血红蛋白含量的测定血型鉴定.ppt

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1、血红蛋白含量的测定、血型鉴定、人体心电图描记、人体动脉血压的测定实验目的l掌握血红蛋白的测定方法；l学习鉴定血型的基本方法，观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型和Rh血型鉴定的原理；l学习并掌握人体间接测压法的原理和方法；l学习心电图波形的测量方法；了解人体正常心电图各波的波形及其生理意义。实验原理-血红蛋白含量测定n红细胞与盐酸作用生成褐色褐色盐酸高铁血红蛋白。经稀释与标准色柱比色，即可求得血红蛋白含量。实验原理-血型鉴定n血型一般指红细胞的血型，是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂）来确定的，这种抗原或凝集原是由遗传决定的。n抗体或凝集素存在于血清中，与红细胞

2、的不同抗原起反应，产生凝集，最后溶解，由于这种现象，临床上在输血前必须注意鉴定血型，以确保安全输血。n通常输血反应中大多数注意ABO血型系统，其次为Rh血型。Rh血型系统血型系统 n1940年，landersteiner与wiener用恒河猴RBC免疫学得到一种抗体，发现抗血清不仅能与猴子RBC发生反应，还与纽约85%白人的RBC发生反应。n因为这类抗原存在于所有恒河猴（rhesus monkey）的红细胞上，故命名为RH因子。将凡能与这种抗RH血清起反应的85%白人称之为RH阳性，不能起反应的15%白人称之为RH阴性。实验原理-动脉血压测定n通常血液在血管内流动时并没有声音，但如给血管以压力

3、而使血管变窄形成血液涡流时则可发生声音（血管音）。n测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法，是使用血压计在动脉外加压，根据血管音的变化来测量动脉血压的。n用压脉带在上臂给肱动脉加压，当外加压力超过动当外加压力超过动脉的收缩压时，脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时用听诊器在肱动脉处听不到任何声音听不到任何声音。n外加压力低于动脉内的收缩压而高于舒张压时外加压力低于动脉内的收缩压而高于舒张压时，则心脏收缩时，动脉内有血流通过，舒张时则无，血液断续地通过血管，形成涡流而发出声音发出声音。n外加压力等于或小于舒张压时外加压力等于或小于舒张压时，则血管内的血流连续通过，所发出的音调突然降低或声音消

4、失音调突然降低或声音消失，故恰好可以完全阻断血流所必须的最小管外压力（即发生第一次声音时）相当于收缩压。在心舒张时有少许血流通过的最大管外压力（即音调突然降低时）相当于舒张压。n心脏在收缩之前，首先发生电位变化。心电变化由心脏的起搏点窦房结开始，经特殊传导系统最后到达心室肌，引起肌肉的收缩。n心脏的综合性电位变化可通过体液传播到人体的表面，经体表电极引导并放大而成的波形为心电图。n心电图可以反映心脏内综合性电位变化的发生、传导和消失过程。实验原理-心电图的描记心电图：心电图：心脏不同部位之间的电位差心脏不同部位之间的电位差实验材料n0.1mol/L盐酸溶液；盐酸溶液；n显微镜、载玻片、刺血针、

5、消毒牙签、显微镜、载玻片、刺血针、消毒牙签、A型和型和B型标准血清、生理盐水、酒精棉球、抗型标准血清、生理盐水、酒精棉球、抗D血清血清等；等；n血压计、听诊器等；血压计、听诊器等；n心电图机、酒精棉球等。心电图机、酒精棉球等。方法与步骤-1n于测定管内加入0.1mol/L盐酸溶液至百分刻度20处。n取20l被检血液,迅速将吸血管插入测定管底部盐酸液中，缓慢挤出血液，再吸取上部清液，反复冲洗吸血管23次，并混匀，静置10min。n沿着管壁加入蒸馏水，逐步稀释至与标准色柱色调一致后，读取重量（或百分）刻度值报告结果。v 标准制换算：血红蛋白标准制换算：血红蛋白(g/L)=血红蛋白血红蛋白(g/dl

6、)10n取一清洁玻片，用蜡笔划上记号，左上角写抗B字，右上角写抗A字。n用小滴管吸A型标准血清（抗B）一滴加入左侧，用另一小滴管吸B型标准血清（抗A）一滴加入右侧。n穿刺手指取血，玻片的每侧各放入一小滴血，用牙签搅拌，使每侧抗血清和血液混和。n静置室温下10-15min后，观察有无凝集现象，假如只是抗A侧发生凝集，则血型为A型；若只是抗B侧凝集，则为B型；若两边均凝集，则为AB型；若两边均未发生凝集，则为O型。方法与步骤-2Rh血型鉴定血型鉴定 取干净玻片取干净玻片1个，滴入抗个，滴入抗D血清及受检者血清及受检者血液各血液各1滴，混匀，滴，混匀，20 min后观察。凝集者后观察。凝集者为为Rh

7、阳性，否则为阳性，否则为Rh阴性。阴性。n受试者脱左臂衣袖，静坐5min。n松开打气球上的螺丝，将压脉带内的空气完全放出，再将螺丝扭紧。n将压脉带裹于左上臂，其下缘应在肘关节上约3cm处，松紧应适宜。受试者手掌向上平放于台上，压脉带应与心脏同一水平n在肘窝部找到动脉搏动处，左手持听诊器的胸具置于其上。注意：不可用力下压方法与步骤-3n听取血管音变化右手持打气球，向压脉带打气加压，此时注意倾听声音变化，在声音消失后再加压30mmHg，然后扭开打气球之螺丝，缓慢放气（切勿过快），此时可听到血管音的一系列变化，声音从无到有，而后由低而高，突然变低，最后完全消失。然后扭紧打气球螺丝继续打气加压，反复听

8、取声音变化2-3次。n测量动脉血压重复上一操作，同时注意检压计之水银柱和声音变化。在徐徐放气减压时，第一次听到血管音的水银柱高度即代表收缩压。在血管音突然由强变弱时的水银柱高度即代表舒张压。记下测定数值，将压脉带内的空气放尽，使压力降至零。方法与步骤-4n受试者安静平卧，全身肌肉松弛受试者安静平卧，全身肌肉松弛n按要求将心电图机面板上各控制钮置于适当位置。在心按要求将心电图机面板上各控制钮置于适当位置。在心电图机妥善接地后接通电源，预热电图机妥善接地后接通电源，预热5min。n安放电极。把准备安放电极的部位先用酒精棉球脱脂，安放电极。把准备安放电极的部位先用酒精棉球脱脂，再涂上导电糊，以减小皮

9、肤电阻。再涂上导电糊，以减小皮肤电阻。n连接导联线连接导联线。按所用心电图机之规定，正确连接导联线。按所用心电图机之规定，正确连接导联线。一般以一般以5种不同颜色的导联线插头与身体相应部位的电种不同颜色的导联线插头与身体相应部位的电极连接，上肢：极连接，上肢：左黄左黄、右红右红；下肢：；下肢：左绿左绿、右黑。、右黑。n调节基线旋动基线调节钮，使基线位于适当位置。n输入标准电压。打开输入开关，使热笔预热10min后，按动1mV定标电压按钮，再调节灵敏度（或增益）旋钮，标准方波上升边为10mm。开动记录开关，记下标准电压曲线。n记录心电图。旋动导联选择开关，依次记录、等导联的心电图。n记录完毕，应

10、解松电极，洗净擦干，以防腐蚀。将心电图机面板上的各控制钮转回原处，最后切断电源。n取下记录纸，记下导联、受试者姓名、年龄、性别及实验日期。n测量导的P波、R波、T波振幅，P-R、Q-T、R-R间期，并计算心率。n注意：注意：测量正向波振幅时，从参考水平线的上缘垂直地测量到该波的顶点；测量负向波振幅时，从参考水平线的下缘垂直地测量到该波的最低点。P波振幅的测量以P波起始部的水平线为参考水平线；QRS波群、J点、ST段、T波和U波振幅的测量是以QRS波群起始部的水平线为参考水平线。心率的测定心率的测定 测定相邻的两个心动周期中的测定相邻的两个心动周期中的P P波与波与P P波或波或R R波波与与R

11、 R波的间隔时间，按下列公式进行计算，求出波的间隔时间，按下列公式进行计算，求出心率。如心动周期的时间间距显著不等时，可将心率。如心动周期的时间间距显著不等时，可将五个心动周期的五个心动周期的P-PP-P或或R-RR-R间隔时间加以平均，间隔时间加以平均，取得平均值，代入下列公式：取得平均值，代入下列公式：(s)RRPP60间隔时间或心率(次min)=注意事项n测定血红蛋白含量时应保持足够光线；测定血红蛋白含量时应保持足够光线；n盐酸酸化时间不要低于盐酸酸化时间不要低于10min;n血液和盐酸混合时不可剧烈震荡；血液和盐酸混合时不可剧烈震荡；n蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量；蒸馏

12、水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量；n比色时将玻璃棒取出。比色时将玻璃棒取出。n判断红细胞凝集，要有足够时间（10-15min)n载玻片须清洗干净；n测压时室内须保持安静，以利听诊。n戴听诊器时，务使耳具的弯曲方向与外耳道一致，即接耳的弯曲端向前n压脉带裹绕要松紧适宜，并与心脏同一水平。n重复测压时，须将压脉带内空气放尽，使压力降至零位，而后再加压测量。l心电图机必须接地良好，以防交流电干扰。l电极板和皮肤间要接触良好。l受试者应呼吸平稳、肌肉放松，以防肌电干扰。参考结果-兔血红蛋白含量n兔血红蛋白含量：n11.9g/100ml血液(8-15)参考结果-正常血压n收缩压收缩压100-12

13、0mmHg，舒张压，舒张压60-80mmHg n记录方式记录方式120/80mmHg 或：或：16/10.7 kpanWHO规定，血压超过规定，血压超过160/95mmHg为高血压。为高血压。正常心电图正常心电图波形特点 nP波n振幅：肢体导联肢体导联0.25mV；胸导联0.20mV。nR波 n振幅：I导联的R波1.5mV；V1导联的R波1.0mV；V5导联的R波2.5mV；aVR导联的R波0.5mV；aVL导联的R波1.2mV；aVF导联的R波2.0mV。nT波n振幅：一般不应低于同导联R波的1/10。nQ-T间期q其受心率快慢影响较大，一般心率越快，QT间期越短，反之则越长。正常范围为0.

14、320.44s。nP-R间期q正常范围为0.120.20snQRS波群qQRS波时间：0.060.10snR-R间期q正常范围为0.61 s，平均0.8s正常心率n成年人安静时的正常心率有显著的个体差异,平均在75次/分左右(60100次/分之间)。正常心率可因年龄、性别及其他生理情况而不同。参考实验结果（总结）n兔血红蛋白含量：11.9g/100ml血液(8-15)n血型：ABO血型；Rh血型n血压n一般范围：收缩压90-120mmHg，舒张压60-80mmHgn记录方式120/80mmHg n心电图nP波 0.25mV；胸导联0.20mVnT波R波的1/10nQ-T间期:0.320.44s

15、nP-R间期:0.120.20snR-R间期:0.61 s，平均0.8sn心率:平均在75次/分左右(60100次/分之间)交流电干扰在基线上可见规则的细小杂波，其频率每秒50周，系交流电干扰。出现这种情况应检查心电图机和地线是否接好、电极板有无不洁与生锈及缚的是否合适，必要时暂停使用附近的理疗机、X光机等。如不能消除上述因素，则可能是由于心电图机内部故障或导联线的损坏。附：心电图常见问题（参考）附：心电图常见问题（参考）n在描记心电图过程中，患者由于手脚或身体移动，可造成基线不稳甚至波形异常。图中高耸的波形颇似异位心室搏动，实际是肢体移动造成的伪差。肢体活动对基线的影响肢体活动对基线的影响肌

16、肉震颤图中基线出现一系列快速、不规则的细小芒刺样波动，使心电图波形失真，容易误诊为心房颤动波。这种情况下是由于被检者精神法过分紧张，或因寒冷四肢肌肉未能松弛，被检者精神法过分紧张，或因寒冷四肢肌肉未能松弛，或电极与皮肤接触太紧，产生肌肉颤动所致或电极与皮肤接触太紧，产生肌肉颤动所致。n图中呼吸呈有规律的上下起伏，从而影响了心电图的观察与判断。排除这种伪差需要患者配合，保持平稳呼吸或暂时憋住呼吸。呼吸对基线的影响呼吸对基线的影响导联线连接错误图A：、aVL导联P-QRS-T波群倒置，aVR导联P波直立。肢体导联的图形颇似右位心，但心前导联却与正常一样，R波自右至左逐渐增高，S波逐渐缩小，为心前导联的正常图形，不符合右位心，这是由于左、右上肢导线接错所致。n图B：左、右上肢导线纠正后的记录：肢体导联出现正常的图形。导联为上图A导联的翻转，导联为上图导联图形，导联图形为上图导联的图形，aVR为上图aVL的图形，aVL为上图aVR的图形。心电图基线不稳第一段基线位置适宜，P-QRS-T波群的振幅如实地被记录。第二段由于基线位置偏高，R波的振幅没有被充分显示出来，所以较前者降低。S波加深，大概是