土壤硝态氮的测定.docx

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1、土壤硝态氮的测定(紫外分光光度法)(一)方法提要土壤浸出液中的N03,在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度,而浸出液中的其他物质,除OH、Co32、HCo3、NO2-和有机质等外,吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化,RP可消除OH、Co32-卜、HCO3的干扰,NO2一般含量极少,也很容易消除。因此,紫外分光光度法直接测定N03的含量。待测液酸化后,分别在21Onm和275mm处测定吸光度。AzlO是和以有机质为主的杂质的吸光度;A?7s只是有机质的吸光度,因为N03在275nm处已无吸收。但有机质在275nm处的吸光度比在21Onm处的吸光度要小R倍,故将A27s校正为有机质在21

2、Onm处应有的吸光度后,从AzlO中减去,即得NO3在21Onm处的吸光度(A)o(二)适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。(三)主要仪器设备1、紫外可见分光光度计。2、石英比色皿。3、往复式或旋转式振荡机,满足180r.min20r.min的振荡频率或达到相同效果。4、塑料瓶:200mLc(四)试剂1、H2SO4溶液(1:9):取IOml浓硫酸缓缓加入90mL水中。2、氯化钙浸提剂c(CaCLGHzO)=O.OlmolL1:称取2.2g氯化钙(CaCL26H2O)溶于水中,稀释至1L。3、硝态氮标准贮备液p(N)=100ugmL-:称取O.7217g经105110C烘2h的硝酸钾(

3、KNo3,优级纯)溶于水,定容至1L,存放于冰箱中。4、硝态氮标准溶液p(N)=10ugmLJ:测定当天吸取10.OomL硝态氮标准贮备液于K)OmL容量瓶中,用水定容。(五)操作步骤称取10.OOg土壤样品放入20OmL塑料瓶中,加入50.Oml氯化钙浸提剂,盖严瓶盖,摇匀,在振荡机上于2025C振荡30min(振荡频率:180rmin20rmin),干过滤。吸取25.OOmL待测液于50mL三角瓶中,力口1.0mW9H2S(溶液酸化,摇匀。用滴管将此液装入Iml光径的石英比色皿中,分别在21Onm和275nm处测读吸光值(A210和A275),以酸化的浸提剂调节仪器零点。以NO3的吸光值(

4、AA)通过校准曲线求得测定液中硝态氮的质量浓度。空白测定除不加试样外,其余均同样品测定。NO3的吸光值(ZXA)可由下式求得:A=A2Io-A27SXR式中:R为校正因数,是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在21Onm和275nm处的吸光度的比值。其确定方法为:A210是波长21Onm处浸出液中NO3的吸收值(A?no硝)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和,即A2Io=A210硝+AzlO杂,得出AzlO杂=AZIO-AzIO硝。选取部分土样用酚二磺酸法测得NO?-N的含量后,根据土液比和紫外法的工作曲线,即可it算各浸出液应有的AzlO硝值,即可得出AzlO杂。A275是浸出

5、液中杂质(主要是有机质)在275mm处的吸收值(因为NO3在该波长处己无吸收),它比A210杂小R倍,即A210杂=RA275,得出校正因数R=A210杂/A275.各不同区域可根据多个土壤测定R值的统计平均值,作为其他土壤测试N03-N的校正因数,其可靠性依从于被测土壤的多少,测定的土壤越多,可靠性越大。校准曲线的绘制:分别吸取IOUgmL-NO3-N标准溶液0、L0,2.0,4.0,6.0,8.0mL,用氯化钙浸提剂定容至50mL,即为0、0.2,0.4,0.8,1.2,l.6ugmL-1的标准系列溶液。各取25.OmL于50ml三角瓶中,分别加ImLI:9&SO4溶液摇匀,用系列溶液的零

6、浓度调节仪器零点测AzlO计算AzlO对NOs-N浓度的回归方程,或者绘制校准曲线。(六)结果计算土壤硝态氮(N),MgkgT=PX平XloOo10,式中:p一一查校准曲线,或求回归方程而得测定液中NO?+的质量浓度,(ugmL-l)V浸提剂体积(mL)(50mL);D浸出液稀释倍数,若不稀释则D=I;103和100O分别将Ug换算成mg和将g换算为kg;m试样质量,g。(七)精密度平行测定结果允许相对相差10%(八)注释土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定,如需以硝态氮加镂态氮反映无机氮含量,则可用过2mm筛的风干样品测定,但需标明为风干基。一般土壤中NO2含量很低,不会干扰NO?的测定。如果N

7、O?含量高时,可用氨基磺酸消除(HNo2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O),它在21Onm处无吸收,不干扰No3测定。浸出液的盐浓度较高,操作时最好用滴管吸取注入比色皿中,尽量避免溶液溢出比色皿外污染比色皿的外壁,影响其透光性。大批样品测定时,可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶液)的A210值,再测A275值,以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。如需同时测定土壤N(+-N,可选用2mol-IJKCl或ImolL-INaCl溶液制备待测液。但2molUKCI溶液本身在21Onm处吸光度较高,因此同时测定土壤NO4+-N和NO3-N时,可选用吸光度较小的ImoIL-1NaCl溶液为浸提剂。如果吸光度很高(Al时),可从比色皿中吸出一半待测液,再加一半水稀释,重新测读吸光度,如此稀释直至吸光度小于0.8。再按稀释倍数,用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定。根据北京和河北石灰性15个土壤样品的测试结果,校正因素(R)的平均值为3.6,不同土类的R值略有差异,各地可根据主要土壤情况进行校验,求出当地土壤的R值。

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