Ames试验在泸州市饮水致突变性检测中的应用.docx

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1、Ames试验在泸州市饮水致突变性检测中的应用张青碧,陈志群,甘仲霖,衡正昌;汤艳(泸州医学院公共卫生系，四川泸州646(XM);I四川大学华西公共卫生学院)摘要目的:为了检测泸州市饮水氯化消毒副产物的致突变性。方法;采用AmeS试验分别对泸州市南郊水厂的水源水、出厂水、末梢管网水的有机浓集物的致突变性进行检测。结果:水源水的有机浓集物的AmeS试验呈阴性,出厂水和末梢管网水的有机浓集物的AmCS试验呈阳性反应。结论:通过饮水氯化消毒虽然减少了水中致病微生物的作用,但是增加了氯化消毒副产物的致突变性。关键词Ames试验；饮用水:氯化消毒副产物;突变性中图分类号R123文献标识码A文章编号IoOo

2、-2669(2003)6-0495-03随着国家工农业的迅速发展,人们生活饮用水正受到日益严重的污染，以地面水为水源的源水和经氯化消毒的自来水中普遍存在致突变性有机污染物uF,泸州市区地处长江、沱江的交界处，受到上游城市工农业废水的污染,泸州市区人民主要以长江水为生活饮用水水源,但对该地区的生活饮用水的致突变性的研究未见报道，因此本文采用传统的Ames实验对该地区水的氯化消毒副产物的致突变性进行研究。1材料与方法1.1 水样浓集于2002年12月枯水期采集泸州市水源水、出厂水、末梢管网水(自来水)各200L进行过滤。采用固相萃取法M,以XAD-2型树脂作为吸附树脂进行水样浓集。使用前用重蒸甲醇

3、、丙酮、乙酸各提取树脂8小时,用精制过的XAD-2型树脂装柱过滤，流速为IoomlIhlin,过滤时间为38小时,然后用乙型洗脱,减压挥干，最后用二甲亚碉(DMSO)定容至2nl(l毫升该溶液相当于100L原水样)、置4。冰箱保存备用。1.2 样品的稀释此次实验有泸州南郊水厂水源水、出厂水、自来水3个样品C取一定体积的水样浓集物，用DMSo按一定比例稀释成以下浓度(即每位稀释液相当于原水的量)分别为60L11ri,30Lnri,1.5Lrhi,0.75L11ml01.3 Ames实验按照标准平板掺入法进行操作。选用TA98,TAlOO菌株,所有的菌株经鉴定合格后使用。TA98阳性对照试剂为2g

4、11ni的3-硝基9-葱酮(TNO),TA100阳性对照试剂为15jg11ri的叠氮化钠(NaN3)。每个水样设4个浓度,分别为601,30Lnri,1.5L11ml,0.75L1,每个浓度作3个平行平板,重复试验1次。以每皿的回变菌落数来反应待测物的致突变性。2结果计数每个平皿的回变菌落数,求出3个平行样的均数和标准差。现将各组的实验数据列表如下。表1泸州地区水样的AmeS试验结果(TA98)受试物浓度(LnnI)平均回变菌落数(个皿)XS水源水自来水出厂水水样6.0244.899766.3310257.P3.0172.357021.8a79+20.931.520+5.2354+15.461

5、17.80.7514+4.56347.237+6.4自发回变24.5+3.96阳性对照(INO)2450+165.9注：3与阴性对照相比,每皿回变菌落数增加一倍以上作者简介:张青碧(1968)，女,硕士。表2泸州地区水样的Ames试验的结果(TA100)受试物浓度(LIInl)平均回变菌落数(个三)xs水源水自来水出厂水水样6.0160+54.337279.1336679.113.011924.8273+68.2328960.431.5123+35.7191+56.9178+54.50.75134+44.512436.713741.2自发回变133+44.6阳性对照(NaN3)2900135.

6、9注：3与阴性对照相比,每皿回变菌落数增加一倍以上本次实验结果显示：该市水源水TA100sTA98菌株的AmeS试验呈诱变阴性，出厂水、自来水的TA100xTA98菌株的Ames试验在3.OLnilI的浓度下能检出诱变阳性。3讨论1)对于AmCS实验的结果,在背景生长良好的条件下,掺入法试验受试物每皿回变菌落数与阴性对照相比增加一倍以上,并呈现剂量-反应关系,且有重现性,即认为该受试物为诱变阳性。2)利用致突变试验检测环境化学物的诱变作用,预测其致癌能力,是化学物致癌性评价的一项重要内容。短期致突变试验按检测终点主要可分为：DNA损伤、基因突变和染色体畸变试验。AmeS试验是检测具有遗传毒性的

7、化合物对DNA碱基损伤的一种灵敏、快速、简便的方法。其原理主要为人工诱变鼠伤寒沙门氏菌菌株使其操纵子基因点突变,形成组氨酸营养缺陷型突变菌株。这种菌株不能合成组氨酸.因而在无组氨酸的培养基上不能生长。当在具有致突变性化学物质的作用下(有的需要肝微粒体酶的活化)，可使突变型沙门氏菌回复为野生型,表现为即使在无组氨酸的培养基上也能生长。由此根据受试物可以使突变型沙门氏菌菌株在无组氨酸的培养基上的生长能力来衡量该物质的致突变能力。3)饮用水中致突变I致癌物含量低、成分十分复杂,若分门别类地逐一进行化学分析,不仅技术上困难、工作量大,而且难于反应总的有害作用。因此普遍采用检测水样有机浓集物的致突变性来

8、评价可能的致癌危害。其致突变检测Ames试验最为常用。本研究中,泸州市南郊水厂的出厂水和自来水的有机浓集物在试验浓度为3.0LrliII(相当于人的日饮水量)时AmeS试验的TA98和TAl(X)两菌株均为阳性反应。表明,长期饮用该自来水,存在致突变【致癌的潜在危害。同时AmeS试验仅在出厂水和自来水的有机浓集物中，而并未在原水的有机浓集物中检测到致突变性,可能是通过饮水氯化消毒产生的致突变性氯化消毒副产物所致的O因此应该寻找一种既可以消毒杀菌又能减少消毒副产物的致突变性的饮水消毒剂以达到增进人体健康的目的。参考文献1.SavitsD,AndrewsKW,PastoreLM.Dringking

9、waterandpregnanceoutcomeincentralnorthCarolina:source,amoutandtrihalomethaneslevelsJ.EnvironmentalHealthperspectives,1975;103(5):592GrigollM,SolanasAm,BayonaJM.Characterizationofgeno2toxiccomponentsinsetimentbymassSpectrometrictechniquescombinedwithSahnOnenarIniCrOsOmetestJ.ArchiveofEh2VironmentalCo

10、ntaminationandToxicology,1990;19(2):1753 .GagneF,BlaiseC,BenninghanN.LethelandSublethel城fectsofmarinesedmentextractsonrainbowtrouthepatocytesJ.ToxicologyLetters,1996;15:554 .张遵真，衡正昌.水中有机提取物对V79细胞DNA损伤的研究J环境与健康杂志，1999；16(1):105 .俞萍.唐玲芳.镉致癌机理研究进展.国外医学卫生学分册J,1998;25(4):2066 .林辉，刘建平.饮水氯化消毒及其副产物的研究进展及展望J

11、中国公共卫生，2001;17(11):1042(2003-06-23收稿)APPLICATIONOFAMESTESTTODETECTTHEMUTAGENICITYOFDRINKINGWATERINLUZHOUCITYZhangQingbi,etalDepartmentofProphylacticMedicine,LuzhouMedicalCollegeAbstractObjective:Tbdetectthemutagenicityofby-productofchlorinatedwater.Methods:Detectthemuta2genicityoftheorganicextractsf

12、romthesampleofsourcewaterandchlorinatedwaterandtapwater.Results:TheresultofAmestestonsourcewaterisfoundne驯ive,butthoseofchlorinatedwaterwerepositive.Conclusion:Althoughthepathogenicmicrrganisminthedrinkingwaterdecreasedafterchlorinating,themutagenicityoftheby-productofchlo2rinatcdwaterincrease!.Keyw

13、ordsAmestest;Drinkingwater;By-productofchlorinatedwater;Mutagenicity经尿道双极等离子体汽化术治疗前列腺增生症80例报告杨冬园,李栋滨,张茂（四川省第四人民医院泌尿外科,成都610016）前列腺增生症是男性老年人最常见的一种慢性疾病,亦是泌尿外科常见病之一。我科自2002年3月起共收治前列腺增生症病人80例,均采用经尿道前列腺双极等离子体汽化术,效果满意,报告如下。1临床资料1.1一般资料本组年龄49岁89岁,平均75岁,共80例，病程:4年至16年。前列腺特异抗原（PSA）,1.76.2mgH、直肠指检及B超测定前列腺中度增生

14、者56例、重度增生者24例、剩余尿量60毫升560毫升、最大尿流率（QmaX）1.76.2mlc12方法本组采用前列腺双极等离子体内窥镜系统,汽化切除前列腺组织,汽化电切功率160200w,电凝功率80-100usT6点正中位汽化切除前列腺组织至精阜，深度达前列腺包膜,然后逐渐汽化切除中叶前列腺组织,再汽化切除右侧叶、左侧叶前列腺组织至精阜平面.如果前列腺增生以两侧叶为重,则依次从右侧叶、左侧叶、中叶分别汽化切除,前端至精阜.后端至膀胱颈,深度达前列腺包膜.如果12点处前列腺组织增生不明显,可不必汽化切除,术后冲洗前列腺组织碎块,尿道内置三腔导尿管,持续膀胱冲洗回病房、术后前列腺组织实体称重为

15、20g35g。2结果本组无大出血、无病员术中或术后死亡、无闭孔神经反射及前列腺汽化电切综合症出现、没有出现附睾炎。术后3天至7天拔除尿管.排尿通畅、有力，尿线粗拔除尿管后最大尿流率185nlo3讨论前列腺双极等离子体汽化电切术工作原理是电流通过工作电极与回路电极产生回路而释放射频能量将导体介质（生理盐水）转化为一围线电极的高聚焦等离子体区,这一等离子体区是由高电离颗粒构成,这些高速运动的电离颗粒具有足够的能量将靶组织有机分子键打断。其结果是靶组织融为基本分子随即破碎、汽化,与第一代、第二代电切汽化镜相比具有以下明显优势：姓新的动态等离子切割机制,切割准确,不粘刀，操作方便。行效的腺体切割、止血效果好,保证了视野清晰.如和包膜的胶原纤维接触,能量自动变小,可使切割停止,从面避免损伤包膜。纲时兼有TURP电切拌的准确切割和vp汽化样的汽化止血两大特点。0K温操作,表面温度仅4070C被喻为二十一世纪新型外科冷切割技术。殿有限的热穿透、对周围组织损伤少，减少了膀胱刺激症,不损伤勃起神经,独特的双极回路设计，不出现闭孔肌反射。（三用生理盐水作为工作介质