鹿血清淀粉样蛋白ASAAELISA检测试剂盒说明书.docx

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1、鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)EUSA检测试剂盒说明书产品名称:鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISa检测试剂盒规格:96T/48T保存;38。检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。试剂盒组成及试剂配制:1 .酶联板(ASSayplate上一块(96孔)。2 .标准品(Standard):2瓶(冻干品)。3 .样品稀释液(SamPleDilUent):1X2Oml/瓶4 .生物素标记抗体稀释液(Biotin-

2、antibodyDiluent):lIOml/瓶。5 .辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidinDiluent):IXIOml/瓶。6 .生物素标记抗体(Biotin-antibody):!.X12。1/瓶(1:100)7 .辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)3X120U1/瓶(1:100)8 .底物溶液(TMBSubstrateJilXIoml/瓶。9 .浓洗涤液(WaShBUffer)AX20ml/瓶,使用时每瓶用蒸憎水稀释25倍。10 .终止液(StoPSolUtion)::LXlOml/瓶(2NH2SO4),样品收集、处理及保存方法:1)血清-操作过程中避免任

3、何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2)血浆-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。IooOXg离心30分钟去除颗粒。3)细胞上清液100OXg离心10分钟去除颗粒和聚合物。4)组织匀浆-将组织加入适量生理盐水捣碎。100OXg离心10分钟,取上清液5)保存一一如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作步骤:1 .标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可

4、按照卜冽图表在小试管中进行稀释。2 .加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50UI,待测样品孔中先加样品稀释液40m,然后再加待测样品IoIH(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于晦标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3 .温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。4 .配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸憎水30倍稀释后备用5 .洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6 .加酶:每孔加入薛标试剂50l,空白孔除外。7 .温育:操作同3。8 .洗涤:操作同5。9

5、.显色:每孔先加入显色剂A5OU,再加入显色剂B50W,轻轻震荡混匀,37避光显色15分仲.10 .终止:每孔加终止液50Ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11 .测定:以空白空调零,45Onm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。使用注意事项:1 .试剂盒使用前请保存在2-8C。复溶后的标准品若未用完,请废弃。2 .微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请Iooo转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底.3 .从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40。C使结晶完全溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50C)使用时洗涤液应为室温。4 .不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外).5 .充分轻微混匀对反应结果尤为重要,zui好使用微量振荡器(使用ZUi低频率),如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀。6 .在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测7 .试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果。8 .试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时,请按国家生物试验室安全防护条列执行。本公司产品仅用于科研。

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