第19章支原体.ppt

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1、第第1919章章 支原体的概念和生物学性状，支原体与L型的主要区别。肺炎支原体、溶脲脲原体所致 疾病。冷凝集试验的原理和应用。1.概念概念 支原体是一群无细胞些壁能独立生存的，支原体是一群无细胞些壁能独立生存的，介于病毒与细菌之间的原核生物界微生物。介于病毒与细菌之间的原核生物界微生物。2.特点特点(1)体积很小（体积很小（200nm）能通过滤菌器。）能通过滤菌器。(2)有细胞结构，但无细胞壁，也无胞壁粘肽或其有细胞结构，但无细胞壁，也无胞壁粘肽或其先质。先质。(3)可在无生命的培养基上生长（如营养丰富的琼可在无生命的培养基上生长（如营养丰富的琼脂培养基），形成微小菌落。脂培养基），形成微小菌

2、落。(4)呈二分裂繁殖。呈二分裂繁殖。第一节第一节 概述概述分分 类类 目前已知目前已知150余种。其中寄生性支原体有余种。其中寄生性支原体有90余种，而人体支原体至少有余种，而人体支原体至少有15种。种。为软皮体纲（为软皮体纲（Mollicutes），支原体目（），支原体目（Mycoplamatales），），支原体科支原体科（Mycoplasmaceae）。）。无胆甾原体属（无胆甾原体属（Acholeplasma）厌氧原体属（厌氧原体属（Anaeroplasma）无固醇原体属（无固醇原体属（Asterolplasma）支原体属（支原体属（Mycoplasma）：64个种个种 螺原体属（螺原

3、体属（Spiroplasma）脲原体属（脲原体属（Ureaplasma）：二个种）：二个种其中对人致病主要有其中对人致病主要有5种，包括：种，包括：肺炎支原体（肺炎支原体（M.pneumoniae）人型支原体（人型支原体（M.hominis）生殖器支原体（生殖器支原体（M.genitalium）穿通支原体（穿通支原体（M.penetraus）溶脲脲原体（溶脲脲原体（U.urealyticum）支原体支原体 细菌细菌 L 型型 1、在遗传上与细菌无关、在遗传上与细菌无关 在遗传上与原菌有关在遗传上与原菌有关 2、在任何情况下，不能、在任何情况下，不能 在无诱导因素作用下，在无诱导因素作用下，变成

4、细菌变成细菌 易回复为原菌易回复为原菌 3、生长缓慢，菌落较小，、生长缓慢，菌落较小，菌落稍大，直径菌落稍大，直径 0.5-1.0 直径直径 0.1-0.3 4、液体培养时混浊度极低、液体培养时混浊度极低 液体培养时混浊度低，可液体培养时混浊度低，可 粘附与管壁或沉于管底。粘附与管壁或沉于管底。5、除无胆淄原体外，生长、除无胆淄原体外，生长 不一定需要胆固醇。不一定需要胆固醇。时需要胆固醇。时需要胆固醇。肺炎支原体肺炎支原体 溶脲脲原体溶脲脲原体人型支原体人型支原体生殖器支原体生殖器支原体泌尿生殖系感染、泌尿生殖系感染、不育症不育症肺炎肺炎 第二节第二节 主要致病支原体主要致病支原体 一、肺炎

5、支原体一、肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia）形态与结构形态与结构1.G-，不易着染，不易着染，Giemsa染色呈染色呈淡紫色淡紫色/浅蓝色。浅蓝色。2.无固定形状，而呈多形性（球、无固定形状，而呈多形性（球、杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其典型形态似酒瓶状。典型形态似酒瓶状。3.结构：无细胞壁，仅有细胞膜。结构：无细胞壁，仅有细胞膜。电镜观察：电镜观察：0.20.3m,为原核细胞界微原核细胞界微 生物中最小生物中最小者。可通过除菌滤器。可通过除菌滤器。内外两层内外两层蛋白质。蛋白质。细胞由三细胞由三成结构组成成结构组成 中层中层脂质，其中胆固醇脂

6、质，其中胆固醇 占占36%。核糖体核糖体Pr合成的重要场所。合成的重要场所。细胞浆细胞浆 双链环形双链环形 DNA。近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构，近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构，使支原体粘附于宿主上皮细胞表面。使支原体粘附于宿主上皮细胞表面。培养特点培养特点1.可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高。可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高。2.偏硷环境（偏硷环境（pH7.68.0）生长适宜，中性生长较差，）生长适宜，中性生长较差，酸性被抑制或死亡。但溶脲脲原体除外（酸性被抑制或死亡。但溶脲脲原体除外（pH6.06.5最最适宜）。适宜）。3.有氧无氧均能生长。有氧无氧均能生长。4.固体培养

7、基：经固体培养基：经23d见小的集落犹如见小的集落犹如“油煎蛋油煎蛋样样”集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平贴附在培养基上。贴附在培养基上。5.繁殖速度缓慢（繁殖速度缓慢（34h一代）一代）繁殖方式多样化。繁殖方式多样化。(1)二分裂二分裂(2)颗粒型颗粒型(3)丝状体丝状体(4)出芽出芽生化反应生化反应多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质。通常多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质。通常根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性支原体区别。支原体区别。抗原构造抗原构造：颇为复杂。：颇

8、为复杂。其主要其主要Ag性来自细胞膜。胞膜外层蛋白质是主要型特异性来自细胞膜。胞膜外层蛋白质是主要型特异性性Ag。其抗原性常用生长抑制试验（其抗原性常用生长抑制试验（GIT）和代谢抑）和代谢抑制试验（制试验（MIT）鉴定。）鉴定。GIT：将吸有型特异性抗血清：将吸有型特异性抗血清的滤纸片贴在接种过支原体的的滤纸片贴在接种过支原体的平板上，孵育后，如有抑制生平板上，孵育后，如有抑制生长现象出现，则说明该支原体长现象出现，则说明该支原体与血清同型。与血清同型。MIT：是将支原体接种在含有抗：是将支原体接种在含有抗血清的葡萄糖（酚红）培养基中，血清的葡萄糖（酚红）培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑

9、制若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸，该支原体不能分解葡萄糖产酸，酚红不变色。酚红不变色。用用GIT和和MIT可将支原体分成若可将支原体分成若干血清型。干血清型。若相应，则支原体生长、代谢受抑制，酚红不变色代谢抑制试验（代谢抑制试验（MIT）生长抑制试验生长抑制试验（GIT）有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩。有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩。1.对热、干燥，一般重金属盐类和一般化学消毒剂对热、干燥，一般重金属盐类和一般化学消毒剂 敏感敏感2.对表面活性对表面活性 敏感敏感3.对青霉素、链霉素头孢菌素结晶紫，醋酸铊则有一定的抵抗对青霉素、链霉素头孢菌素结晶

10、紫，醋酸铊则有一定的抵抗力。力。抵抗力抵抗力（无细胞壁）4.对作用于胆固醇的药物（二性霉素对作用于胆固醇的药物（二性霉素B等）和干扰等）和干扰蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、链霉素等）敏感。链霉素等）敏感。致病性与免疫性致病性与免疫性 致病物质致病物质1.黏附因子P1蛋白的定植作用:可吸附于宿主呼吸道黏膜细胞、红细胞等表面的受体神径氨酸酶上,避免微纤毛运动将其排除。2.毒性代谢产物损害宿主黏膜上皮细胞，出现肿胀，坏死和脱落，微纤毛运动减弱。3.荚膜具有抗吞噬作用，也有毒性。4.糖脂抗原：与宿主细胞有共同抗原决定簇，故可引起变态反应，导致免

11、疫损伤。所致疾病所致疾病支原体肺炎支原体肺炎肺炎，症状轻重不一，婴幼儿较重。成人肺炎，症状轻重不一，婴幼儿较重。成人通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状。通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状。支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适。支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适。咽炎。咽炎。鼓膜炎鼓膜炎鼓膜出现疱疹、常为出血性的。鼓膜出现疱疹、常为出血性的。神经系统及其它系统损伤，少数患者出现神经系统及其它系统损伤，少数患者出现脑膜脑炎。脑膜脑炎。以隐性感染为主，可伴有呼吸道外症状，X线肺部线肺部呈羽毛状浸润呈羽毛状浸润 传播：传播：飞沫免疫性免疫性 病后免疫力短暂，可反复感染。以体液免疫为主，细胞免疫也起作用。1.早期

12、感染 单核-巨噬细胞刺激产生产生急性期炎症急性期炎症因子因子IL-1和和TNFa可扩张血管；增强吞噬细胞的功能诱导IL-6的产生 诱导肝细胞产生急性期蛋白 激活补体 2.产生的抗体IgG1和IgG2有调理作用 促进单核M的吞噬作用 激活补体。3.呼吸道黏膜分泌的SIgA有阻止肺炎支原体的吸附作用。4.肺炎支原体与人类心、肺、脑和肾有共同抗原，可引起型变态反应（如溶血性贫血、血小板减少性紫癜、心肌炎、肾炎、脑膜炎和格林巴利综合征）。5.IgG与相应抗原组成免疫复合物引起型超敏反应，如心肌炎和肾炎等。6.肺炎支原体作为超级抗原可激活CD4+T细胞微生物学检查法微生物学检查法 标本的采集标本的采集通

13、常采集病人咽拭子、鼻拭子、痰、支气管分泌通常采集病人咽拭子、鼻拭子、痰、支气管分泌物、含嗽液。其中以拭子为最佳。物、含嗽液。其中以拭子为最佳。注意事项：注意事项：（1）因支原体对热、干燥敏感。取材后应立即）因支原体对热、干燥敏感。取材后应立即接种；接种；（2）如不能立即接种可置于蔗糖磷酸盐缓冲液，）如不能立即接种可置于蔗糖磷酸盐缓冲液，4保存保存72h，-70可长期保存。可长期保存。检验方法检验方法1.标本直接检查标本直接检查（）直接镜检（）直接镜检Gram染色染色G-不易着染。不易着染。标本标本涂片涂片 电镜观察无细胞壁易与细菌区别。电镜观察无细胞壁易与细菌区别。（）核酸检测（）核酸检测：用

14、：用PCR法快速、敏感、特异操作中应特别法快速、敏感、特异操作中应特别小心、防止污染。小心、防止污染。2.分离培养分离培养：慢阳性率不高对临床快速诊断意义不大，但对流：慢阳性率不高对临床快速诊断意义不大，但对流行病学调查有一定意义。行病学调查有一定意义。3.血清学检查血清学检查抗体检测。抗体检测。（）（）ELISA特异、敏感、快速目前常用而可靠方特异、敏感、快速目前常用而可靠方法可检测法可检测IgM和和IgG。（）生长抑制试验（）（）生长抑制试验（）（）代谢抑制试验（）（）代谢抑制试验（）（）补体结合试验（）补体结合试验（CF）常用常用（）间接血凝试验（）间接血凝试验（）冷凝集试验（）冷凝集试

15、验是检测患者血清中是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性试验。但仅冷凝集素的一种非特异性试验。但仅33%76%患者出现阳性。（效价患者出现阳性。（效价1：64），效价越高或），效价越高或4以上升高，近期感以上升高，近期感染的可能性大。染的可能性大。用病人血清与人用病人血清与人O O型红细胞或自身红细胞型红细胞或自身红细胞 混合混合44过夜，观察红细胞的凝集现象，过夜，观察红细胞的凝集现象，3737时凝集又分开，即冷凝集试验时凝集又分开，即冷凝集试验.分子生物学检测：分子生物学检测：快速，敏感性高，特异性强快速，敏感性高，特异性强核酸探针、核酸探针、预预 防防死疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定。死

16、疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定。治治 疗疗红霉素、链霉素、螺旋霉素等。二、溶脲脲原体二、溶脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）是可引起泌尿生殖道感染的病原体是可引起泌尿生殖道感染的病原体生物学性状生物学性状 1形态结构：基本同肺炎支原体。形态结构：基本同肺炎支原体。2培养特点培养特点（1）营养要求较高）营养要求较高（2）固体培养基）固体培养基 95%N2、5%CO2 形成形成1550m颗粒状颗粒状“荷包蛋荷包蛋”样小样小 菌落（放大菌落（放大200才能见到）才能见到）3生化反应生化反应不分解葡萄糖和精氨酸不分解葡萄糖和精氨酸 脲酶脲酶+。4.抗原结构（抗原结构（1）脂多糖）脂多糖Ag。（2）蛋白质抗原。）蛋白质抗原。（3）脲酶）脲酶Ag种特异性种特异性Ag。5 5抵抗力：基本同肺炎支原体。抵抗力：基本同肺炎支原体。致病性和免疫性致病性和免疫性 Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。1.上行引起男性前列腺炎或附睾丸。上行引起男性前列腺炎或附睾丸。2.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。3.早产儿及低体重新