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1、病原体检测的目的病原体检测的目的1 临床标本的正确采集临床标本的正确采集23 检测结果的正确解读检测结果的正确解读4病原病原体体检测检测方法方法一一.病原体检测的目的病原体检测的目的协助明确疾病诊断协助明确疾病诊断推测病程进展推测病程进展 制定治疗措施制定治疗措施观察病情观察病情各种不同病原体的实验诊断方法各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则遵循以下基本原则1.1.正确、规范采集和运送标本。正确、规范采集和运送标本。2.2.直接显微镜查见病原体或检出病原直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原,借助分子生物学的方法检体抗原,借助分子生物学的方法检测病原体核酸,结合病人的病史、测病原体核酸,
2、结合病人的病史、症状或体征,快速作出初步诊断。症状或体征,快速作出初步诊断。各种不同病原体的实验诊断方法各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则遵循以下基本原则3.3.初步诊断同时,对病原体进行分离与初步诊断同时,对病原体进行分离与鉴定。鉴定。4.4.检测机体对病原体的免疫产物。检测机体对病原体的免疫产物。5.5.参与临床选择抗菌药物,指导和监控参与临床选择抗菌药物,指导和监控微生物的治疗方案,避免微生物的治疗方案,避免 耐药菌株的耐药菌株的产生。产生。二二.临床标本的正确采集临床标本的正确采集 遵照医嘱遵照医嘱充分准备充分准备 严格查对严格查对 正确采集正确采集 及时送检及时送检标本的采
3、集和送检六原则标本的采集和送检六原则避免杂菌污染避免杂菌污染不同期不同标本不同期不同标本用抗菌药物前用抗菌药物前采集病变明显部位采集病变明显部位运送注意保存运送注意保存标本必须新鲜标本必须新鲜三三.病原病原体体检测检测方法方法直接涂片直接涂片染色镜检染色镜检分离培养分离培养形态特征形态特征生化试验生化试验血清学试验血清学试验动物实验动物实验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断血清学诊断血清学诊断细菌的快速鉴定细菌的快速鉴定形态学检查形态学检查(常规培养或特殊培养)(凝集试验、(凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等)沉淀反应、免疫标记技术等)(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核微生物数
4、字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、酸杂交技术、PCR技术、技术、DNA芯片技术等)芯片技术等)药药物物敏敏感感试试验验革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌革兰氏阴性杆菌革兰氏阴性杆菌墨汁染色找墨汁染色找新型隐球菌新型隐球菌 抗酸染色抗酸染色阴性杆菌生长速度快于阳性球菌、念珠菌!阴性杆菌生长速度快于阳性球菌、念珠菌!24螺旋体螺旋体四四.检测结果的正确解读检测结果的正确解读1.细菌培养的意义细菌培养的意义培养阳性培养阳性感染感染排除污染排除污染排除定植排除定植任何结果都必须结合临床症状及其它相任何结果都必须结合临床症状及其它相关检查进行综合分析关检查进行综合分析 培养阴性培养阴性排除
5、感染排除感染n标本采集部位和方法标本采集部位和方法n是否在使用抗菌药物时留取的标本?是否在使用抗菌药物时留取的标本?n标本运送时间和方法是否正确标本运送时间和方法是否正确n标本接种、培养基及培养方法的选择是否正确标本接种、培养基及培养方法的选择是否正确n是否可能是厌氧菌或其它难培养的细菌感染是否可能是厌氧菌或其它难培养的细菌感染细菌培养的意义细菌培养的意义合格痰液标本合格痰液标本鳞状上皮鳞状上皮25个个/低倍视野低倍视野不合格痰液标本不合格痰液标本大量鳞状上皮细胞大量鳞状上皮细胞未见吞噬细胞未见吞噬细胞Antibiotic interactions with gram negative org
6、anismsAntibiotic interactions with gram negative organismspenicillin binding proteinspenicillin binding proteinsOmpFOmpFOmpCOmpC CephalosporinsCephalosporins slower diffusion due toslower diffusion due tobulk and ionic chargesbulk and ionic charges ImipenemImipenem Rapid diffusion due to small sizeRapid diffusion due to small sizeand zwitterionic and zwitterionic+/-charge)+/-charge)PBP3PBP3PBP2PBP2PBP1aPBP1aPB1bPB1bBeta Lactamases(hydrolyzing enzymes)CBD/RR