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1、实验室移液枪的操作和维护移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于顶尖高手而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用。移液枪的分类和工作原理气体活塞式移液枪工作原理:通过弹簧的伸缩运动,推动活塞,排除部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排除液体。塞式移液枪工作原理:通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体,活塞和液体直接接触,没有空气柱,适用于密度、黏度与水不同的液体,如易挥发性溶液、粘稠液体等。移液枪使用诀窍气体活塞式移液枪(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差。(2)气密性:吸头和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨
2、损,造成误差。(3)吸速:容易造成吸头内气泡产生,而且会污染枪头。(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。2具体使用方更换tip法:最精确。(1)调节旋钮到所需刻度位置,诀窍:首先可略超过一些,再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度,避免人为误差。(2)插上tip:无菌操作时,要注意动作迅速正确,不能用手碰tip,动作的力度要保持一致,禁止废动作。普通操作时,可用拇指食指上紧,但手不能碰tip尖端处。(3)指压到第一段,tip尖端接触试剂。白色tip进到液面ImIn一下,黄色吸头2-3m,蓝色吸头2-
3、4Innb避免液压的影响造成的误差。(4)缓慢吸试剂,禁止速度过快,液体进入枪头。(5)移出吸头后,先在容器内壁轻轻靠住,使吸头外壁液体流下。(6)将吸头贴在目标容器内壁,轻轻按到第一段,压出液体。(7)吸头尖端在容器内壁略上滑动,保留尖端少量液体,移出目标容器,手指卸掉吸头,注意不要使试剂溅出。一只吸头分注法:不适用于挥发性,有毒性试剂。(1)同上述A-D,移出液面后,先缓慢按到第一段,在用力按到第二段,将试剂全压出。同上述C,缓慢吸出液体。(3)在目标容器液体上空,压出试剂到第二段,注意压的力度要和A相同,还应注意试剂不要四处飞溅。(4)缓慢返回第一段,可重复上述操作。达到目标容器原有液体
4、不污染吸头的目的。转移数Ul的贵重试剂时的方法:(D同上述A-D,移出液面后,在容器内壁轻按几下,使外壁液体流下。白色吸头进到液面Imm以下,这最重要。(2)tip尖端浸入目标容器的液面下,缓慢压到第一段。(3)松开,返回到第一段,重新吸入液体,反复4-5次,洗净吸头内壁液体。将吸头尖端移出液面,在内壁轻轻靠住,压出液体到第二段。移液枪使用注意事项,要注意以下几点:1 .正确选择移液枪与吸头组合量程空气柱的体积越小,误差越低。2 .吸头的浸没深度吸头尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面,但是同时要浸没得足够深防止吸取空气。3 .垂直吸取液体移液时角度不同,液体压力也会改变。4 .预润湿通过
5、预润湿,使得空气柱充满饱和的液体分子,至少预润湿3次,使得空气柱里的液体分子达到饱和。5 .正确的放液操作放液时,吸头尖靠在容器内壁,完全打出,排出最后的液滴;体积低于IOUI直接放液到容器底部。6 .缓慢、匀速的吸放液体,保证结果的精确性。移液六部曲L装吸头移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。7 .量程设定操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在IOTo0%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35To0%量程范围内操作。量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转
6、,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。8 .润洗用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。注意:高温或者低温液体请不要润洗!9 .吸头浸入角度吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20。10 吸头浸入深度:0.I-IOul10-200ul:2-3mm200-2000ul:3-6mmover2000ul:6-IOmmo11 吸头浸入时间吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。12 吸液速度匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气
7、雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。13 排液及吹液先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。排液四种方式:沿内壁、在液面以上、在液体表面、液面下。14 手温移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。移液枪的维护保养密封性检查1 .仪器测漏2 .简单目测法1)200此及以下的移液器,吸液后将吸头浸入液面L2mm,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降。2) 1000UL以上的移液器,吸液后将吸头移出液面,朝下垂直静置15-20秒,观察是否有液体下滴。移液器的清洗方式外部清洁:日常清洁剂(专业清洗剂,肥皂液,洗洁精等)擦洗,然后用纯水淋洗,晾干即可。内部清洁:
8、D下半部分拆卸下来。2)塑料部件(套柄等)采用与外部清洁一致的方式即可。3)活塞清洁可用纯水(或先用异丙醇冲洗再用纯水洗净),晾干,然后在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的硅酮油脂。注:移液器主体密封部分,大多是免维护的,不能轻易拆卸。移液器的故障分析解决问题可能原因解决方法吸头漏液或分液体积不准确吸头松脱或吸头不匹配插紧吸头;更换匹配的吸头移取粘稠、易挥发性或与水密度有明显差异的液体预润湿吸头数次移液过快缓慢移动控制按钮,慢吸慢放吸头离开液面过快在液面下停留3秒钟,再缓慢移出吸头活塞被污染或损坏清洁或更换活塞移液枪吸嘴损坏更换移液枪下半部分零件或通道控制按钮移动困难,发涩。活塞被污染密封圈污染移液枪堵塞清洁移液枪下半部分更换过滤芯安装吸头时吸嘴无弹性伸缩锁定环取消了弹簧加载取下锁定环