蛋白纯化试剂盒.ppt

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1、销销售培售培训训科研仪器产品科研仪器产品生化生化/分子生物分子生物生物工程设备生物工程设备实验室常用设备实验室常用设备蛋白核酸纯化试剂盒蛋白核酸纯化试剂盒一、一、NORGEN-NORGEN-公司概述公司概述NORGENNORGEN专利树脂专利树脂1.离子交换反应离子交换反应 离子交换层析是以离子交换剂离子交换剂为固定相固定相，以特定的含离子溶液含离子溶液为流动流动相相，利用离子交换剂与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。2.阳离子交换反应:阴离子交换反应：R-SO3HR-SO3 H反应简式为：反应简式为：R-NR3OHR-NR3+OH反应简式为：反应简式为：R-SO

2、3NaR-SO3 NaR-NR3ClR-NR3+Cl-离子交换反应v离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的具有离子交换功能的固态高分子材料。具有离子交换功能的固态高分子材料。v离子交换作用是可逆的离子交换作用是可逆的离子交换树脂离子交换树脂的工作过程离子交换树脂的工作过程：根据样品类型分别用酸和碱处理，最后调根据样品类型分别用酸和碱处理，最后调pH值至所需范围。值至所需范围。蛋白质核酸表面的带电基团和树脂上带相反电荷的离子交换基团相互结蛋白质核酸表面的带电基团和树脂上带相反电荷的离子交换基团相互结合合用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。

3、用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。先用清水洗涤，然后用再生剂再生，最后用清水洗至所需先用清水洗涤，然后用再生剂再生，最后用清水洗至所需pH值。值。离子交换层换层析技术术已广泛于各学学科领领域。在生物化学学及临临床生化检验检验中主要用于分离氨氨基酸、多肽肽及蛋白质质，也可用于分离核酸、核苷苷酸及其它带电它带电荷的生物分子。离子交换层析的应用离子交换层析的应用二、产品型号二、产品型号l蛋白质样品制备蛋白质样品制备 蛋白质纯化基本操作流程蛋白质纯化基本操作流程v样品准备样品准备v纯化柱的活化纯化柱的活化v蛋白质结合蛋白质结合v纯化柱的清洗纯化柱的清洗v洗脱蛋白质洗脱蛋白质蛋白纯化试剂盒

4、的优势蛋白纯化试剂盒的优势v 理论理论PI07酸性蛋白；酸性蛋白；714碱性蛋白碱性蛋白v 试剂盒试剂盒08酸性蛋白酸性蛋白（pH调至调至4.5）；814碱性蛋白碱性蛋白（pH调至调至7.0）+12346789105pH-蛋白质净电荷等电点选择碱性蛋白纯化流程选择酸性蛋白纯化流程注意事项注意事项v注意蛋白质样品起始注意蛋白质样品起始pH条件并进行调整，条件并进行调整，选择相应的酸性选择相应的酸性/碱性蛋白纯化流程碱性蛋白纯化流程v确定上样的体积，选择相应体积的试剂确定上样的体积，选择相应体积的试剂蛋白质浓缩、缓冲液交换蛋白质浓缩、缓冲液交换和脱盐试剂盒性能和脱盐试剂盒性能v 功能作用：功能作用

5、：norgen 树脂对于盐是低亲和力，对于蛋白是高树脂对于盐是低亲和力，对于蛋白是高结合力，盐去除、浓缩和缓冲液交换同时进行。结合力，盐去除、浓缩和缓冲液交换同时进行。v 高效性：高效性：20分钟处理分钟处理12个样品个样品v 高回收高回收：回收效率高达：回收效率高达99%v 无分子量的限制：从多肽到抗体都可处理无分子量的限制：从多肽到抗体都可处理v 适用的下游应用：质谱、适用的下游应用：质谱、SDS-PAGE、等点聚焦、等点聚焦、X射线晶射线晶型、核磁共振型、核磁共振表面活性剂去除试剂盒表面活性剂去除试剂盒v 表面活性剂：能显著降低溶剂表面活性剂：能显著降低溶剂(一般为水一般为水)的的表面张

6、力表面张力和液和液液液界面张力界面张力的一类物质的一类物质.由于它们能起乳化、分散、增溶、由于它们能起乳化、分散、增溶、润湿、发泡、消泡、杀菌等作用。润湿、发泡、消泡、杀菌等作用。v 功能作用：功能作用：同时去除酸性和碱性蛋白样品中的表面活性剂同时去除酸性和碱性蛋白样品中的表面活性剂（SDS、TritonX-100、CHAPS等）和浓缩蛋白质等）和浓缩蛋白质v 修饰性纯化柱活化和清洗缓冲液：修饰性纯化柱活化和清洗缓冲液：pH结合缓冲液异丙醇结合缓冲液异丙醇 v 适用于：质谱、适用于：质谱、SDS-PAGE、蛋白酶解、等点聚焦、蛋白酶解、等点聚焦、X射射线晶型、核磁共振波谱等线晶型、核磁共振波谱

7、等蛋白酶解试剂盒蛋白酶解试剂盒v功能作用：蛋白质和非活性酶结合在功能作用：蛋白质和非活性酶结合在纯化柱纯化柱上，盐类和非特异性物质被洗脱，胰蛋白上，盐类和非特异性物质被洗脱，胰蛋白酶然后被激活，多肽生成并被纯化酶然后被激活，多肽生成并被纯化v无额外的人工产物生成无额外的人工产物生成v适用于：质谱、适用于：质谱、SDS-PAGE、MALDI-TOF高丰度血清蛋白去除试剂盒高丰度血清蛋白去除试剂盒v高丰度血清蛋白高丰度血清蛋白:白蛋白；珠蛋白；白蛋白；珠蛋白；-抗胰蛋白抗胰蛋白酶酶v针对除去高丰度蛋白的离心柱针对除去高丰度蛋白的离心柱v功能功能:去除高丰度血清白蛋白和盐类，促进低丰度去除高丰度血清

8、白蛋白和盐类，促进低丰度蛋白的检测蛋白的检测v适用于适用于:SDS-PAGE、双向电泳、液相、双向电泳、液相/质谱、质谱、蛋白质芯片等蛋白质芯片等包涵体分离试剂盒包涵体分离试剂盒v功能：分离和纯化大肠杆菌培养的包涵体重组蛋功能：分离和纯化大肠杆菌培养的包涵体重组蛋白白v三合一：三合一：裂解、释放（细菌裂解液）；增溶（包裂解、释放（细菌裂解液）；增溶（包涵体增溶剂）；纯化（涵体增溶剂）；纯化（SiC离心柱）离心柱）v适用于：适用于：SDS-PAGE、双向电泳、重折叠、质、双向电泳、重折叠、质谱谱蛋白质和多肽内毒素去除试剂盒蛋白质和多肽内毒素去除试剂盒v内毒素：指机体在代谢过程中没有被排解而蓄积内

9、毒素：指机体在代谢过程中没有被排解而蓄积于体内的有毒物质比如各种原因引起人体肠道菌于体内的有毒物质比如各种原因引起人体肠道菌群失调时条件致病菌所产生的毒素群失调时条件致病菌所产生的毒素 v功能：除去蛋白质样品中的内毒素功能：除去蛋白质样品中的内毒素v方法：在纯化柱中加入内毒素去除剂方法：在纯化柱中加入内毒素去除剂v适用于：活体和离体的细胞和器官导入、单克隆适用于：活体和离体的细胞和器官导入、单克隆抗体和多克隆抗体制备抗体和多克隆抗体制备尿蛋白浓缩试剂盒尿蛋白浓缩试剂盒v同时浓缩尿蛋白和脱盐同时浓缩尿蛋白和脱盐v样品收集时加入稳定剂以防止尿蛋白降解样品收集时加入稳定剂以防止尿蛋白降解v无分子量限

10、制，处理广泛无分子量限制，处理广泛v适用于：适用于：SDS-PAGE;双向电泳、质谱、蛋白质双向电泳、质谱、蛋白质芯片等芯片等RNARNA纯化试剂盒的优势纯化试剂盒的优势v利用旋转、离心柱，操作简单、快速利用旋转、离心柱，操作简单、快速v从单一裂解液中按顺序分离核酸和蛋白质从单一裂解液中按顺序分离核酸和蛋白质-无需将无需将样品分份样品分份v分离总分离总RNA，从大分子的，从大分子的rRNA到到microRNAv无需无需苯酚或氯仿苯酚或氯仿的抽提的抽提v分离高质量的总分离高质量的总RNAv分离高质量的基因组分离高质量的基因组DNA，分子量，分子量30kbRNA/DNA/RNA/DNA/蛋白质同步

11、纯化试剂盒蛋白质同步纯化试剂盒v裂解细胞或组织裂解细胞或组织v分离蛋白质分离蛋白质v纯化纯化RNA-（最先）（最先）v纯化纯化DNAv纯化蛋白质纯化蛋白质RNA/RNA/蛋白质同步纯化试剂盒蛋白质同步纯化试剂盒v 同时分离和纯化所有长度的同时分离和纯化所有长度的RNA和蛋白质和蛋白质v 同一离心管从同一样品中分离同一离心管从同一样品中分离纯化，对于珍贵样品或微量样纯化，对于珍贵样品或微量样品极其重要。品极其重要。总总RNARNA纯化试剂盒纯化试剂盒v 可分离和纯化可分离和纯化极其微量的极其微量的RNA，例如从单个细胞中，例如从单个细胞中分离纯化。分离纯化。胞质胞核胞质胞核RNARNA纯化试剂盒

12、纯化试剂盒v 分离纯化微量样品中所分离纯化微量样品中所有胞质内和核内有胞质内和核内RNAv 无蛋白质和无蛋白质和DNA的污染，的污染，无需无需DNA酶处理酶处理白细胞白细胞RNARNA纯化试剂盒纯化试剂盒v 分离所有长度的白分离所有长度的白细胞细胞RNAv 无无DNA、蛋白质或、蛋白质或珠蛋白珠蛋白mRNA的污的污染染小分子小分子RNARNA试剂盒试剂盒v 分离所有小分子分离所有小分子RNA(200nt)v 无大分子的污染无大分子的污染v 针对大分子的离心柱针对大分子的离心柱尿（脱落细胞）尿（脱落细胞）RNARNA纯化试剂盒纯化试剂盒v 可分离和纯化极其微量的可分离和纯化极其微量的RNAv 无蛋白质、葡萄糖或盐类污染无蛋白质、葡萄糖或盐类污染四、参数四、参数v 上样量，处理量上样量，处理量v 回收率（蛋白质、回收率（蛋白质、RNARNA、DNA)DNA)v 浓缩率浓缩率v 脱盐率脱盐率v 处理速度处理速度v 洗脱体积洗脱体积v 内毒素残留量（最终）内毒素残留量（最终）v RNA/DNARNA/DNA的长度的长度五、竞争分析五、竞争分析vQiagen，promega，axygenvMerck，sigma，vAglient，Beckman六、产品卖点六、产品卖点v 产品优势产品优势 专利的树脂专利的树脂 独特的产品如尿蛋白纯化独特的产品如尿蛋白纯化v 原装进口原装进口