(新)微生物质控.ppt

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1、临床细菌学检验的质量控制临床细菌学检验的质量控制概念概念l质量控制(质量控制(Quality control) 是临床微生物学实验室为了保证检验结是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系作程序体系目的目的l临床微生物学的质量控制临床微生物学的质量控制是保证细菌的是保证细菌的直接涂片、培养、鉴定、药敏试验及血直接涂片、培养、鉴定、药敏试验及血清学试验等的准确性,避免因操作变化清学试验等的准确性,避免因操作变化导致检验结果错误,造成误诊导致检验结果错误,造成误诊室内质量控制室内质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求l

2、操作手册操作手册l仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测l培养基的质量控制培养基的质量控制l试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控l临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制l标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存一、对细菌检验人员的要求一、对细菌检验人员的要求高度的主观判断力高度的主观判断力 个人的技能、经验个人的技能、经验 细菌学的专业水平细菌学的专业水平培训班培训班实验室进修实验室进修学术交流学术交流专业期刊专业期刊室内质量控制室内质量控制l对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求 操作手册操作手册l仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测l培养基的质量控制培养基的质

3、量控制l试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控l临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制l标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存二、操作手册二、操作手册l各级人员的职责和权限各级人员的职责和权限l实验室安全措施实验室安全措施l标本采集和处理指南标本采集和处理指南l细菌检验项目细菌检验项目l培养基和试剂的配制方法培养基和试剂的配制方法l室内和室间质量控制室内和室间质量控制l参考数据参考数据 二、操作手册二、操作手册参考书:参考书:l诊断细菌学诊断细菌学l实用临床微生物诊断学实用临床微生物诊断学l临床微生物学诊断与图解临床微生物学诊断与图解l全国临床检验操作规程全国临床

4、检验操作规程l临床微生物学和微生物学检验临床微生物学和微生物学检验lManual of Clinical Microbiology室内质量控制室内质量控制l对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求l操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测l培养基的质量控制培养基的质量控制l试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控l临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制l标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l高压灭菌器:定期监测(每月一次)高压灭菌器:定期监测(每月一次) 生物指示剂:嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂:嗜热脂肪芽孢杆

5、菌 化学指示剂:变色的指示带化学指示剂:变色的指示带l培养箱、冰箱、水浴箱:培养箱、冰箱、水浴箱: 每日早、晚两次温度观测,绘制温度曲线图每日早、晚两次温度观测,绘制温度曲线图三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l厌氧培养装置:厌氧培养装置: 化学标记:化学标记: 美蓝美蓝 生物学指标:铜绿假单胞菌生物学指标:铜绿假单胞菌lCO2培养箱培养箱 : 每天检查箱内的每天检查箱内的CO2含量含量三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测l生物安全柜:生物安全柜: 定期更换滤网,紫外线每定期更换滤网,紫外线每3月检查月检查1次次l细菌培养仪细菌培养仪 : 每批培养瓶进行少量生长试验每批培养瓶

6、进行少量生长试验 有效期内使用有效期内使用l微生物鉴定仪微生物鉴定仪 及时更新软件及时更新软件 每批号鉴定卡用标准菌株测定每批号鉴定卡用标准菌株测定三、仪器设备的功能监测三、仪器设备的功能监测 表表1 仪器设备的质量控制标准仪器设备的质量控制标准设备设备 控制标准控制标准 允许范围允许范围高压灭菌器高压灭菌器121 121培养箱培养箱 35 1水浴箱水浴箱 37 0.5冰箱冰箱 4 2低温冰箱低温冰箱-20 5CO2培养箱培养箱5%10% 10%室内质量控制室内质量控制l对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求l操作手册操作手册l仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测 培养基的质量控制培养基的质

7、量控制l试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控l临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制l标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(1)配制记录:配制记录:l培养基的制作过程必须统一培养基的制作过程必须统一l无论是培养基或添加剂的剂量、无论是培养基或添加剂的剂量、pH值、高值、高温灭菌的时间或温度,都需遵照规定温灭菌的时间或温度,都需遵照规定l培养基名称、本批配制量、配方、配制日期培养基名称、本批配制量、配方、配制日期和配制人员姓名都必须详细记录和配制人员姓名都必须详细记录 四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(2)培养基外

8、观的检查:培养基外观的检查: l新配或新购入的培养基必须先以肉眼检查其新配或新购入的培养基必须先以肉眼检查其颜色与透明度,培养基应澄清,无浑浊颜色与透明度,培养基应澄清,无浑浊l培养基的色泽不正常应测其培养基的色泽不正常应测其pH值,不得超过值,不得超过所预期值的所预期值的0.2l平板培养基最易脱水,应放在严密的有盖容平板培养基最易脱水,应放在严密的有盖容器内或塑料袋内。这样平板内培养基可保存器内或塑料袋内。这样平板内培养基可保存两周左右,试管内培养基可保存两周左右,试管内培养基可保存1-2个月个月四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(3)无菌试验:无菌试验:l 每批配好的培养基须进行无菌

9、试验每批配好的培养基须进行无菌试验l随机选取随机选取5%10%的量,如果配制大量的培的量,如果配制大量的培养基,则任意选取养基,则任意选取10个平板或管装培养基,个平板或管装培养基,35温度下隔夜培养,证明无菌生长为合格温度下隔夜培养,证明无菌生长为合格四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(4)培养基的量:培养基的量:l平板培养基的厚度一般为平板培养基的厚度一般为3mm (90mm平皿平皿+1520ml培养基)培养基)l药敏试验用为药敏试验用为4mm (90mm平皿平皿+25ml培养基)培养基)l斜面不超过试管的斜面不超过试管的2/3四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(5)培养基的有

10、效性试验:培养基的有效性试验:l 每一批新制或新购的培养基,使用前均须取已知性每一批新制或新购的培养基,使用前均须取已知性质的标准菌株试验是否能支持,区分或选择某类细质的标准菌株试验是否能支持,区分或选择某类细菌的生长菌的生长l培养基的试验结果需要加以记录,项目包括试验日培养基的试验结果需要加以记录,项目包括试验日期、试验结果以及实验者的签名等。且此记录本需期、试验结果以及实验者的签名等。且此记录本需便于检验室人员的查看,以便能随时解决任何发生便于检验室人员的查看,以便能随时解决任何发生的难题的难题 四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制表表2 常用培养基的质量控制常用培养基的质量控制培养基

11、培养基质控菌种质控菌种生长情况生长情况结果结果血琼脂血琼脂 巧克力琼脂巧克力琼脂营养琼脂营养琼脂麦康凯琼脂麦康凯琼脂 中国蓝琼脂中国蓝琼脂 SS琼脂琼脂 沙保罗琼脂沙保罗琼脂 化脓链球菌化脓链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌福氏志贺菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌福氏志贺菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌产气肠杆菌产气肠杆菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌大肠埃希菌大肠埃希菌白色假丝酵母菌白色假丝酵母菌+-+-+-+明显乙型溶血环明显乙型溶血环甲型溶血环甲型溶血环24h生长生长生长生长分解乳糖,菌落红色分

12、解乳糖,菌落红色不分解乳糖,菌落无色透明不分解乳糖,菌落无色透明不生长不生长分解乳糖,菌落蓝色分解乳糖,菌落蓝色不分解乳糖,菌落无色不分解乳糖,菌落无色不生长不生长粉红色菌落粉红色菌落无色菌落,中心黑色无色菌落,中心黑色 四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制表表2 常用培养基的质量控制常用培养基的质量控制生长生长生长,生长, 溶血溶血生长生长部分抑制部分抑制生长,黄色菌落生长,黄色菌落生长,蓝绿色菌落生长,蓝绿色菌落大量生长大量生长抑制生长抑制生长+-脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌产气荚膜梭菌菌产气荚膜梭菌菌空肠弯曲菌空肠弯曲菌大肠埃希菌大肠埃希菌霍乱弧菌霍乱弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌霍乱弧菌霍乱弧菌

13、大肠埃希菌大肠埃希菌厌氧血平板厌氧血平板 弯曲菌琼脂弯曲菌琼脂TCBS琼脂琼脂碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水 结果结果生长情况生长情况质控菌种质控菌种培养基培养基四、培养基的质量控制四、培养基的质量控制(6)培养基的有效期:培养基的有效期:l 培养基有效期的长短应参考诊断细菌学书籍培养基有效期的长短应参考诊断细菌学书籍l若购买现用的培养基,均应注意有效期的标示是否正若购买现用的培养基,均应注意有效期的标示是否正确,如血平板的有效期为确,如血平板的有效期为3星期,厌氧菌分离培养基星期,厌氧菌分离培养基为为1-2星期等星期等 室内质量控制室内质量控制l对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求l操作手册操

14、作手册l仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测l培养基的质量控制培养基的质量控制 试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控l临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制l标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控染色液的质量控制染色液的质量控制l 染色液要标明配制或购入日期,必须选用适当染色液要标明配制或购入日期,必须选用适当的标准菌株作阳性及阴性对照,来鉴定染色液的标准菌株作阳性及阴性对照,来鉴定染色液的性能的性能l革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备浓菌悬液,经高压灭菌后

15、冰箱保存,作为革兰浓菌悬液,经高压灭菌后冰箱保存,作为革兰染色的质量控制,每次质控与标本同步进行染色的质量控制,每次质控与标本同步进行五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控各种染色液的监控菌株各种染色液的监控菌株染色液染色液 阳性对照菌阳性对照菌 阴性对照菌阴性对照菌 监控频监控频度度革兰染色液革兰染色液 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌大肠埃希菌 每天每天抗酸染色液抗酸染色液 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 每次每次 异染颗粒染色液异染颗粒染色液 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 每次每次荚膜染色液荚膜染色液 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌 每批每批鞭毛染色液鞭毛染色液 普通变形杆

16、菌普通变形杆菌 福氏志贺菌福氏志贺菌 每次每次五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控试剂的质量控制试剂的质量控制l各类试剂,在配制或购入后均应进行各类试剂,在配制或购入后均应进行“有效有效”试验,用已知阳性及阴性菌株进行试验试验,用已知阳性及阴性菌株进行试验l试剂须根据标示的配制要领或制造者的指示作试剂须根据标示的配制要领或制造者的指示作适当的储存适当的储存l对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每周予以检测核对,凡不稳定的试剂每天使用时周予以检测核对,凡不稳定的试剂每天使用时均应检测,合格后才能使用均应检测,合格后才能使用 五、试剂、染色液及抗血清的质控五、试剂、染色液及抗血清的质控表表3 常用试剂的阳性、阴性对照菌株常用试剂的阳性、阴性对照菌株常用试剂常用试剂 阳性对照菌株阳性对照菌株阴性对照菌株阴性对照菌株凝固酶试剂凝固酶试剂金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验用试剂触酶试验用试剂化脓链球菌化脓链球菌V-P试验用试剂试验用试剂阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌大肠埃希菌大肠埃希菌阴沟肠杆菌

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