细胞说明书.docx

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1、细胞说明书一、细胞名称：牙龈成纤维细胞（HumanGingivalFibroblasts）二、货号：338476三、生长特性：贴壁口悬浮口半悬浮半贴壁四、细胞生长条件：培养基45%DMEM+45%Fl2血清10%FBS温度37空气条件5%CO2,95%AIR生长代数P2-3稳定传代5-10代冻存条件培养基50%+血清40%+DMSO10%五、组成:组成规格细胞一瓶T25细胞培养瓶/1.5ml冻存管细胞培养与操说明1份六、细胞接收后的操作流程与注意事项1 .细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度，换液培养或传代。2 .如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细

2、胞及时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养23天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时联系实验室，技术人员会跟进解决。3 .贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（最高不超过20%）,或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养。4 .生长不均：贴壁细胞若出现生长不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重新打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。七、细胞常规培养传代流程（请严格遵守无菌操作）该细胞为原代细胞，建议1传21 .吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，力口23ml0

3、.25%EDTA的胰酶消化（注意把握消化时间,通常控制在l-2min）。2 .镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小时（不建议消化到细胞漂浮）吸去胰酶，加68ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。3 .取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，于培养箱中培养。4 .注意培养基PH值变化情况，定期换液，待细胞密度达到7080%时重复传代操作或者冻存。特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）1 .收到细胞后请尽快更换为含10%FBS的新鲜培养基，切勿使用原瓶中运输用培养基。2 .如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系实验室。3 .细胞任何售后问题，均需拍照存档并及时联系客服。