白鲜中内生菌中检测药用成分白藓碱梣酮以及黄柏酮.docx

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1、白鲜中内生菌中检测药用成分白解碱，样酮以及黄柏酮白鲜的内生菌对植物生长发育的影响以及内生菌的抑菌性等目的：从白鲜的内生菌中检测到白鲜碱,将胴，黄柏碱1前言（白鲜药理作用药用价值，内生菌的多样性引出白鲜中内生菌多样性真菌180细菌100的株，内生菌中有效成分白鲜碱，黄柏碱以及榨酮的作用）1.1 白鲜的研究概述1.1.1 形态特征（白鲜植物的图片，根，药用部位图片）白鲜DiCIammdasycarpus（7i,rc工）是芸香科（rutaceae）白鲜网（DiCtanInUS1.）多年生草本植物，全株有特殊的剌激性气味.（B卫生部药典别名有北鲜皮，臭根皮,八股牛等。多年生白鲜茎基部木质化，全株泳约4

2、0100cm,根为黄白色至黄褐色，肉质:奇数羽状复叶，互生，小叶9-13,卵形至椭圆形，边缘有细锯齿21药用植物学：叶轴有狭翼：顶生总状花序可达30cm,花轴及花柄生有白色绒毛：花色淡红色，黑片5,花楣5：雉浅伸出花楣外部：瓶果5裂；种子阔卵形或进圆球形：花期5月：果期8-9月.由周亚福,匚少利,李恩地白鲜的生物学与化学成分研究进展A中国农学通报2013,29（7）：65-69传统以干燥根皮入药.中药名为白鲜皮，具有清热燥湿，袪风止痒以及解南等重要药理作用，用以治疗黄水淋漓,湿疹，黄疸尿赤1.1.2 白鲜的资源分布白鲜属植物世界约有5个属，我国现发现有2风,分别为白鲜Ddasycarpus和狭

3、叶白鲜DangustifoIiusGDoc（狭叶白鲜主要产自新疆，其他地区尚未发现）。在四川、山东、江苏、安徽等地均有分布，以黑龙江、辽宁、吉林、内蒙古为其主要产区，主要占全国总量80%左右,质量优于其他产地。E即丁立威白鲜皮走势坚挺20002009白弹皮产销分析中国现代中药。白鲜喜温暖湿涧的环境，野牛.白鲜多数生长在向阳的山坡、低矮灌丛中，平地灌丛及砂石土壤中也常见，其适应性极强。1.1.3 白鲜的主要化学成分白鲜的主要化学成分包括生物碱类、柠檬苦素类、脩体类、香豆素及黄酮类、挥发油类、白鲜粗多糖、倍半菇、倍半菇类以及倍半菇做类化合物.11.31生.物碱类化合物1.1.3.2香豆素类（以此列

4、举）1.1.4白鲜的药理作用1.2内生菌的研究概况生物多样性，普遍存在性，生物学作用，内生菌活性产物的研究，研究存在的问题2材料与方法2.1 材料2.1.1 实验材料白鲜植物的使用部位，采集地点时间个数2.1.2 试剂次氯酸钠,无水乙醉,葡萄糖,琼脂2.1.3 培养基PDANA孟加拉红2.1.4 主要仪器设备2.2 方法2.2.1 白鲜中分离纯化内生菌分菌方法（可以仃个消毒条件的表，次氯酸钠的浓度梯度，消蠡时间。）2.2.2 对内生重是否产生有效成分的初筹内生真菌的初筛对上述得到的真菌用统一打孔器取12-15个菌饼，菌丝面朝下与PDA培养基中培养7-10天待其前丝长满培养皿时刮取黄丝与滤纸上置

5、于28-30摄氏度的烘箱中烘干，将烘干的菌丝置于2m1.离心管中,加入甲醉定容1.5m1.超声波提取（40C,2h）最后离心的到上层液体。用薄层层析法检测液体内有无白鲜碱（237nm紫外分光光度计看其最大峰值黄柏酮以及楞酬同上对有明显反应的进行下一步的笑筛.内牛.细菌的初筛2.2.3 对得到的内生真菌及内生细菌进行冗第内生爽.菌发辞产物及内生细菌发醉产物的制备内生真菌发酵产物制备发酵液，菌丝体）内生细菌发醉产物制备对内生真菌及内生细菌发醉产物的高效液相色谱内生真菌发酵产物活性分析0内生细菌发酵产物活性分析143结果1.4.3.1 发酵产物制备（菌侏的生长形态图片可在不同培养基下对比初筛时的照片

6、（五个菌饼长满皿,离心后的照片，紫外分光光度计照片与标准品对照或者显色反应现象对照发筛时（摇菌后菌丝图片，回流定容后得到浓缩液的照片，高效液相色谱的照片对照，1.4.3.2 发醉产物的定性检测（与标准品对照的图片，紫外分光光度计卜的吸收峰图片，最后得到有明显现象的真菌及细菌的照片3结果分析3.1 白鲜中内生分离纯化的结果7撤I1.撇133.2 白鲜中内生苗进行初筛的结果要有五个曲柄生长后刮取菌丝时培养皿的照片，离心管中液体照片，薄层层析有现象的照片3.3 白锌中内生进行复篇的结果高效液相色谱的峰值照片造纸上对照结果照片摇菌后照片，以及回流得到的液体照片回流的结果与以上两种结果成分含世以及薄层层析现象的对照表格