透射电镜观察细胞样品实验报告.docx

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1、透射电镜观察细胞样品实验报告一、实验仪器与试剂表格一:实验仪器仪器厂家型号透射电子显微镜JoelJEM-1230超薄切片机1.eicaEMUC7表格二:试剂试剂厂家PBS(pH7.4)Hyclone无水乙醇国药集团化学试剂有限公司丙酮国药集团化学试剂有限公司1%钺酸国药集团化学试剂有限公司Pon812包埋套装SPl醋酸双氧铀阿拉丁试剂醋酸铅阿拉丁试剂二、实验步骤1 .醛类固定:加入Im1.2.5%戊二醛溶液(PBS稀释),4度固定过夜;2 .清洗:用PBS清洗3次,每次静置15mim3 .钺酸固定:用1%钺酸溶液4度固定2h;4 .清洗:用PBS清洗3次,每次静置15min;5 .脱水:用50

2、%、70%、80%、90%乙醇梯度脱水各静置15min(在70%乙醇中静置过夜),再用100%乙醛脱水2次,每次静置15mim6 .置换:用丙酮置换2次,每次静置15min;7 .浸渍:过程如下:A.丙酮:包埋剂=2:1(体积比)的浸渍液中浸渍Ih8 .丙酮:包埋剂=1:2(体积比)的浸渍液中浸渍4h;C.纯包埋剂浸渍2次,每次12h;9 .包埋:将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中;10 .聚合:将包埋板置于65条件下各聚合48h以上;11 .修块:将包埋头修成梯形,且样品表面积小于0.2mmx0.2mm;12 .超薄切片:切片厚度70nm;13 .染色:醋酸双氧铀染色Iomin后清洗;醋酸铅染色IOmin清洗;14 .上机检测。三、实验结果展示如下:

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