4005-2021淡水浮游藻类监测技术规范 .docx

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1、ICS13.020CCSZO1.DB32江苏省地方标准DB32/T4005-2021淡水浮游藻类监测技术规范2021-04-04实施Technica1.specificationformonitoringp1.anktonica1.gaeinfreshwater2021-03-04发布江苏省市场监督管理局目次前三I1.I葩围I2规范性引用文件13术语和定义I4赛测原则25试剂和材料26仪器和设备27肮测步骤38质量保证和质量控制6附录A（资料性）显微镜标尺校准方法8附录B资料性硅廉样品前处理方法9附录C（资料性定量样品前处理方法IO附录D（资料性）定fit样品种类鉴定和计数H-IZ.-A-刖三

2、本文件按照GB,T1.1-2020标准化工作导则第I部分：标准化文件的的结构和起草规则3的规定起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的贲任.本文件由江苏省生态环境厅提出并归11.本文件起草单位：江芥省苏州环境监测中心、江苏省环境监测中心、江苏省常州环境监测中心。本文件主要起草人：李继影、徐恒省、张味、饭东烟、吕学研、牛志春、陈桥、蔡琨、沈伟、陈瑜、沈丽姐、景明、张翔.淡水浮游藻类监测技术规范1范国本文件设定了淡水浮游镁类的Sfe利原则、试剂和材料、仪器和设备、监利步骤、质Ift保证和防量控制要求。本文件适用于湖泊、水摩、河流等水体类型中淡水浮游藻类（粒径3m的

3、监测.2规楚性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.我中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件.HJ-T91地表水和污水监测技术规范S1.733内端水域浮游抗物监测技术规程DB32/T32O2湖泊水生态监5规范3术语和定义GBT20000.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件.3.1浮游藻类p1.anktonica1.gae水中营浮游生活方式的蕊类植物,易于在风和水流的作用下作被动运动，不包括细菌（蓝漠除外）和其他抗勃，淡水中常见浮游濠类主要包括监藻ganophyta）、绿i（.Ch

4、1.orophyta、硅藻7farirynfrt）,裸藻（E1.U幽JrMW）、甲源（PvrnjpZnttt）,金濠（QuyioPhyIa、黄藻（X（ouht）ptMa）和陶藻（Cryptophyta）等门类。3.2浮游藻类优势种dominantspeciesofp1.anktonica1.gae浮游藻类群落中在数口或生物盘方面占有优势地位的种类,对群落结构和群落环境的形成有明显控制作用的种类。3.3浮游藻类密度p1.anktonica1.gaedensity单位体积中某种类或全部浮游薄类的数量.本文件规定浮游藻类玄度以细胞数表示，单位为8球也。浮游藻类生物量p1.anktonica1.gae

5、biomass总位体积中某种类或全部浮游藻类的质1k本文件规定浮游藻类生物猿以湿电表示，单位为mg1.3.5藻类水华a1.ga1.b1.oom淡水水体中藻类大出繁殖的一种自然生态现望,表现特征为悬浮在水中或水色明显变化.4监测原则4.1 科学性原则监测断面(点位及监测结果应具有代表性，能的全面反映监测区域淡水浮游添类的整体状况.42可操作性原则淡水浮游能类监测需要综合考虑人力、资金和后勤保障等条件，充分利用现有资源，立足于环境监测业务化及环喳管理需求.4.3 持续性原则考电到生物群落演将长期性、双杂性等特点，建议监测断面(点位)、方法、时间和领次等一经确定,应保持延续性,对水生态环境状况持续跟

6、踪.4.4 保护性原则监测以保护和恢史为最终目标，因此在监测过程中应避免对野生生物造成伤害，避免超出客观需要的采样.4.5 安全性原则野外雅测相关人员应接受专业培训I，并做好安全防护措施5试剂和材料5.1本文件所用试剂均应为符合国家标准的分析纯试剂、然憎水或同等纯度的水，52鲁哥氏液：称取60g镇化钾溶于100m1.蒸馅水中，侍完全溶解后,加入40r镇.摇动至碘完全溶解，加然蛙水定容到100Om1.,制成普哥氏液，然后贮存于磨门棕色试剂瓶中。5.3 甲醛溶液：p(HCHO)=37%40%.5.4 盐酸溶液：(HC1.)=37%.5.5 砧酸溶液：p(HNO,)=1.42sm1.5.6 过氧化氢

7、溶液：中(HiOj)=30%.5.7 乙醉溶液：p(CHr,O)=75%.6仪器和设备6.1野外采样6.1.1采水器：21.f6.1.2水桶：51.或IO1.-61.32S号浮游生物网：200E1.崎绢孔径为0.064mm,61.4具刻度无色透明泥样瓶：I1.、21.、51.等。6.1.5 具刻度塑料螺11样品瓶：10Om1.6.1.6 富氏盘：020cm,配亚锦及带刻度的绳索.62样品前处理6.2.1灯吸管：。2mm3nun。622尖头玻璃管：与如吸管配食，尖头部位使用孔径0.064mm的加绢包亵封盖.6.2.3洗耳球.6.24玻璃试管：15m1.6.2.5离心管；15m1.,玻璃或费料。6

8、.2.6水浴锅.6.2.7黑心机：相对离心力可达到100oXg(轴速3000rpm-TOOOrpm)以上.6.2.8潴漏混匀涔.62.9超声波清洗仪。6.3实监室显微镜观测6. 3.1显微镜：配备10倍、20倍、40倍或60倍物镜、100倍物镜，IO倍或15倍目镜，7. 3.2目测微尺和台测微尺。8. 3.3浮游生物计数柢：0.1m1.,内框20mmx20mm横竖划分为IoXu)行.共100个计数小格,每个计数小格内框为2mm2mm.9. 3.4移液器：最大量程为1.)01.-2(K)1.,也可用刻度滴管代拼10. 3.5栽玻片：25.4mm76.2mm.厚0.8mm。11. 3.6盖玻片；2

9、2mm22mm.PJt0.17mm.12. 3.7镜子。13. 3.8计数器，64其他辅助设备6.4.1 防护设备：板生衣、水裤、防水服、防晒服、防寒服、高简胶鞋、橡胶手套、急板包等.6.4.2 现场记录设备：GPS.照相机、中性转、记号定、铅隹、标签、采样记录表等.64.3一般实验室和现场常用仪器和设需，7监测步臊71野外采样程序7.1.1 采样点位的确定7.1.1.1 根据水体的自然生态类型、人类干扰的空间特性和点位周边生态环境等确定采样点位.7.1.1.2监测断面的布设和采样点位的暗定应符合IUT91的规定.7.1.2监测时间的设定常规监测一般按季节或水期开展，在条件允许的情况下，建议集

10、月监测一次。专项性监测频次视具体情况确定,，发生濠类水华时段可适当加密雅测频次。监测时间的确定需考虑下列事项：a）若进行逐季或逐月篇测，各季或各月雅测的时间间隔应基本相同；b）同一湖泊（水库）的监测应力求水施、水文及生物采样时间上同步：c）考虑到浮游濠类的日变化，监测时间尽量选择在一天的同一时段，7.1. 3采样断面（点位）环境观测采集样本前,应先对现场环境情况进行观察.记录和拍照：尽可能全面检测和记录水深、透明度、PH伯、水品、溶解乳等常规埋化指标及水文信息：也可以同步采集水样进行水化学指标的实验室分析.7.1.4样品的采集7.1.4.1 定量样品采集果维浮游藻类样品时,需根据采样点位的水深

11、设置采样层次.水深5m或混合均匀的水体，不分层,在水面下0.5m处采集：水深为5m-1.0m时,分别在水而下05m处和透光层（深度以3倍透明度计）底部采集：水深10m时,分别在水面下0.5m处、“2透光层和透光层底部采集，分层呆样按照出浅到深的顶序，使用来水器采集I1.51.水样，将各层次采集的样品倒入疗先准备的清沽水桶，充分混匀后，取I1.51.水样装入样品瓶.7.1.42定性样品采柒7.1 42.1浮游技类定性样品的聚集应在定量样品聚条结束后进行。7.1.4 2.2用25号浮游牛.初网在选定采样点的水面F0.5m处作“8”形循环缓慢拖动，拖动时间1min-3min.水样采集完毕后.将脚从水

12、中提出,待水池去.轻轻打开浮游生物网底管的活栓,使水样流入样品瓶中.7.1.5 样品的固定7.1. 5.1定吊和定性样品现场加入水样终体积1%1.5%的伊哥氏液迸行固定。7.1.5. 2藻类水华样品可根据情况的情墙加固定剂用量。7.1.6样品的保存7.1.6. 1采集的样品应尽快固定，未固定的样丛即活体定性样品，在4CQC条件下避光保存，保持样品瓶中的样从上方留有一半以上的空间，并应在3h内镜检.7.1.7. 2停哥氏液固定的样M在C5C条件下避光保存不如超过I2个J1.,常温保存不得超过3个月.长期保存时,加入甲心溶液,用fit为水样终体积的2%.保存时,每隔23周检查固定剂（定量样品可以观

13、察鲁哥氏液颜色是否变淡），必要时进行添加，食至完成种类签定.在样品瓶外侧标注样品端号、采样H期、水体名称、采样点位、采样人姓名以及样品类型.现场记录去格可参照S1.733的附录A，72实辑室分析程序7.2.1显微镜的标尺校准校准方法参见附录A.7.22定性分析7.2.2.1前处理7.2.2.1.1定性样品一般不做沉淀、浓缩，如溶液过多，可适当弃去部分上清液，再进行种类检定.7.2.2.1.2如果样品中娃藻过多，显微镜下难以鉴别硅麋种类,需要对徒藤内含物进行去除.前处理方法参见附录B.7222种类鉴定用移液静或刻度滴管吸取601.左右样品瓶底部的定性样品流到载破片上,用帽子旗上盅破片.制成标本片

14、，在显微镜卜,，尽量鉴定到种，形态学可以区分的分开列出，常见种给出种名。每个样品应观察不少于23个标本片。建议有条件的实验室时于些不能确认的优势种或常见种，开展分子生物学赛定.7. 2.2.3记录在浮游燕类分析记录表填写样品相关信实验室分析麦格可参照S1.733的附录B电要的或优势种类应拍照记录。723定量分析8. 2.3.1前处理般前处理方法参见附录C,当发生藤类水华时，可考虑原样或者惊样稀择后计数,在藻类应急监测或要求快速报送数据的情况下,可采用原样固定离心后计数（准倚配取100m1.-200m1.混匀后的水样于离心管中,以相对离心力I（XK）Xg（转速300OrPm4000pm）离心Io

15、min1.5min.吸去部分上清液，定容至5m1.TOm1.,液混混匀洗卜粘附在管壁上的覆类细胞，超声分散处理IominISmin,此悬浊液用于下一步镜检）.7.232种类鉴定和计数将样品充分摇匀（手工或旋涡混匀襁混匀）,用移液器吸取0.1m1.样品到计数框中.移入之前用圾子将前玻片斜盖在计数框上，在计数框的一边进样，另一边保持出气，避免气泡产生。注酒后把靛破片移止。种类鉴定要求同722.2,接种计数.淤类数砧较多时可使用计数港，有条件的实胎室可结合软件分析技术对藻类的种类进行识别和计数，计数方法多见附录D,7.2.3.3藻类密度计算浮游蕊类的细胞数M按公式1）计算，N=-2r.n（1）.V.式中：N短升水中浮混株类的细胞数埴，单位为母升细胞数埴（x1.1.）；A计数框面积，单位为平方蜃米（mmD；从一计数面积（即视野面积X视野数或计数格的面枳X计数格数，单位为平方克米（mmj）:V,I1.水样浓