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1、2024红细胞渗透脆性试验及临床意义原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyteosmoticfragilitytest)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。在低渗盐溶液中,由于水分渗入细胞内,红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中,观察发生溶血的情况,可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度,红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时,红细胞容易破碎,发生溶血,称为红细胞渗透脆性增加;反之,称为红细胞渗透脆性B制氐。检测方法1 .试剂与器材1.1 器材:
2、分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。1.2 试齐IJ:1%NaCI溶液:用分析天平称取分析纯NaCI1.OOOg,加少量蒸储水溶解,于IOoml容量瓶中用蒸储水定容,置于玻璃瓶中灭菌后使用。2 .操作2.1 取12支无菌小试管编号,按表配制不同浓度的NaCI溶液。图片2.2 用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml,向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血,轻轻摇,室温静置2小时后观察结果。3 .结果判断从1号管开始观察溶血情况。不溶血:上清液透明无红色;开始溶血:上清液刚呈浅红色,管底有较多未溶的红细胞;完全溶血:溶液呈透明红色,管底无红细胞。参考区间开始溶血NaCI浓度:384.6
3、gL;完全溶血NaCl浓度:2.83.2gL注意事项1 .NaCI必须干燥,可将分析纯氯化钠于100。C下烘干,置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。2 .所用器具应干燥清洁,避免出现人为溶血。向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中,不可沿管壁注入,混匀时动作须轻柔。3 .观察溶血情况时以白色背景为宜。4 .结果不易判断时,可低速短时离心后观察5 .每次试验应以相同实验条件做正常对照。被检者与正常对照开始溶血管的NaCI浓度相差0.4gL即有诊断价值。6 .黄疸标本结果不易观察,重度贫血患者红细胞过少,可离心弃血浆后用生理盐水洗涤,并配成50%的红细胞悬液进行试验。7 .避免使用EDTA盐、
4、枸椽酸盐和草酸盐抗凝,以免增加离子浓度,改变渗透压,也可选用洗涤红细胞进行检测。8 .红细胞膜异常改变较轻微的病例,应采用更敏感的试验,如红细胞孵育渗透脆性试验。将红细胞先置于37。C孵育24小时,使红细胞葡萄糖消耗,ATP储备减少,红细胞膜对阳离子的主动转运受阻,阳离子在细胞内蓄积,细胞膨胀,脆性增加后,再进行相应的渗透脆性试验(以50%溶血率的盐水浓度表示)。临床意义1 .本试验简便实用,但敏感性较差,对溶血性贫血的病因诊断有参考价值,但需结合其他检验结果进行综合分析。2 .增高主要见于遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞增多症、部分自身免疫性溶血性贫血、遗传性口型红细胞增多症及2型糖尿病等。3 .减低主要见于珠蛋白生成障碍性贫血,血红蛋白UD、E病,低色素性贫血,以及阻塞性黄疸、脾切除术后、肝炎、肝硬化、肝癌等。某些中药(如当归)、磁场、紫外线亦可降低红细胞渗透脆性。4 .此法也可用于丙酮酸激酶缺陷症等红细胞酶缺陷性溶血的诊断。参考文献:1尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程(第4版)M.北京:人民卫生出版社,2019.1彭明婷.临床血液与体液检验(第1版)M北京:人民卫生出版社,2017.2夏薇,陈婷梅.临床血液学检验技术M.北京人民卫生出版社,2015