HPV检测在宫颈癌.ppt.ppt

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1、宫颈癌宫颈癌 是女性最常见的恶性肿瘤,在发展中国家占妇女癌症的24,全世界每年新发病4050万例左右,中国约占1/3。宫颈癌病理发展过程正常上皮 上皮内瘤变(CIN/CIS)浸润癌HPV与宫颈癌 目前已证明:人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌和癌前病变的主要病因,99%的宫颈癌和CIN中都可以检测到HPV-DNA。HPV是一类特异感染人皮肤和粘膜的双链闭合环状DNA病毒,主要感染人类的外阴、生殖道、肛门及口咽部粘膜和皮肤,大部分为自限性感染w根据HPV与宫颈癌的关系将其分为低危型和高危型 HPV分型 高危型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 型等,

2、其中16 和18型 是宫颈癌中最常见型别,其次是58、52 和56型。低危型尤其是6 型和11型极少出现于宫颈恶性组织中,但常从外生殖器疣和宫颈良性病变中发现。HPV感染感染 美国女大学生宫颈HPV感染率为43%,6个月后清除率为31%,8个月后清除率达89%,大部分HPV感染是一过性的。当宿主的防御机制存在缺陷时,可导致HPV持续感染,HPV基因片段可整合到宿主细胞的DNA上,使得相应基因调控失调,病毒癌蛋白E6/E7持续过量表达,从而导致细胞向恶性表型转化。HPV检测nHPV 不能用常规方法培养,也不能进行血清分型,目前HPV 的分型是基于对其基因组的分子杂交。1、免疫组化法 2、原位核酸

3、杂交法 3、PCR法 4、基因捕获法 5、芯片测定技术杂交捕获代基因捕获DNA检测方法(hC2)检测:13种高危HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)。通过对病毒DNA解链,杂交捕获,光信号放大获取结果 DNA裂解 RNA-DNA杂交 抗体捕获 化学发光 计算机判读裂解裂解 加入探针加入探针 杂交杂交 加入二抗和发加入二抗和发光剂光剂我院自2004年开展该项工作以来,共检测8167例样品,HPV感染率为34.0。vTCT检查提示 正常细胞形态和炎症:阳性率为23.2,细胞结构异常(ASCUS+SIL)阳性率:76.9v病理确诊CIN宫颈癌,HPV

4、感染率 99 HPV检测在宫颈癌诊治中的临床意义1 筛查宫颈癌高发人群:筛查宫颈癌高发人群:对对HPV持续感染者持续感染者,即使细胞学正常也要定期随访即使细胞学正常也要定期随访,可及早发现癌前可及早发现癌前病变病变,降低宫颈癌发病率;提早药物干预治疗降低宫颈癌发病率;提早药物干预治疗/疫苗治疗疫苗治疗2 协助诊断早期宫颈癌和癌前病变:协助诊断早期宫颈癌和癌前病变:尤其对尤其对TCT检查提示检查提示ASCUS/LSIL者,者,HPV检测可协助鉴别诊断检测可协助鉴别诊断3 CIN治疗后的随访:治疗后的随访:物理治疗、手术治疗、药物治疗后的随访,治疗后物理治疗、手术治疗、药物治疗后的随访,治疗后HP

5、V持续阳性持续阳性复发率高复发率高4 宫颈癌手术后随访宫颈癌手术后随访 宫颈癌手术后宫颈癌手术后,随访随访20个月个月,高危HPV持续阳性,复发率显著增高持续阳性,复发率显著增高展望 hC2方法,特异性强,准确率高,并能方法,特异性强,准确率高,并能做到定量,但不能分出亚型。芯片技术,做到定量,但不能分出亚型。芯片技术,可在相同的条件下,分出亚型,但不能可在相同的条件下,分出亚型,但不能定量。因此,定量。因此,HPV亚型分类和定量检测亚型分类和定量检测研究将成为今后的重要课题。亚型和量研究将成为今后的重要课题。亚型和量化,可能对疾病的演变和转归提供更有化,可能对疾病的演变和转归提供更有利的证据。利的证据。

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