乳腺癌her2检测.ppt

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1、乳腺癌乳腺癌HER2HER2的标准化的标准化检测检测HER2HER2，又名，又名HER2/neuHER2/neu，c-erbB-2c-erbB-2，表皮生长，表皮生长因子受体（因子受体（EGFREGFR）家族成员；）家族成员；原癌基因，位于原癌基因，位于17q2117q21，编码相对分子量，编码相对分子量185KD185KD的跨膜糖蛋白（跨膜酪氨酸激酶受体，的跨膜糖蛋白（跨膜酪氨酸激酶受体，表皮生长因子样分子），在细胞表面表达；表皮生长因子样分子），在细胞表面表达；通过参与信号传道通路的一系列活动影响细通过参与信号传道通路的一系列活动影响细胞的增殖与分化。胞的增殖与分化。HER2基因基因信号传

2、导信号传导至细胞核至细胞核细胞核细胞核接合部接合部酪氨酸激酶酪氨酸激酶活性部分活性部分细胞浆细胞浆细胞膜细胞膜生长因子（配体）生长因子（配体）癌基因活化癌基因活化细胞分裂细胞分裂HER2 HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途径受体跨膜二聚体的信号传导途径1 = 1 = 基因拷贝数基因拷贝数2 = 2 = mRNA 转录转录3 = 3 = 细胞表面受体蛋白表达细胞表面受体蛋白表达4 = 4 = 细胞外受体功能域释放细胞外受体功能域释放A = HER2 DNAB = HER2 mRNAC = HER2 receptor protein正常正常扩增扩增/ /过度表达过度表达细胞核细胞核细胞质细胞质细

3、胞膜细胞膜1234CBAHER2HER2过度表达：正常状态的过度表达：正常状态的10-10010-100倍倍 HER2HER2癌基因的致瘤机制：癌基因的致瘤机制： 抑制凋亡，促进增殖；增加肿瘤细胞的侵袭抑制凋亡，促进增殖；增加肿瘤细胞的侵袭 力；促进肿瘤血管新生和淋巴管新生。力；促进肿瘤血管新生和淋巴管新生。研究表明：研究表明： 3030以上的人类肿瘤中存在以上的人类肿瘤中存在HER2HER2基因的扩增基因的扩增/ / 过度表达（如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜过度表达（如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜 癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等; ; 20203030的原发性浸润性乳腺

4、癌有的原发性浸润性乳腺癌有HER2HER2基基因的扩增因的扩增/ /过度表达过度表达。HER2HER2阳性阳性患者患者的生存期比阴性者缩短一半以上的生存期比阴性者缩短一半以上转移性乳腺癌患者的中位生存期转移性乳腺癌患者的中位生存期HER2 HER2 阳性阳性8-108-10个月个月HER2 HER2 阴性阴性17-2217-22个月个月Slamon DJ et al. Science 1987;235:1778220042004年发现淋巴结阴性患者预后与年发现淋巴结阴性患者预后与HER2HER2状态密切相关状态密切相关p=0.0001Cumulative disease recurrence

5、curvesSun JM. Cancer 2004;101:2516220.30.20.10020406080100月月HER2阳性患者平均风险曲线阳性患者平均风险曲线HER2 阴性患者平均风险曲线阴性患者平均风险曲线基础风险曲线基础风险曲线HER2 HER2 表达在原发肿瘤和转移灶呈高度一致表达在原发肿瘤和转移灶呈高度一致*Mainly distant metastases. *Liver and lung metastases. Lymph node metastases were analysed in all cases, except in the studies by Vincen

6、t-Salomon et al (2002) and Gancberg et al (2002), where distant metastases were analysed.StudyMasood & Bui (2000)Shimizu et al (2000)Simon et al (2001)Tanner et al (2001)Gancberg et al (2002)Vincent-Salomon et al (2002)Tsutsui et al (2002)Carlsson et al (2004)Primary tumours32%38%25%28%29%25%25%55%M

7、etastases32%38%22%28%27%*20%*25%55%Percentage IHC overexpression 2005年年St. Gallen国际治疗指南国际治疗指南乳腺癌危险度分级乳腺癌危险度分级低度低度中度中度高度高度淋巴结淋巴结1+(13)2+(13)1+( 3)2pTpT（cmcm）2伴伴21病理分级病理分级1或或 2 31瘤周脉管瘤周脉管或或 +1HER2HER2或或 +1 2+1年龄年龄35或或3512005 St Gallen 指南指南 乳腺癌初诊时需明确乳腺癌初诊时需明确HER2HER2 HER2HER2阳性阳性即做为高风险因子加以考虑即做为高风险因子加以考

8、虑Goldhirsch et al 2005CMF, cyclophosphamide, methotrexate, 5-fluorouracil预后评估预后评估预后差预后差疗效预测疗效预测从赫赛汀从赫赛汀的治疗中最大获益的治疗中最大获益芳香化酶抑制剂的疗效优于三苯氧胺芳香化酶抑制剂的疗效优于三苯氧胺蒽环类和紫杉类的疗效优于蒽环类和紫杉类的疗效优于CMFCMF 随着肿瘤的靶向性治疗的发展，以单抗随着肿瘤的靶向性治疗的发展，以单抗为主的分子靶点药物的不断研制应用，为主的分子靶点药物的不断研制应用，已成为肿瘤靶向治疗的新武器已成为肿瘤靶向治疗的新武器 HerceptinHerceptin即为一种针

9、对即为一种针对HER2HER2受体的高纯受体的高纯度重组度重组DNADNA衍生物的人源化单克隆抗体，衍生物的人源化单克隆抗体，是乳腺癌治疗领域的第一个分子靶向性是乳腺癌治疗领域的第一个分子靶向性药物药物刺激刺激刺激刺激HER2細胞細胞増殖増殖刺激刺激 刺激刺激HER2癌癌细细胞胞増殖抑制増殖抑制Heceptin的作用的作用HeceptinHeceptin：一种针对一种针对Her-2/neu受体的高纯度重组受体的高纯度重组DNA衍生物的人源化衍生物的人源化单克隆抗体，是乳腺癌治疗领域的第一单克隆抗体，是乳腺癌治疗领域的第一个分子靶向性药物，具有高效、低毒、个分子靶向性药物，具有高效、低毒、选择性

10、强的特点选择性强的特点 癌癌细细胞表面存在着胞表面存在着CerbB-2蛋白，蛋白， 受刺激后促受刺激后促进进癌癌细细胞的增殖胞的增殖 2030的癌细胞的癌细胞Her-2/neu基因的蛋白基因的蛋白CerbB-2 与与CerbB-2结结合阻断和抑制合阻断和抑制细细胞的增殖胞的增殖 转转移性乳腺癌病人的治移性乳腺癌病人的治疗疗效果效果 检测检测癌癌细细胞表面胞表面cerbB-2存在程度决定使用存在程度决定使用意义意义 靶向药物靶向药物HeceptinHeceptin仅对仅对HER2HER2扩增的乳腺癌有效扩增的乳腺癌有效 准确的检测准确的检测HER2HER2有无扩增是临床应用有无扩增是临床应用He

11、ceptinHeceptin的绝的绝 对对必要条件必要条件，也是成功进行靶向治疗的，也是成功进行靶向治疗的前题和关键前题和关键 HER-2 HER-2扩增的乳腺癌往往提示其扩增的乳腺癌往往提示其恶性程度高，恶性程度高，进展迅进展迅 速，化疗缓解期短，对速，化疗缓解期短，对CMFCMF方案化疗反应降低方案化疗反应降低 乳乳 腺癌化疗药物腺癌化疗药物环磷酰胺、阿酶素、环磷酰胺、阿酶素、5 5氟尿嘧啶等氟尿嘧啶等 的主要参考指标的主要参考指标 HER-2HER-2扩增的乳腺癌对蒽环类药物和紫杉醇类药物化扩增的乳腺癌对蒽环类药物和紫杉醇类药物化 疗敏感性高疗敏感性高 HER2HER2和拓扑异构酶和拓扑

12、异构酶II-aII-a基因同时扩基因同时扩 增的乳腺癌患者，可以从蒽环类药物为基础的方案增的乳腺癌患者，可以从蒽环类药物为基础的方案 中受益，故同时检测中受益，故同时检测HER2HER2和拓扑异构酶和拓扑异构酶II-aII-a可以筛可以筛 选出以蒽环类化疗药为基础的化疗方案候选患者选出以蒽环类化疗药为基础的化疗方案候选患者 HER-2 HER-2扩增的乳腺癌对三苯氧胺易产生耐药性扩增的乳腺癌对三苯氧胺易产生耐药性 制制 定内分泌治疗方案的有力依据定内分泌治疗方案的有力依据 HER-2HER-2扩增的乳腺癌无病生存率和总生存率低，并且扩增的乳腺癌无病生存率和总生存率低，并且 与淋巴结阳性、癌的高

13、级别、阴性受体状态及高增与淋巴结阳性、癌的高级别、阴性受体状态及高增 殖活性有关殖活性有关 预后判断的参考指标预后判断的参考指标意义意义ST. GALLEN 2007 HER2HER2：乳腺癌危险因素的新定义乳腺癌危险因素的新定义低低中中高高G1G1T2T2ER/PR +ER/PR +年龄年龄352G2-3 T2淋巴结淋巴结 1-3 1-3 和和 HER2 +, HER2 +, ER/PR -ER/PR -或或淋巴结淋巴结 4 4淋巴结淋巴结-, -, HER2 +, HER2 +, ER/PR -ER/PR -或或 LVI LVI 侵润侵润 淋巴结淋巴结1-31-3且且 HER2 -,HER

14、2 -, ER/PR +ER/PR +淋巴结淋巴结- -HER2 -HER2 - LVILVI无无RISKRISK2007 NCCN 治疗指南治疗指南HER2检测的原则检测的原则ASCO/CAP: HER2检测指南检测指南 HER2阳性阳性： IHC HER2 3+ (完整的，强的膜阳完整的，强的膜阳性性) 或或 FISH HER2 基因扩增基因扩增 (HER2/ CEP17 或或 HER2 基因拷贝数基因拷贝数 信号信号/核，核，无内对照的探针无内对照的探针) HER2阴性：阴性： IHC HER2 0-1+ 或或 FISH HER2 基基因扩增因扩增 (HER2/ CEP17 1.8 或或

15、 HER2基因拷贝基因拷贝数数 信号信号/核，无内对照的探针核，无内对照的探针IHC HER2 2+ 或或 FISH HER2 基因扩基因扩增增 (HER2/ CEP17 1.8-2.2 或或 HER2基因拷贝数基因拷贝数 信号信号/核，无内对照的探针核，无内对照的探针HER2HER2测定流程图测定流程图HER2的检测方法的检测方法 免疫组织化学（免疫组织化学（IHCIHC）：）：HER2HER2蛋白的表达蛋白的表达 荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISHFISH）：）：HER2HER2基因的扩增基因的扩增 显色原位杂交（显色原位杂交（CISHCISH）：）：HER2HER2基因的扩增基因的扩增

16、 酶联免疫分析（酶联免疫分析（EIAEIA） 酶联免疫吸附分析（酶联免疫吸附分析（ELISAELISA） 聚合酶链反应（聚合酶链反应（PCRPCR）HER2阳性定义阳性定义IHC 3+IHC 3+CISH +CISH +FISH +FISH +或或或或蛋白过度表达蛋白过度表达基因扩增基因扩增=一抗结合于一抗结合于Her-2Her-2受体受体二抗结合并激活底物反应显色二抗结合并激活底物反应显色免疫组织化学法原理免疫组织化学法原理Immunohistochemistry (IHC)IHC 检测检测HER2HER2表达初筛最常使用的方法。表达初筛最常使用的方法。 判断判断HER2HER2蛋白过表达蛋白过表达最重要的是染色方法最重要的是染色方法的标准化和结果的判断。的标准化和结果的判断。 建议使用美国食品和药品管理局建议使用美国食品和药品管理局(FDA)(FDA)批准批准的试剂盒。的试剂盒。 应使用应使用EnVisionEnVision法和高质量的法和高质量的DABDAB显色液以显色液以避免内源性生物素的影响。避免内源性生物素的影响。 应有严格的、包括内部和外部的应有严格的、包括内部和外部的质