人抗可溶性肝抗原抗体SLAELISA试剂盒.docx

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1、本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人抗肝可溶性抗原抗体(S1.A)的含量。人抗肝可溶性抗原抗体(S1.A)ElJSA试剂盒实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(E1.ISA)。往预先包被人抗肝可溶性抗原抗体(S1.A)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗肝可溶性抗原抗体(S1.A)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。人抗肝可溶性抗原抗体(S1.A)EIJSA试

2、剂盒样本处理及要求1 .血清：全血标本请于室温放置2小时或4C。过夜后于100Og离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20C。或-80C。保存，但应避免反复冻融。2 .血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8100Og离心20分钟，或将标本放于-20C。或-80C。保存，但应避免反复冻融。3 .细胞培养物上清或其它生物标本：10OOg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20C。或-80C。保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。需要而未提供的试剂和器材1. 酶标仪(45Onm)2. 高精度加样器及枪头：0.5-

3、10u1.2-20u1.20-200u1.200-1000u1.3. 37C。恒温箱4. 蒸镭水或去离子水试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20洗涤缓冲液的稀释：蒸储水按1：20稀释，即1份20洗涤缓冲液加19份蒸偏水。操作步骤1 .从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4C。2 .设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品501.；3 .样本孔中加入待测样本501.；空白孔不加。4 .除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体1001.t用封板膜封住反应孔，37C。水浴锅或恒温箱温育60min05

4、.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(3501.),静置Imin,甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6 .每孔加入底物A、B各501.,37C。避光孵育15min7 .每孔加入终止液501.,15min内，在45Onrn波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能1 .特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。2 .重复性：板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%0注释：本公司所有产品仅用于科研，不得用于临床。