超灵敏型CCK-8细胞活力毒性检测试剂盒说明书.docx

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1、超灵敏型CCK-8（细胞活力/毒性检测）试剂盒说明书超灵敏型CCK-8细胞活力测定试剂盒是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性相对定量及绝对定量检测的快速、高灵敏度试剂盒，比传统的MTT、XTT及CCK-8方法具有更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。产品优势：本试剂盒检测非常便扰。试剂盒仅一管已经配制好的超灵敏型CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解反应生成物，可用于大批量样品的高通量检测。使用方法：1、使用96孔板，细胞培养和处理完毕。2、逐孔加入超灵敏型CCK-8试剂，每孔100l培

2、养基中加入10l超灵敏型CCK-8试剂。3、培养板放回培养箱，37孵育14小时。4、于49Onm处测定OD值。5、结果分析将各测试孔的OD值减去对照孔OD值。各平行孔的OD值取平均数。细胞活力二（加药细胞OD-空白OD）/（对照细胞OD-空白OD）100%6、若使用除96孔外的培养板，试剂用量按照培养基体积等比例增减。使用注意事项：1、试剂加入后需轻轻振摇培养板，使超灵敏型CCK-8试剂与培养基充分混匀。2、试剂加入后培养时间根据细胞种类的不同和每孔细胞数量的多少而异。对于贴壁细胞，加入超灵敏型CCK-8的培养时间一般为14小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度（根据细胞种类而定）

3、。与贴壁细胞相比，悬浮细胞较难显色。对于悬浮细胞，在加入超灵敏型CCK-8培养14小时后，可先从培养箱中取出，目测染色程度或用酶标仪测定。若显色困难，可以将培养板放回培养箱，继续培养数小时后再确定。3、如果实验中有还原剂，需要检查背景的OD值，即在不含细胞的培养基中加入药物，然后加入超灵敏型CCK-8试剂在一定时间内检测，和不加药物的培养基进行比较（只加超灵敏型CCK-8试剂），如果OD值明显偏高，则说明有反应。4、若细胞培养时间较长导致培养基颜色或PH发生变化，建议更换新鲜培养基后再加入超灵敏型CCK-8试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂的使用。5、如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议设定60

4、0nm（或60Onm以上）作为参比波长，扣除参比波长的OD值即可。6、如果要测定细胞的具体数量，需要先做个标准曲线。7、若测得OD值过高，可酌减铺板细胞数或超灵敏型CCK-8试剂用量。8、本试剂盒灵敏度高，相比传统的CCK-8法及MTT.XTT法，建议起始细胞加样数/培养数减半或更少，其他实验条件不变。如用CCK-8法时需加4000个细胞培养后检测，用本试剂盒时仅需2000个细胞即可。9、实验结束时，于49Onm所测得OD值在0.51.5范围内为佳。试剂包装：I(X)次：ImIXl瓶；50()次：5mlxl瓶；3,000次：5mlx6瓶；10,000次：1()OmIXl瓶；贮藏条件：超灵敏型CCK-8在避光05的条件下存放一年,测定效果完全不变。在-20的条件下可以贮存更久。本产品仅供科研使用，不做其它用途。