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1、临床医学检验临床免疫技术:酶免疫技术必看题库知识点1、单选制备酶标记物的交联剂的反应基团至少应有OA5个B.4个C.3个D.2个E.1个正确答案:D2、单选E1.lSA双抗体夹心法()A.将(江南博哥)酶标记特异抗体用于检测抗原B.先将待测抗原包被于固相载体C.标记一种抗体可检测多种抗原D.能用于半抗原的测定E.将酶标记抗抗体用于抗原检测正确答案:A3、单选、为消除非特异性显色导致的本底偏高,酶免疫技术中将抗原抗体包被后需再进行封闭的是OA. 15%25%牛血清白蛋白B. 10%15%牛血清白蛋白C. 10%牛血清白蛋白D. 1%10%牛血清白蛋白E. 1%5%牛血清白蛋白正确答案:E4、单选
2、下述哪一种酶联免疫吸附实验方法最常用于抗原测定OA.间接法E1.ISAB.反向间接法E1.ISAC.竞争法E1.ISAD.双抗体夹心法E1.ISAE.捕获法正确答案:D5、单选以下哪一种复合物的形成属于间接法E1.lSA免疫反应结果O.固相抗原-抗体-酶标二抗B.固相抗体-抗原-酶标抗体C.固相二抗TgM抗原-酶标抗体D.固相抗体-酶标抗原E.固相抗体-抗原-抗体-酶标抗体正确答案:A参考解析:间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。6、单选酶免疫技术中的酶结合物指的是()A.酶标记抗体B.酶标记抗原C.酶标记抗
3、原或抗体D,结合在固相载体上的酶E.酶与底物的结合正确答案:c7、单选、酶联免疫吸附试验(E1.lSA)中应用最多的底物是OA,邻苯二胺(OPD.B.四甲基联苯胺(TMB.C.ABTSD.对硝基苯磷酸酯(p-NPP)E.以上都不是正确答案:B参考解析:邻苯二胺灵敏度高,比色方便,是E1.lSA中应用最早的底物,但稳定性差,反应过程需要避光,还具有致癌性;四甲基联苯胺稳定性好,反应无需避光,没有致突变作用,是目前应用最广泛的底物,但是水溶性差。8、单选患者,男,36岁。HBSAg阳性5年,A1.T反复增高2年,经治疗可恢复。近2个月来乏力、食欲减退。体检:巩膜无黄染,未见肝掌及蜘蛛痣。肝于肋缘下
4、1cm,脾侧位可及。实验室检查:A1.T420U1.,HBsAg(+)o诊断:慢性乙型肝炎。患者接受干扰素治疗。选择以下观察疗效的最佳指标()A.HBeAg(一)B.HBeAg(一)C.HBeAg(+)D.HBsAg(+)E.HBsAg(+)正确答案:B、HBV-DNA(+)、HBV-DNA(一)、HBV-DNA(一)、抗-HBe(+)、抗TBc(+)参考解析:乙型肝炎病程超过半年,体征及肝功能异常符合慢性乙型肝炎诊断。HBeAg及HBV-DNA转阴或明显减少为治疗有效。9、单选选择E1.ISA的标记用酶,下面哪一项特性是不需要的OA.具有可与抗原、抗体结合的基团B.标记抗原后,酶活性保持稳定
5、C.当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制D.酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好E.酶的稳定性、可溶性好正确答案:C参考解析:选择E1.lSA的标记用酶,保证标记抗原后,酶活性保持稳定。10、单选在E1.ISA中,不是E1.lSA的反应过程,但却是决定试验成败的关键的是OA.温育B.洗涤C.加样D.结果判断E.做阴阳性对照正确答案:B11、单选与双抗体夹心法相比,E1.lSA间接法的主要优点是OA.有较大的放大作用B.减少了操作步骤C.减少了冲洗次数D.可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体E.缩短反应时间正确答案:D12、单选钩状效应是指用E1.lSA一步法测定标本中待测
6、抗原时,抗原浓度过O,实测值偏()的现象,极易造成假阴性()变高高低低花,夕,低高高低高A.B.C.D.E.正确答案:C参考解析:在E1.lSA一步法测定中,应注意钩状效应,类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。考点:酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理13、单选E1.ISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于OA.保温时间短B.加样不准C.洗涤不彻底D.比色误差E.包被不好正确答案:C参考解析:暂无解析14、单选下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技
7、术()A.化学发光免疫测定B.免疫电泳法C.放射免疫法D.荧光免疫法E.酶免疫法正确答案:B参考解析:药物多数分子量很小,为半抗原。免疫电泳的方法不够灵敏,不适于测定半抗原。15、单选用E1.lSA双抗体夹心法检测抗原A时,固相载体的包被物是OA.酶标记A抗体B.未标记的抗A抗体C.未标记抗原AD.酶标抗球蛋白抗体E.酶标记抗原A正确答案:B参考解析:E1.ISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。16、单选均相酶免疫测定的优点不包括()A.多用于小分子激素和半抗原的测定B.勿需分离游离的酶标抗原C,易于自动化分析D.不易受样品中非特异的内源酶的干扰E.灵敏度可达10-
8、9mol/1.正确答案:D17、单选E1.lSA板包被后,最常用的封闭物质是OA.人白蛋白B.人球蛋白C.牛血清白蛋白D.牛血清球蛋白E.鼠白蛋白正确答案:c参考解析:将抗原或抗体固相化的过程称为包被。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯E1.ISA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于E1.lSA板孔中在4过夜,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下,如在包被后再用1%5%牛血清白
9、蛋白包被一次,可以消除这种干扰。这一过程称为封闭。包被好的E1.lSA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。考点:免疫吸附剂18、单选患者HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗一Hbe(一)、抗一HBCIgM(+)、抗一HBS(一),正确的判断是OA.急性乙型肝炎B.慢性乙型肝炎C.慢性迁延性肝炎D.乙肝恢复期E.慢性活动性肝炎正确答案:A19、单选E1.lSA试验以HRP为标记酶时,常用的供氢底物为OA. OPDB. OTC. YMBD. ABTSE. PNP正确答案:A参考解析:许多化合物可作为HRP的供氧体,在E1.ISA中常用的供氢体底物为邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(FMB)
10、和ABTS。OPD为在E1.lSA中应用最多的底物,灵敏度高,比色方便。考点:酶和酶作用的底物20、单选关于E1.lSA的固相载体论述有误的是()A.最常用的是聚苯乙烯微量反应板B.每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能C.聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低D.阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用载体E.微孔滤膜也可作固相载体正确答案:C21、单选下列不属于E1.lSA测定方法中所必需的试剂().固相的抗原或抗体B.酶标记的抗原或抗体C.酶作用的底物D.戊二醛交联剂E.稀释的血清正确答案:D参考解析:E1.lSA是在固相载体上包被抗原或抗体后,通过抗原抗体反应使酶标抗体(或酶标抗原)结
11、合到载体上,经洗涤使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离,洗去游离的酶标抗体(或酶标抗原)。在这种测定方法中有3种必要的试剂:固相的抗原或抗体。酶标记的抗原或抗体。酶作用的底物。间接法和捕获法还使用稀释的血清标本做试剂。戊二醛是一种双功能团试剂,可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而耦联。与E1.ISA的方法相反。考点:酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理;酶标记抗体或抗原22、单选E1.lSA间接法通常用来检测OA.抗体B.抗原C.免疫复合物D.抗抗体E.半抗原正确答案:A23、单选酶增强免疫测定技术(EMIT)是一种OA.非均相酶免疫测定技术B.均相酶免疫测定技术C.酶免疫组织化学技术D.酶
12、免疫测定与电泳相结合的技术E.电泳技术正确答案:B参考解析:酶增强免疫测定技术(EMIT)是均相酶免疫测定技术。EMlT的基本原理:半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性,当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受到影响而活性被抑制,反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例,从酶活力的测定结果可推算出标本中半抗原的量。考点:均相酶免疫测定24、单选间接免疫荧光和E1.lSA检测用已知抗原检测未知抗体,有关抗体正确的是()A.第1抗体为羊抗人免疫球蛋白B.第2抗体为人免疫球蛋白C.第1抗体为兔抗人免疫球蛋白D.第1抗体为人免疫球蛋白,第2抗体为羊抗人免疫球
13、蛋白E.第1抗体为人免疫球蛋白,第2抗体为荧光或酶标记的羊/兔抗人免疫球蛋白正确答案:E25、单区斑点免疫层析试验最常用的栽体材料是O.乙酸纤维素膜B.尼龙膜C.滤纸D.硝酸纤维素膜E.玻璃纤维膜正确答案:D参考解析:斑点免疫层析试验以硝酸纤维素为载体,利用微孔滤膜的毛细管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,犹如层析一般。考点:斑点免疫渗滤试验26、单选E1.lSA试验中将HRP酶结合到抗原或抗体的方法是OA.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.戊二醛交联E.共价结合正确答案:D27、单选酶免疫技术中选定最佳工作浓度常采用OA.抗体稀释法B.抗原稀释法C.酶标记物稀释法D.棋盘滴定
14、法E.A+B正确答案:D28、单选如果标本中存在NaN可能会导致OA.假阴性B.假阳性C.灵敏度增加D.特异性增加E.临界值下降正确答案:A29、单选关于斑点-E1.ISA说法哪一项不正确()A.以吸附蛋白能力很强的硝酸纤维膜为载体B.底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色C.斑点-E1.ISA灵敏度高,测得效价常高于常规E1.ISAD.操作简便E.斑点-E1.ISA可同时获得对多种疾病的诊断结果正确答案:C参考解析:斑点-E1.ISA的原理与常规E1.ISA相同,不同之处在于斑点-E1.ISA采用的固相载体为对蛋白质具有很强吸附力的硝酸纤维素膜,故检测灵敏度高,是普通E1.lSA的68倍。
15、如果膜上同定多种抗原,可同时检测多种抗体。30、单选最常用于IgM测定的E1.lSA方法是OA.双抗体夹心法B.间接法C.竞争法D.捕获法E.dot-E1.ISA法正确答案:D31、单选酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用OA.抗原稀释法B.抗体稀释法C.酶标记物稀释法D.棋盘滴定法E.A+B正确答案:D参考解析:最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、抗原作一系列的稀释,即棋盘滴定。32、单选检测HBV血清学标志物最常用的方法为().免疫荧光法B.E1.ISAC.中和试验D.免疫印迹试验E.放射免疫法正确答案:B参考解加:目前在国内的临床实验室中最常用的是酶联免疫吸附试验(E1.ISA)oE1.lSA灵敏度高、特异性强