细胞说明书.docx

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1、细胞说明书一、细胞名称:牙龈成纤维细胞(HumanGingivalFibroblasts)二、货号:338476三、生长特性:贴壁口悬浮口半悬浮半贴壁四、细胞生长条件:培养基45%DMEM+45%Fl2血清10%FBS温度37空气条件5%CO2,95%AIR生长代数P2-3稳定传代5-10代冻存条件培养基50%+血清40%+DMSO10%五、组成:组成规格细胞一瓶T25细胞培养瓶/1.5ml冻存管细胞培养与操说明1份六、细胞接收后的操作流程与注意事项1 .细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。2 .如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细

2、胞及时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养23天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请及时联系实验室,技术人员会跟进解决。3 .贴壁细胞生长缓慢:适当提高血清浓度(最高不超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。4 .生长不均:贴壁细胞若出现生长不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重新打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。七、细胞常规培养传代流程(请严格遵守无菌操作)该细胞为原代细胞,建议1传21 .吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,力口23ml0

3、.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化时间,通常控制在l-2min)。2 .镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小时(不建议消化到细胞漂浮)吸去胰酶,加68ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。3 .取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,于培养箱中培养。4 .注意培养基PH值变化情况,定期换液,待细胞密度达到7080%时重复传代操作或者冻存。特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1 .收到细胞后请尽快更换为含10%FBS的新鲜培养基,切勿使用原瓶中运输用培养基。2 .如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时拍照并联系实验室。3 .细胞任何售后问题,均需拍照存档并及时联系客服。

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