光激化学发光新一代化学发光.ppt

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1、工作原理性能参数技术特点系统平台LiCA放免酶联免疫化学发光荧光免疫60年代70年代80年代90年代免疫标记技术发展免疫标记技术发展国产进口酶促化学发光直接化学发光电化学发光LiCA（LOCI）是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。是化学发光免疫分析技术的又一个是化学发光免疫分析技术的又一个新的里程碑新的里程碑光激化学发光光激化学发光 LiCALiCAL Light ig

2、ht I Initiated nitiated C Chemiluminescent hemiluminescent A Assayssay两种高分子微粒：两种高分子微粒：感光微粒感光微粒和和发光微粒发光微粒两种微粒近距离接近。是两种微粒近距离接近。是感光微粒感光微粒接受接受 激发光照射激发光照射释释放出单线态氧构成放出单线态氧构成 “氧桥氧桥” 传递能量，使传递能量，使发光微粒发光微粒发出光信号发出光信号LiCALiCA技术基础技术基础 直径：直径：200nm 包被亲和素包被亲和素 红色激光红色激光680nm照射照射 释放单线态氧释放单线态氧 直径：直径：200nm 用于包被抗体用于包被抗体

3、/抗原抗原 接受单线态氧接受单线态氧 产生产生610nm光光感光微粒发光微粒LiCALiCA原理原理两种微粒两种微粒 半衰期：4S 作用距离：200nmLiCALiCA原理原理 单线态氧（能量载体）单线态氧（能量载体）三线态氧（基态）三线态氧（基态）单线态氧（激发态）单线态氧（激发态）感光微粒感光微粒亲和素亲和素发光微粒发光微粒-Anti-HBsHBsAg生物素生物素-Anti-HBs发射光发射光610 nm200nm激发光激发光680 nm1O2LiCALiCA原理原理举例（双抗体夹心法）举例（双抗体夹心法）不含待测抗原不含待测抗原激发光激发光680 nm1O2200nm能量的近距离转移转移

4、的介质是单线态氧两种微粒相互接近200nmLiCALiCA发光原理发光原理光激化学发光 = 光能化学能光能工作原理性能参数技术特点系统平台LiCA均相反应反应充分速度更快LiCALiCA技术特点技术特点均相反应均相反应酶标板，板式磁微粒，微米级，非均相LiCA微粒，纳米级，类均相微粒包被微粒包被等质量比表面积 A : B = 5dA=200nmdB=1m等质量微粒（比表面积）等质量微粒（比表面积）LiCALiCALiCA抗体载量优势抗体载量优势准确成本快速LiCALiCA的技术特点的技术特点 加样加样 孵育孵育15% 洗涤洗涤 孵育孵育80% 检测检测5%随机误差随机误差 / 交叉污染交叉污染

5、自动化平台免洗/免分离类均相反应技术纳米级别微粒包被500 Tests/Hour清洗清洗废液处理废液处理大量纯化水清洗管路大量纯化水清洗管路 管路定期更换管路定期更换（一般半年一换）（一般半年一换）进口原装管昂贵进口原装管昂贵需达到无害环境标准需达到无害环境标准繁琐繁琐水质要求达标水质要求达标高额隐性成本高额隐性成本免洗免洗提升经济和社会效益品牌平台测试速度罗氏2010（e411）80e170（e601）170雅培i1000100i2000200贝克曼Access 2100Dxi 800400 采用680nm弱能量红光激发 单线态氧不易受外界环境因素干扰 取样量仅25l，试剂中有表面活性剂Li

6、CALiCA的抗干扰性的抗干扰性O2-O2-O2-O2-O2-O2-2000-2009年光激化学发光相关文献间接相关间接相关直接相关直接相关SCISCI1010/ /核心期刊核心期刊/ /4 4生命科学的基础研究新药的筛选目标小分子的多样性 蛋白 核酸 糖LiCALiCA的应用拓展的应用拓展技术特点优势均相免疫反应充分免清洗/分离结果精密度高高通量500 测试/小时易使用免疫=生化高灵敏度10-15 mol纳米微粒技术提高反应面积和抗体载量离子氧传递能量不易受反应环境影响目标分子多样性蛋白质、核酸等LiCALiCA的技术特点与优势的技术特点与优势工作原理性能参数技术特点系统平台LiCALiCA

7、 SP 移液工作站LiCA HT 均相发光免疫分析仪LiCALiCA产品平台产品平台样品臂样品臂试剂臂试剂臂试管架试管架试剂仓试剂仓枪头架枪头架微孔板微孔板废物盒废物盒LiCALiCA SP SP 移液工作站移液工作站未包被任何抗原未包被任何抗原/ /抗体抗体96个反应空杯个反应空杯LiCALiCA微孔板微孔板托盘托盘上盖板上盖板LiCALiCA HT HT 均相免疫发光分析仪均相免疫发光分析仪 甲状腺T3T4FT3FT4TSHTSH-3ATPOATG性激素BhCGPTFSHLHE2E3Prolactin肿瘤标志物AFPCEACA12-5CA19-9CA153CA50CA24-2CY21-1f

8、PSAPSANSESCCpro-GRPPG-/心肌标志物cTnIMyOmCKMBBNPNT-proBNPhsCRP新陈代谢C-peptideInsuliniPTHDPD传染性疾病HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBcAnti-HAV IgMAnti-HBc IgMAnti-HCVAnti-HIVAnti-TPLiCALiCA项目菜单项目菜单工作原理性能参数技术特点系统平台LiCALiCA LiCA 系统的多中心临床评估系统的多中心临床评估项目项目临床评估单位临床评估单位参比系统参比系统乙型肝炎上海市第一人民医院雅培I2000乙型肝炎北京协和医院强生Vitros乙型

9、肝炎上海市瑞金医院国产试剂肿瘤上海市中山医院罗氏E170肿瘤上海市瑞金医院雅培I2000肿瘤上海市新华医院罗氏e601甲状腺上海市第六人民医院西门子CentaurN=453,上海第一人民医院；上海第一人民医院；参比试剂：雅培参比试剂：雅培I2000乙肝灵敏度特异性符合率HBsAg97.92%100%99.78%Anti-HBs95.98%97.38%96.69%HBeAg95.24%100%99.59%Anti-HBe90.77%97.21%95.36%Anti-HBc91.54%98.9%94.48%LiCALiCA性能多中心临床评估（乙型肝炎）性能多中心临床评估（乙型肝炎）相关性相关性相关

10、系数相关系数线性系数线性系数AFP显著相关0.990.74CEA显著相关0.930.89LiCALiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）性能多中心临床评估（肿瘤标志物）N=200N=200，上海市中山医院，上海市中山医院参比试剂：罗氏参比试剂：罗氏E170E170LiCALiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）性能多中心临床评估（肿瘤标志物）相关性相关性相关系数相关系数线性系数线性系数AFP显著相关0.970.88CEA显著相关0.960.79N=500N=500，上海市瑞金医院，上海市瑞金医院参比试剂：雅培参比试剂：雅培I2000I2000LiCALiCA性能多中心临床评估（甲状腺）性能多中

11、心临床评估（甲状腺）甲状腺甲状腺相关性相关性相关系数相关系数线性线性TSH显著相关0.990.84FT3显著相关0.931.25FT4显著相关0.90.84TT3显著相关0.940.99TT4显著相关0.930.73N=300N=300，上海市第六人民医院，上海市第六人民医院参比试剂：西门子参比试剂：西门子Advia centuarAdvia centuarAFPHBsAg4.50%1.79%4.91%2.14%AFP12345MeanSDCV批内批内86.1186.3688.4087.9086.4386.271.551.79%批间批间74.59 73.63 69.64 71.90 71.96

12、 71.01 3.20 4.50%HBsAg12345MeanSDCV批内批内72.59 71.25 76.50 75.05 78.03 76.61 1.642.14%批间批间0.22 0.22 0.23 0.22 0.23 0.23 0.01 4.91%批内批间LiCALiCA的精密度的精密度LiCALiCA的的TSHTSH功能灵敏度功能灵敏度小结小结 化学发光是免疫检测新技术化学发光是免疫检测新技术 LICALICA是最新一代的化学发光检测技术是最新一代的化学发光检测技术 LICALICA具有液相、免洗、快速、高通量、灵敏、准确的特点具有液相、免洗、快速、高通量、灵敏、准确的特点 通过通过多中心的临床评估多中心的临床评估，基本上验证了，基本上验证了LICALICA在在乙肝、肿瘤乙肝、肿瘤标志物、甲状腺功能标志物、甲状腺功能等项目的临床可用性等项目的临床可用性 LICALICA产品的质量基本产品的质量基本已能与进口的已能与进口的雅培、罗氏和西门子等雅培、罗氏和西门子等厂家的产品媲美。厂家的产品媲美。