皮肤变态反应试验.docx

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1、皮肤变态反应试验1目的检测消毒剂重复接触后，实验动物产生皮肤变态反应的可能性及其强度。2实验动物选用皮肤完好的健康白色豚鼠，雌雄各半，体重200g300g.3试验分组将豚鼠随机分为试验组、阴性对照组和阳性对照组，每组动物至少16只。4操作程序(1)对试验组豚鼠，给予受试物诱导和激发处理。阳性对照组给予阳性致敏物(如：2,4二硝基氯苯)诱导和激发处理。阴性对照组仅给以受试物激发处理。(2)诱导处理浓度允许引起皮肤轻度刺激反应。激发浓度低于诱导浓度，不得引起原发性刺激反应。如果原液不引起皮肤刺激反应，诱导和激发均使用原液。(3)于试验前24h将豚鼠背部左侧3cmx3cm范围内去毛。取诱导浓度的消毒

2、剂溶液(或原液)0.5ml(g),直接涂在2cmx2cm左侧去毛皮肤上或滴于同样大小的2层4层纱布上，再将其敷贴在左侧去毛区。用一层无刺激塑料膜或油纸复盖，再以无刺激胶布固定，持续6ho第7d和第14d以同样方法重复一次。(4)在末次诱导后14d,将激发浓度的消毒剂溶液0.5ml(g)直接涂在2cmx2cm右侧脱毛皮肤上或滴于同样大小的2层4层纱布上，敷贴于豚鼠背部右侧3cmx3cm去毛区。然后，用一层塑料膜或油纸和无刺激胶布固定，6h后将敷贴的受试物洗去。24h和48h后观察皮肤反应，按表2/7对皮肤反应评分。(5)实验室开展皮肤变态反应试验初期，或使用新的动物种属或品系时，需同时设阳性对照

3、组，阳性对照物可使用2,4.二硝基氯代苯。为保证试验方法的可靠性，在进行该类试验时，每隔半年应使用阳性对照物检查一次。若检测报告中需用非本次阳性对照组的实验数据时，应注明其实验日期。阳性对照组的操作程序同试验组，以阳性致敏物替代受试物。(6)阴性对照组，仅对动物给予受试物的激发接触，每次试验必须设置。5评价规定化学物质引起的过敏性接触性皮炎，属迟发型变态反应。对于动物，仅见皮肤红斑和水肿。根据表2/8标准，将出现皮肤反应(评分21)的动物数除以该组实验动物数，求得致敏率(),按表2-19评定致敏强度。皮肤反应评分A红斑形成：无红斑0轻微红斑1中度红斑2严重红斑3水肿性红斑4B水肿形成：无水肿0轻度水肿I中度水肿2严重水肿3表2/9致敏强度分级标准致敏率(%)致敏强度。8极轻度928轻度2964中度6580强度81100极强度注：致敏率为0%时，可判为未见皮肤变态反应。