单,分析速度快,安全可靠,省时省力,一次性消化20个样品只需3060min.蒸储测定一个样品只需6min即

13、可得出结果,适用于大批量样品的测定。而且该方法具有很高的精密度和准确性,对测定蛋白质具有较强的实用性和可靠性。定氮仪由于使用方便越来越受到检测人员的欢迎,因此将仪器法增加到新定标准中是十分必要的。序号内容原标准修订后标准1主题内容和适用范围本标准规定了油料粗蛋白质的测定操作步骤和结果计算方法.本标准适用于油料粗蛋白质的测定和粗蛋白质含量的计算.本标准规定了油料粗蛋白质的测定方法。本标准适用于油料粗蛋白质的测定和粗蛋白质含量的计算。2规范性引入文件无本标准中涉及的所有标准及说明3定义在本标准规定的仪器和操作条件下,用凯氏法测定油料中氮的含量,用换算系数计算出粗蛋白质的含量在本标准规定的仪器和操作

14、条件下,测定油料中氮的含量,用换算系数计算出粗蛋白质占试样总质量的质量分数。4试样制备选取具有代表性的试样,用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中备用.按照ISO664的方法准备实验试样。分析试样为去除杂质后的试样。大豆、花生等大粒油料试样最好采用机械磨碎,有壳油料应先去壳后机械磨碎(6.2)o小籽粒(亚麻籽,油菜籽,大麻籽等),以及葵花籽等带壳小油籽去壳后油籽仁在分析前不需要进行粉碎。5试剂硫酸GB625GB625,含量98%,无氮混合催化剂硫酸铜0.5g,硫酸钾10g硫酸铜0.4g,5个结晶水,6g硫酸钾或硫酸钠,磨碎混匀。硼酸4%2%硼酸无1%(仪器用)指示剂甲基红(HG3-958)0.1%乙醇溶液甲基红(HG3958)0.1%乙醇(95%)溶液盐酸0.lmolL0.1molL,0.02mol/L6仪器粉碎机实验室用粉碎机易清理,适合各种汕料,并且在粉碎过程中不会使物料受热,对试样的水分、挥发物及油含量没有影响。电炉可调电炉消煮炉或电炉蒸储装置常量凯氏蒸储装置常量直接蒸锚式或半微量水蒸气蒸储式消化管无250ml消化管7蒸馀(半微量法)无新增8蒸饱(仪器法)无新增9计算公式粗蛋白质(%)=(Vl-VO)T0.0140fm)100粗蛋白质()=(Vl-VO)c0.0140f/(mV,/V)XlOO10换算系数黄豆大豆七.采用国

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