菌落总数检验原始记录-平板计数法-2022版-5样.docx

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1、菌落总数检验原始记录（平板计数法）检验单位检验员检验日期至环境条件温度,相对湿度%检验依据GB4789.2-2022食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定样品名称产品批号仪器设备及耗材，电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、移液器培养基及试剂：平板计数琼脂培养基（PCA）：ml配制日期：生理盐水：ml配制日期：实验过程：1.样品稀释：1 .2制备样品稀释液根据样品状态，无菌操作，称取25g吸取25mL样品，加入到225mL无菌生理盐水中均质（或混匀），制成1:10样品匀液。用ImL无菌吸管或微量移液器吸取1：IO样品匀液ImL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的

2、无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1：100的样品匀液。按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次Iml无菌吸管或吸头。2 .接种PCA选择适宜13稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取InIL于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取InlL空白稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时用15mL20mL冷却至46C-50C的平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。同时再以只加平板计数琼脂培养基的平皿同步培养，作为PCA的空白对照。待琼脂凝固。3培养将以上PCA平板倒置于36.O1C,培养48+2h（

3、/时/_/时）并计数。4 .菌落计数4.1 可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（ColonyformingUnit,CFU）表示。4.2 选取菌落数在30CF-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。4.3 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。4.4 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，

4、则将每条单链作为一个菌落计数。结果报告品号样序各稀释度平板上的菌落数结果CFUmLCFUg第一稀释度：第二稀释度：第三稀释度：样品1样品2样品3样品4样品5空白稀释济员+PCAPCA空白(RPCA)计算方法1 .若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总数结果。2 .若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按式计算。ZZCN-（n1+0.1m2）J式中：N样品中菌落数；C一一平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2一一第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d

5、一一稀释因子（第一稀释度）。3 .若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。4 .若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。5 .若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。6 .若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU-300CF之间，其中一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。计算过程：方法报告1菌落总数小于IoOCFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。2 .菌落总数大于或等于100CFU时，第三位数字采用“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五人”原则修约后，采用两位有效数字。3 .若空白对照上有菌落生长，则此次检验结果无效。4 .称重取样以CFg为单位报告，体积取样以CFmL为单位报告。报告人报告日期复核人复核日期