丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程.docx

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1、丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程.检验原理：（酶偶联速率法）L-丙氨酸和-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶的作用下生成丙酮酸和L-谷氨酸。丙酮酸在乳酸脱氢酶（LDH）作用下生成L-乳酸，同时还原型辅酶I（NADH）被氧化为氧化型辅酶I（NAD、在340nm处测得吸光度呈下降趋势与ALT活性成正比。根据NADH吸光度下降程度计算丙氨酸氨基转移酶的活力单位。试剂内不含磷酸弼哆醛。1.-丙氨酸+Q-酮戊二酸一生丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H，侬-L一乳酸+MUT2.试剂组成成分组成成分浓度RlTriS缓冲液1OOmmo1/LL-丙氨酸500mmolL乙二胺四乙酸二钠10mmolLR2TriS缓冲液

2、1OOmmo1/L-酮戊二酸1OOmmo1/L乳酸脱氢酶3000U/L还原型辅酶I二钠盐IOmmo1/L3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225保存8小时，28C保48小时,-20C保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（U/L）血清男性5-40女性5-356 .检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（WV）的氯化钠溶液稀释样本。6 .2.单位换算：ukatL=UL16.671037 .检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空

3、白在34Onnl处吸光度小于LOOO时不能使用。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。8. 2装量：不低于标识值。8. 3试剂空白吸光度：在34Onnl处，光径ICnI时，空白吸光度A21.0008 .4试剂空白吸光度变化率：在34Onm处，光径ICm时，ZAminW0.0049 .5线性区间：试剂的线性区间为10-500UL,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)10-50U/L区间内，线性绝对偏差不超过5U/L；(50-500)U/L区间内,线性相对偏差不超过10%。8. 6准确度：相对偏差应不大于15机8. 7分析灵敏度：在34On

4、rn处，光径ICnl时，测量已知浓度的样品后换算成W/L的丙氨酸氨基转移酶时，吸光度变化AAULmin22XIO-48. 8批内精密度：CV5%8. 9批间精密度:R10%8. 10稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后一个月的试剂进行测试，应满足1-8的要求。9. 临床意义：丙氨酸氨基转移酶(ALT)亦称谷-丙转氨酶(GPT)属于转氨酶类，它能够通过氨基转移催化氨基与酮酸之间的相互转移。在人体的很多组织中均能发现ALT。但发现肝脏中的活性最大，其次是肾、心肌、骨骼肌以及胰腺、脾、肺等组织。转氨酶增高能指示心肌梗死、肝脏疾病、肌营养障碍和器官损伤。除实质性肝脏疾病外，血清ALT活性增高很少发现，因此ALT比AST对肝脏疾病更具特异性。