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1、真 菌 概 述2 概概 念念 真菌真菌(fungus)(fungus)是一类具有典型细胞核,是一类具有典型细胞核,有核膜和核仁,胞浆内有完整的细胞器,有核膜和核仁,胞浆内有完整的细胞器,无根、茎、叶,不含叶绿素,无光合色无根、茎、叶,不含叶绿素,无光合色素,细胞壁含几丁质和纤维素的单细胞素,细胞壁含几丁质和纤维素的单细胞或多细胞异养真核细胞型微生物。或多细胞异养真核细胞型微生物。真菌概念 真菌真菌(fungus)(fungus):真核真核细细胞型胞型微生物微生物 具有典型细胞结构(细胞核、细胞器、细胞壁) 无根、茎、叶,不含叶绿素 细胞壁含几丁质和(或)纤维素 以腐生或寄生方式摄取养料 能进行
2、有性生殖和(或)无性繁殖 生长缓慢4 概概 念念 真菌分布广泛,种类繁多,大多数无害,甚至有利。 有些真菌也是造成动植物病害的病原,与医学有关的约数百种,少数真菌可以引起人类感染性、中毒性及变态反应性疾病。 近年来近年来,由于抗菌药物的广泛应用和或应用激由于抗菌药物的广泛应用和或应用激素、抗癌药物导致机体免疫功能降低等原因,素、抗癌药物导致机体免疫功能降低等原因,机会致病真菌感染机会致病真菌感染也也明显增多。明显增多。原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较 原核细胞型微生物真核细胞型微生物原核细胞型微生物真核细胞型微生物 细胞核结构细胞核结构核膜核膜 无无
3、 有有核仁核仁 无无 有有分裂方式分裂方式 主要以二分裂主要以二分裂 有丝分裂,减数分裂有丝分裂,减数分裂细胞质结构细胞质结构细胞膜细胞膜 常缺乏固醇常缺乏固醇 常有固醇常有固醇 细胞壁细胞壁 含肽聚糖含肽聚糖 含几丁质和(或)纤维素含几丁质和(或)纤维素细胞器细胞器 较简单,有中介体较简单,有中介体 复杂,有内质网和高尔基体复杂,有内质网和高尔基体核糖体核糖体 70S 80S 呼吸系统呼吸系统 质膜或中介体质膜或中介体 线粒体线粒体 第一节第一节 分分 类类 真菌分类的主要依据为:真菌分类的主要依据为: 有性生殖的各种器官有性生殖的各种器官 无性菌丝和孢子及菌落的形态等特征无性菌丝和孢子及菌
4、落的形态等特征 大多数学者认为真菌应作为一个独立界真菌界,并曾将真菌分为两个门,即黏菌门和真菌门,真菌门又根据其生物学性状等传统地分为五个亚门。 最新的真菌分类是把真菌界分为四个门。分 类 真菌真菌门门:5 5个个亚门亚门(传统)(传统) 鞭毛菌鞭毛菌亚门亚门 接合菌接合菌亚门亚门 子囊菌子囊菌亚门亚门 担子菌担子菌亚门亚门 半知菌半知菌亚门亚门(医学医学相相关关: 后后4 4个个亚门亚门) 最新分最新分类类:真菌界真菌界:4 4个个门门: 接合菌接合菌门门 担子菌担子菌门门 子囊菌子囊菌门门 壶壶菌菌门门第二节 基本特性一、一、形态特性形态特性 真菌比细菌大,用普通光学显微镜的低倍或高倍镜就
5、可见。 真菌菌体外有一层坚硬的细胞壁;其细胞膜含固醇而细菌无。 按形态可将真菌分为单细胞和多细胞两类。第二节 基本特性 一、一、形态特性形态特性 单细胞真菌: 圆形或卵圆形,常见于酵母菌或类酵母菌 多细胞真菌: 菌丝+孢子 交织成团菌丝体(霉菌) 二相性真菌: 37呈酵母型,25呈丝状型的真菌单细胞真菌单细胞真菌 形态:圆形或椭圆形,如酵母型和类酵母型真菌。(1)酵母型真菌:有孢子,无菌丝 菌丝:无 繁殖方式:从母细胞芽生 菌落形态:与细菌相似 芽生孢子芽生孢子酵母菌在培养基上菌落形态单细胞真菌单细胞真菌(2)类酵母型真菌:芽生孢子与假菌丝 菌丝:假菌丝 假 菌 丝:长的芽体可伸进培养基内 繁
6、殖方式:从母细胞芽生 菌落形态:与酵母型相似,由假菌丝联结成假菌丝体,称为类酵母型菌落假菌丝 假菌丝:类酵母菌进行出芽生殖时,子母细胞不立即分离而以狭小的面积相连,这种藕节状的细胞串为假菌丝。 假菌丝与真菌丝明显不同处在于其两细胞间有一细腰,而不象真正菌丝横隔处两细胞宽度一致。 多细胞真菌多细胞真菌 由菌丝和孢子两大部分组成 1.菌丝 (hypha) 2.孢子 (spore)18(一)菌丝(hypha) 真菌在适宜环境中,由孢子出芽长出芽管,逐渐真菌在适宜环境中,由孢子出芽长出芽管,逐渐延长呈丝状,称为延长呈丝状,称为菌丝(菌丝(hyphahypha)。菌丝继续分支,。菌丝继续分支,交织成团,
7、称交织成团,称菌丝体(菌丝体(myceliummycelium)。菌丝分为营养菌丝和气生菌丝,气生菌丝中能形成孢子的叫做生殖菌丝。有些真菌的菌丝具有隔膜,叫有隔菌丝;有些真菌的菌丝无隔膜,叫无隔菌丝。不同形态的菌丝具有鉴别意义(1) 单纯菌丝 细长的管状组织,有粗有细分枝或不分枝,有隔或无隔,有色或无色。(2) 球拍状菌丝 菌丝在隔膜部位一端膨大球拍状,排列规整。(3) 破梳状菌丝 菌丝一侧有不规则的梳齿状凸起,梳齿参差不齐如破梳状。(4) 螺旋状菌丝 菌丝呈弹簧状,有规律性旋转状生长。(5) 结节状菌丝 稍膨大的侧枝细胞、菌丝端细胞或中间性细胞弯曲成团,互缠成结。(6) 鹿角状菌丝 菌丝顶端
8、呈不规则分枝,状如鹿角。22(二)孢子(spore) 孢子(孢子(sporespore)是真菌的繁殖结构。)是真菌的繁殖结构。孢子分有性与无性两类。孢子与细菌芽胞不同。 真菌孢子真菌孢子 细菌芽胞细菌芽胞抵抗力抵抗力不强,6070短时间即死强,煮沸短时间不死数目数目一条菌丝可产生多个孢子 一个细菌体只形成一个芽胞作用作用为繁殖方式之一不是繁殖方式形状形状形状多种多样圆形或椭圆形真菌孢子与细菌芽胞的区别 二相真菌:一些真菌可因寄生环境及培养条件(营养、温度、氧气等)的不同而交替形成两种形态,即在室温中呈霉菌型,在37摄氏度或体内呈单细胞的酵母型,这类真菌有双向性,所以称之为双态真菌或二相真菌。如
9、球孢子菌、组织胞浆菌及芽生菌。二相真菌二相真菌二相真菌二相真菌机体内寄生机体内寄生37单细胞型:单细胞型:多细胞型:多细胞型:含动物蛋白培养基含动物蛋白培养基酵母菌酵母菌沙保氏培养基沙保氏培养基2525普通培养基普通培养基2525丝状菌丝状菌孢子孢子 (spore)(spore) 孢子是生殖结构,由生殖菌丝产生。是鉴定和分类的依据。 (1) 无性孢子 不经过两性细胞的配合而产生 ,菌丝上的细胞分化或出芽生成,病原性真菌大多形成无性孢子。 (2) 有性孢子 同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成。绝大多数为非致病性真菌所具有。26 无性孢子分为:无性孢子分为:分生孢子:分生孢子:大分生
10、孢子小分生孢子叶状孢子:叶状孢子:芽生孢子关节孢子厚膜孢子孢子囊孢子孢子囊孢子 有性孢子分为有性孢子分为:卵孢子、接合孢子、子囊孢子及担孢子(二)孢子(spore)无性孢子无性孢子1) 叶状孢子 由菌丝细胞直接形成 芽生孢子 通过发芽方式形成圆形或卵形的细胞 关节孢子 由菌丝分化成长方形的几个节段,胞壁稍厚 厚膜孢子 是一种休眠细胞,条件适宜可再发芽 2) 分生孢子 常见的一种无性孢子 形状、大小、结构、颜色等:分类、鉴定 大分生孢子 体积较大,多细胞性。孢子呈纺锤形,棍棒状等。 小分生孢子 体积小,单细胞性,外壁薄,球形、卵形、梨形以及棍棒状等。无性孢子无性孢子生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成
11、;也可从菌丝侧面出芽形成大分生孢子的形态大分生孢子的形态3) 孢 (子) 囊孢子 由丝末端形成一种囊状结构(孢子囊),内有许多孢囊孢子。 无性孢子无性孢子多细胞真菌形态多细胞真菌形态真菌孢子和细菌芽胞的真菌孢子和细菌芽胞的区别区别真菌孢子细菌芽胞抵抗力不强,60-70短时间杀死强,煮沸短时间不死数目一条菌丝可产生多个孢子一个细菌体只形成一个芽孢作用为繁殖方式之一不是繁殖方式形成位置可在细胞内外形成只在细菌细胞内形成形状形态、色泽多样圆形或椭圆形繁殖与培养繁殖与培养 依靠孢子及菌丝进行繁殖:有性繁殖 无性繁殖无性繁殖 1.芽生: 酵母菌及酵母样真菌 2.裂殖: 以二分裂法进行繁殖 3.萌管: 萌
12、发芽管,芽管伸延后形成菌丝 4.隔殖: 在分生孢子梗某一段落形成一隔膜,随之原生质浓缩而形成一个新的孢子。孢子可再独立繁殖。 真菌的培养特性真菌的培养特性 真菌的营养要求不高 常用沙保培养基 :蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。 温度:2228,但某些深部感染的真菌为37。 pH:4.06.0 生长速度:较慢“三低两高”常用的培养基 沙氏琼脂培养基沙氏琼脂培养基Sabourauds Agar 蛋白胨 10.g 葡萄糖 40.0g 琼脂 20.0g pH值5.6 0.2 蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。 马丁氏(Martin)培养基(分离真菌用) 配方KH2PO4 1gM
13、gSO4 7H2O 0.5g 蛋白胨 5g葡萄糖 10g琼脂 15-20g水 1000mLpH 自然此培养液1000mL加1%孟加拉红1%水溶液3.3mL.临用时每100mL培养基中加入1%链霉素液0.3mL. 基本原理 葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH2PO4和MgSO4 7H2O作为无机盐,为微生物提供钾,磷,镁离子.而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以达到优势生长,从而达到分离真菌的目的.察氏琼脂察氏琼脂Czapek Dox Agar 硝酸钠 磷酸氢二钾 硫酸镁 氯化钾 硫酸亚铁 蔗糖 琼脂 3.0 1.0 0.5 0.5
14、 0.01 30.0 15.0 原理:原理: 硝酸钠提供氮源;磷酸氢二钾是缓冲剂;硝酸钠提供氮源;磷酸氢二钾是缓冲剂; 硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁提供必须的离子;硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁提供必须的离子; 蔗糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。蔗糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。 用途:用于青霉用途:用于青霉,曲霉鉴定及保存菌种用曲霉鉴定及保存菌种用(GB标准标准)孟加拉红培养基(虎红培养基)孟加拉红培养基(虎红培养基)Rose Bengal Medium 蛋白胨 葡萄糖 磷酸二氢钾 硫酸镁(无水) 琼脂 孟加拉红 氯霉素 5.0 10.0 1.0 0.5 20.0 0.033 0.1 原理:原理:
15、蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长;孟加拉红作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长,并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。 1.酵母型菌落 : 菌落柔软、光滑、湿润。镜下可见单细胞性的芽生孢子,无菌丝。隐球菌菌落 2.类酵母型菌落(酵母样菌落) : 和酵母型菌落相似,镜下可见假菌丝。白色念珠菌菌落 3.丝状型菌落 : 由多细胞菌丝体组成的絮状菌落(一部分向空中生长,并形成孢子)。丝状真菌或霉菌菌落。 (菌落较大)真菌的培养特性真菌的培养特性赭曲霉赭曲霉镰刀菌及其大分生孢子镰刀菌及其大分生孢子黄曲霉菌
16、落形态黄曲霉菌落形态黄曲霉镜下特征黄曲霉镜下特征青霉菌菌落形态青霉菌菌落形态青霉菌镜下形态青霉菌镜下形态镰刀菌菌落形态镰刀菌菌落形态镰刀菌镜下特征镰刀菌镜下特征变异与抵抗力 多次传代或孵育过久,容易变异(形态、结构、菌落性状、色素以及生理性状 (毒力)的改变。 热:不强。孢子一般60经1h即被杀灭(不同于芽胞)。 干燥、日光、紫外线及多种化学药物:耐受性较强。 1%3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10甲醛液:较敏感。 55三、三、 致病性致病性 致病物质:致病物质: 细胞壁糖蛋白(有内毒素样活性)、毒素、荚膜等。 致病方式:致病方式: 病原性真菌感染(主要是外源性真菌感染) 条件致病性真菌感染(主要是内源性真菌) 真菌变态反应性疾病(皮炎、哮喘等) 真菌性中毒(毒素引起) 真菌毒素与肿瘤的关系(黄曲霉毒素等)真菌性感染真菌性感染 真菌病 (mycoses): 由真菌引起感染并表现临床症状者 真菌的致病力比细菌弱 致病性真菌、条件致病性真菌原发性感染: 球孢子菌(Coccidiodes)、 皮炎芽生菌 (Blastomyoes dermatitidis)、 组织胞浆菌(Histo