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1、医院消毒效果监测第一节医院消毒效果监测概述医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一,消毒效果的监测是评价消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效,消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段,因而在医院消毒、灭菌工作中必不可少。一、医院消毒效果监测的特性1.必要性(1)消毒灭菌效果监测方法专业性强,不检验不知道结果。(2)新建病房、新消毒设备、新消毒剂均应做效果监测。(3)特殊对象、特殊需要,必做效果监测。如移植术前、ICU病房、危重患者等。2 .科学性以科学的试验设计、熟练的技术、可靠的结果、确切地分析,得出结果评价。3 .规范性以权威规范为依据,符合其基本原则要求。如检测时机的确定、标准菌株的
2、选择、标本数、重复次数、实验方法等确立。二、医院消毒效果监测应遵循的原则(1)监测人员需经过专业培训,掌握一定的消毒知识,具备熟练的检验技能。(2)选择合理的采样时间(消毒后、使用前)。(3)遵循严格的无菌操作。三、监测方法的分类L根据检测方法性质分(1)物理方法:测量压力灭菌温度、测量紫外线强度等。(2)化学方法:各种化学指示卡。(3)生物方法:嗜热/枯草芽抱灭菌效果监测自然菌存活数监测。4 .根据消毒灭菌对象性质分(1)空气消毒。(2)表面消毒。5 .根据具体消毒对象分(1)压力蒸汽灭菌。(2)各种器械。(3)化学消毒剂。(4)紫外线灯杀菌效果。(5)手和皮肤消毒效果。(6)空气消毒效果。
3、(7)物体表面消毒效果。四、医院消毒效果监测的必要条件(1)专业实验室。(2)必备设备器材。(3)选择实验方法。(4)熟练实验技术。五、卫生部对500张床位以上医院感染管理的质量指标规定(1)医院感染率10%,灭菌切口感染Wo.5%。(2)医院感染的漏报率W20%,调查样本量不少于年监测患者数的10%o(3)医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测,灭菌合格率必须达到100%。(4)使用中的消毒剂、灭菌剂应进行生物和化学监测。消毒剂每季度生物监测1次,细菌含量必须V100CfU/ml,不得检出致病微生物;灭菌剂每月检测1次,不得检出微生物。化学监测应根据消毒、灭菌剂的性能定期监测。(5)压力蒸气灭
4、菌进行工艺、化学和生物监测。环氧乙烷必须每锅进行工艺监测,每包进行化学监测,每月进行生物监测。压力蒸气锅每天第一锅必须做B-D试验。(6)紫外线灯强度监测。每季度1次;30W新灯管N90W/cm2,旧灯管270uWc112。(7)胃肠镜等诊疗器材消毒标准不得检出致病微生物;腹腔镜、关节镜等应灭菌处理,不得检出任何微生物。(8)进入人体组织、血液、器官的医疗用品应灭菌处理,不得检出致病微生物;接触黏膜医疗用品细菌总数W20CfU/g(或200CfU100c11)2);接触皮肤的医疗用品细菌总数200CfUg(或200cfu100cm2),不得检出致病微生物。(9)母婴同室、婴儿室物体表面和医护人
5、员手不得检出沙门氏菌。(10)医院各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌数标准。第二节紫外线消毒效果监测一、物理学监测方法灯管的紫外线强度(uWc112)用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪(标定有效期内),在灯管垂直位置Im测定。在实际应用中消毒表面的照射强度应以灯管与消毒对象的实际距离测定。表面消毒接受的照射剂量,应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌,照射剂量应达到20000W/cm2,对枯草杆菌黑色变种芽抱应达到IOoOOoUW/cm?o(1)检测方法:开启紫外线灯5min后,将测定波长为254nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离Im的中央处,待仪表稳定后,所示数据即为
6、该紫外线灯管的辐照度值。(2)结果判定:普通30牝直管型紫外线灯,新灯辐照强度,90uWcm2为合格;使用中紫外线灯辐照强度N70HWcm2为合格;30W高强度紫外线新灯的辐照强度218OUWcm2为合格。(3)注意事项:测定时电压220V5V,温度2025C,相对湿度60%,紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用。二、生物学监测方法(1)采用载体定量消毒试验。指示菌:大肠杆菌(8099或ATCC25922)。枯草杆菌黑色变种芽抱(ATCC9372)。(2)检测方法:开启紫外线灯5min后,将8个染菌玻片平放于灭菌器皿中,水平放于适当距离照射,于4个不同间隔时间各取出2个染菌玻片,分别投
7、入2个盛有5ml洗脱液(1%吐温80,1%蛋白陈生理盐水)试管中,振打80次。经适当稀释后,取05ml洗脱液,作平板倾注,每个染菌玻片接种2个,放37。C培养48h作活菌计数。阳性对照,除不作照射处理外,取2个染菌玻片分别投入2个盛有5ml洗脱液中振打80次,余按以上方法进行。(3)判定标准:对指示菌杀灭菌299.9%判为消毒合格。达物理学检测标准时,作为消毒合格的参考标准。第三节热力灭菌效果监测一、压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测是一组综合措施,包括工艺监测、化学监测、生物监测。1 .工艺监测满足必要的灭菌参数、正确的包装、合理装载、设备运行正常。(1)灭菌包装要求。包装材料:透
8、气性好且能阻隔微生物。包装容器:带通气孔铝饭盒和搪瓷桶。灭菌包大小:下排气W30cmX30cmX25cm;预真空W30cmX30cmX50cmo化学指示器材:包内放指示卡,包外贴指示胶带。(2)装载要求:摆放要求:小包在下,大包在上,器械包在下,敷料包在上,开口容器口向下或侧放,所有包应该竖放,包与包之间留有空隙,勿贴靠柜壁。装量要求:下排气式不超过柜内容积80%,预真空式不超过90%且不少于柜内容积5%(脉动预真空)或10%(预真空)。(3)设备运行良好:排气系统通畅;仪表和温度时间程控反应正常;蒸气饱和度符合要求;柜门橡胶垫圈无损坏;柜门锁扣灵活有效。2 .化学监测法(1)化学指示卡(管)
9、监测方法:将既能指示温度,又能指示温度持续时间的化学指示卡(管)放入每一待灭菌的物品包中央,经一个灭菌周期后,取出指示卡(管),根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。(2)化学指示胶带监测法:将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外,经一个灭菌周期后,观察其颜色的改变,以指示是否经过灭菌处理。(3)结果判定:检测时,所放置的指示卡(管)的性状或颜色均变至规定的条件,可认为该包灭菌合格。(4)注意事项:监测所用化学指示剂须经卫生部批准,并在有效期内使用。3 .生物监测法(1)指示菌株:指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽泡(ATCC7953或SSIK31株),菌片含菌量为5.01055.0XlOCfU/
10、片,在1210.5C条件下,D值为1.31.9min,杀灭时间(KT值)19min,存活时间(ST值)为23.9min0(2)培养基:试验用培养基为溟甲酚紫蛋白豚水培养基。溟甲酚紫蛋白脓水培养基配制:蛋白陈10.0g,葡萄糖5.0g,溶于100mI蒸锵水中,调PH值至7.07.2,然后再加2%溟甲酚紫酒精溶液0.6ml,摇匀后,按5d管,分装包口,置压力蒸汽灭菌器中,于115。C灭菌40min后备用。(3)检测方法:将两个嗜热脂肪杆菌芽抱菌片分别装入灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,1块大手术中,3
11、0块IOCmX10cm8层纱布敷料包裹成25cm30cm30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气储物盒(22CmXI3cmX6cm)代替标准试验包,盒内盛满中试管,指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封),将储物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。经一个灭菌周期后,在无菌条件下,取出标准试验包或通气储物盒中的指示菌片,投入溟甲酚紫蛋白陈水培养基中,经56。C培养7d(自含式生物指示物按说明书执行),观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。(4)结果判定:每个指示菌片接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基都不变色,判定为灭菌合格;指示菌片之一接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基,由紫色变
12、为黄色时,则灭菌不合格。(5)注意事项:监测所用菌片须经卫生部认可,并在有效期内使用。二、干热灭菌效果监测方法1 .化学检测法(1)检测方法:将既能指示温度又能指示该温度持续时间的化学指示剂分别放入待灭菌的物品中。经一个灭菌周期后,取出化学指示剂,据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。(2)结果判定:检测时,所放置的指示管的颜色及性状均变至现定的条件,则可认为该包达到灭菌条件。(3)注意事项:检测所用的化学指示剂需经卫生部认可,并在有效期内使用。2 .物理检测法(热电偶检测法)(1)检测方法:检测时,将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门;将导线引出,由记录仪
13、中观察温度上升与持续时间。(2)结果判定:若所示温度(曲线)达到预定温度,则灭菌温度合格。3 .生物检测法(1)指示菌株:枯草杆菌黑色变种芽抱(ATCC9372),菌片含菌量为5.0义1055.OX1()6CfU/片。其抗力应符合在温度1602。C时,其D值为1.3L9min,存活时间23.9min,死亡时间WL9mi11o(2)检测方法:将枯草杆菌芽抱菌片分别装入灭菌中试管内(1片/管)。灭菌器与每层门把手对角线内,外角处放置2个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至80。C时,加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下,加入普通营养肉汤培养基(5ml管),以37。C
14、培养48h,观察初步结果,无菌生长管继续培养至第7do(3)结果判定:若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清,判为灭菌合格,若指示菌片之一接种的肉汤管混浊,判为不合格,对难以判定的肉汤管,取0.Iml接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒涂匀,放37。C培养48h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长;若有指示菌生长,判为灭菌不合格;若无指示菌生长,判为灭菌合格。(4)注意事项:检测所用的指示菌片需经卫生部认可,并在有效期内使用。第四节医疗器械灭菌效果监测一、采样时间在灭菌处理后,存放有效期内采样。二、常规监测(1)检测方法:用无菌的方法将拟检缝合针、针头、手术刀片等小件医疗器械各5支,分别
15、投入5ml的无菌洗脱液中;注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次;手术钳、镶子等大的医疗器械在无菌操作下取2份以上用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样,并将棉拭子投入5l无菌洗脱液中。将采样管用力振打80次,用无菌吸管吸取InII待检样品放于灭菌平皿内,加入已熔化的4548。C的营养琼脂1518ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置37。C温箱培养48h,计数菌落数。(2)结果判定:平板上无菌生长为灭菌合格。(3)注意事项:若消毒因子为化学消毒剂时,采样液中应加人相应中和剂。三、无菌检验L无菌检验前准备(1)洗脱液与培养基无菌性试验:无菌试验前3d,于需一厌氧培养基与真菌培养基内各接种InII洗脱液,分别置3035与2025培养72h,应无菌生长。(2)阳性对照管菌液制备:在试验前Id取金黄色葡萄球菌(26003)的普通琼脂斜面新鲜培养物,接种1环至需一厌氧培养基内,在3035培养1618h备用。2 .无菌操作取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械5件直接浸入6管需一厌氧培养管(其中一管作阳性对照)与4管真菌培养管,培养基用量为15ml管。取5副注射器,在5ml洗脱液中反复抽吸5次,洗下管内细菌,混合后接种需一厌氧菌培养管(共6管,其中1管作阳性对照)与