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1、药学实习自评报告很快,我的研究生生活即将过去三分之二,在导师、各科任老师和辅导员老师的辛勤培养和教育下,在学院领导的关怀下,本人在政治思想表现、学习态度与成绩、科研能力及专业实践等方面都有了很大的进步,现自我总结如下:一、思想表现首先,在思想表现上,我始终对自己有较高的要求,主动加强对政治理论知识的学习,主要包括继续深入领会“三个代表”重要思想和科学发展观的精神,并配合支部的组织生活计划,切实地提高了自己的思想认识,积极关注国家的大事。能用科学发展观来认识世界、认识社会,并且积极开展了自我剖析,自我反省,能清醒的意识到自己所担负的社会责任,对个人的人生理想和发展目标,有了相对成熟的认知和定位。
2、二、专业学习在专业学习方面,研一期间认真地学习每一门课程并取得尽可能优异的成绩,取得了相应的学分,掌握了本专业的基础知识八在继续加强理论学习的同时,注重实践,实现了由理论到实践的过渡。在导师的指导下,我逐步接触了关于天然产物化学的许多专业技术知识。完成课程论文的过程中阅读的大量参考文献拓宽了我的专业知识面,同时培养了收集资料及对资料进行归纳总结的能力。参加了学校开展的各类学术论坛和学术交流,聆听了学术大师们的金玉良言,受益匪浅。同时,采取各种途径深化和拓宽专业领域知识,包括借阅学校图书馆的专业文献和专业期刊,网上查阅电子期刊等等,从而了解了专业领域最新的研究成果以及研究方法。尤其认真翻译了一些
3、外文资料对我的英文阅读能力,写作能力上都有很大帮助。对研究过程中碰到的题目能够通过导师的帮助、通过网络资源、图书馆资料以及同学的帮助顺利解决。因此也会遇到一些以往不会遇到的困难,如不知道如何寻找、在哪寻找最新的资料等等。随着时间的积累,我逐渐窥到了一些研究的方法,慢慢适应了这种学习,开始慢慢的通过各种渠道来解决实际存在的问题。三、实践实习在实践实习方面,我在中美华东微生物技术平台与大分子实验室进行了为期六个月的实习。在实习期间,我参与了“达托霉素菌种的筛选与发酵工艺的研究”项目,在该项目组中,我学会了很多基本的实验技能,同时对很多以前没有接触过的概念和背景有了一定的了解,最重要的是有了一个在一
4、个陌生领域收集资料、抓住重点、建立框架以开展工作的经验,爱因斯坦讲“将你能够忘掉的东西都给忘掉,剩下的东西才是你真正学到的知识”,因此我觉得这样一种能够脱离机械的知识与技能而存在的,具有极强通用性的经验才是我在这个部门学到的最宝贵的财富。1.达托霉素菌种的筛选与发酵工艺的研究1.1实验背景达托霉素(DaPtolnyCin)是由Lilly公司最初研究,Cubist制药公司开发的一环脂肽类抗生素,它的作用机制与传统抗生素不同,他通过扰乱细胞膜对氨基酸的转运,从而阻碍细菌细胞壁肽聚糖的生物合成,改变细胞质膜的性质;另外,它还能通过破坏细菌的细胞膜,使其内容物外泄而达到杀菌的目的,因此细菌往往难以对达
5、托霉素产生耐药性。达托霉素主要要作用于耐药菌,如耐甲氧西林金葡菌(MRSA),耐万古霉素肠球菌(VRE),对糖肽类敏感金前菌(GISA),耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的感染。达托霉素结构式OHOH% -达托霉素主要由玫瑰胞链霉菌(StrCPtOmyCeSroseosporus)经发酵得到,在玫瑰抱链霉菌发酵的过程中加入正癸酸可获得,利用筛选的癸酸抗性突变株流加法发酵以及激光诱导突变株结合链霉素抗性筛选生产达托霉素的方法都可以将产量提高到35%以上,其结构是由一个十碳烷侧链与一个13个氨基酸组成的环状B氨基酸肽链N-末端的色氨酸连接而成。玫瑰胞链霉菌的原始菌株达托
6、霉素的产量极低,根本无法满足产业化的需求,因此一般在进行大规模产业化生产之前要先进行菌种优化与选育以提高达托霉素的发酵水平,其中抗生素的抗性筛选是最主要的方法,其原理在于利用抗生素产生菌产抗生素能力与抗生素产生菌抗性突变之间的相关性进行筛选,可以减少抗生素高产菌筛选的盲目性,从而提高筛选效率和筛选水平。常用的诱变方法有紫外诱变方法、硫酸二乙酯(DES)诱变方法、激光诱变法。玫瑰胞链霉菌的发酵产生五种结构类似物,其中A21978C是其主要产物,其N末端与葵酸发生酰化作用即可得到达托霉素,这种酰化的实现有生物法生产和化学半合成法,其中生物法是在发酵液中直接加入葵酸,在生物酶的作用下,A21978C
7、引入葵酸侧链生成达托霉素,而化学半合成法是先从发酵液中分离提纯出A21978C,通过脱酰得到其母核,接着再经过酰化反应制得达托霉素。由于生物法具有能耗小,污染轻等优势,现在依然是达托霉素生产的主流方法。而在发酵过程中通常要控制的发酵变量有PH值、种子培养基成分、发酵温度、接种量、前体(一般是葵酸和油酸甲酯混合物)补加量和补加时间。1.2工艺流程总结摇瓶种子配方:糊精2%,酵母粉(榴花)1%,酵母浸粉8021%,玉米浆0.5%,PH7.2配置方法:按比例称取配方中各成分置于烧杯中,加入适量纯水,使用搅拌机搅拌约十分钟,至其搅拌均匀,没有块状固体存在,加入少量消泡剂消去泡沫,再添加纯水至刻度,以N
8、aOH溶液调节PH至7.2,分装至适量大小的锥形瓶中,用绵塞塞紧,在高温灭菌仪中121C灭菌30分钟,放冷后备用。摇瓶鉴定配方:糊精9%,酵母粉(榴花)2.5%。CSP(玉米浆粉)0.5%,硫酸亚铁钱0.05%,棉籽粉1%,磷酸氢二钠0.2%,葵酸三甘油酯0.6g瓶,PH7.2配置方法:按比例称取配方中各成分置于烧杯中,加入适量纯水,使用搅拌机搅拌约十分钟,至其搅拌均匀,没有块状固体存在,加入少量消泡剂消去泡沫,再添加纯水至刻度,以TRlS(三羟甲基氨基甲烷)溶液调节PH至7.2,分装至适量大小的锥形瓶中,用绵塞塞紧,在高温灭菌仪中121C灭菌30分钟,放冷后备用。A3固体配方:葡萄糖0.5%
9、,可溶性淀粉1%,进口酵母菌浸出粉0.5%,进口固体玉米浆粉0.5%,琼脂1.8%,PH7.2(氢氧化钠调)备种工艺:在无菌操作间内用竹签刮取涂布9天的单菌落4-5颗或涂布13天单菌落2-3颗备种100500ml,置于摇床间30下培养24h,取下摇瓶在无菌操作间用移液管移取3%(即0.75ml)接入发酵液中25250ml,置于摇床间30下培养3-5天。摇瓶鉴定工艺:甘油管或单菌落涂布7-10天,在固体培养基中点种(每一颗菌落点成三颗菌落),保温箱中30下培养8T0天后在进行鉴定。其中一颗点种或涂布单菌落接入种瓶中(装量20/25OmI)置于摇床间30下培养24h,再取下摇瓶在无菌操作间用移液管
10、移取3%(即0.75Inl)接入发酵液中25250ml,置于摇床间29.5-3(TC下培养3-5天,另外两颗菌落则接入分别甘油管中在4冰箱内保存起来。效价处理:(1)达托霉素含量的测定:发酵液中达托霉素的浓度采用高效液相色谱法进行测定,取0.4ml发酵液,加入0.8ml乙醇,在离心机转速14000rpm下离心10-15min,取上清液进行HPLC测定。(2)菌浓的测定:通过测定一定体积的培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。取IomL待测培养液,放在离心管中,5000rpm离心5min,离心后,倒出上清夜,测出上清夜体积为V,则菌丝浓度为(10-v)/IOo在大规模工业发酵生产上菌丝浓度
11、测定法是微生物生长的一个重要监测指标。2.实习心得实习是一段实践经历,任你口绽金莲天花乱坠也比不上亲身经历一番。在这一次的实习中,除了切实拓宽了我的知识领域和实验经历之外,更大的收益是一种脱离象牙塔后对社会的深入考察与深切体会,理解企业与高校科研经历与科研体系的区别,更进一步思考这两者在社会这个大分工中不同的定位和以此产生的具有明显区别的评价系统。2.1 企业与高校科研工作的不同企业与高校的产生与发展有着完全不同的历史历程,也为了满足不同的社会需求,同样的科研工作在这两种单位中自然呈现着不同的面貌。高校的本质是一个培养人才的地方,它的科研追求着更大胆的创新,更惊人的突破与更高的学术水平,因此在
12、高校中的科研往往鼓励创新和思考,更需要扎实的学术水平和过硬的技术背景,其评价标准是一个以论文发表数量与影响因子作基石形成的学术评价系统。基于这种特点,高校中的研究往往也有脱离实践成为空中楼阁的缺陷;相较而言,企业的本质是一个需要计算成本与利润,激活社会经济的单位,其中的科研工作更多地考虑产业化的需要和市场的需求,更多的利用成熟而稳定的技术,其中的从业者不仅要对技术非常熟悉,还要对市场情况和由概念到产品中常见的困难有深入的了解,其评价系统要简单得多,就是以是否创造出成功的产品是否产生可观的经济效益作为评价标准。因此它无可避免的具有缺乏创新,远离技术尖端的特点。2.2 企业与高校科研组织结构的不同
13、另外,企业与高校在科研单位的组织结构上也有很大的不同,高校中大致上以每个老师作为一个研究单位,一个老师带着几个研究生甚或一些本科生组成一个小作坊式的科研主体,申请基金、论文产出都是以这样一个结构作为主体,老师与老师之间也会有一些间断性的合作甚至组成持续性的团队,但是这种合作在结构上往往是缺乏凝聚性的。相较而言,企业里的科研活动以一个部门为单位,一个部门上百人,其中包括博士生到大专生甚或是专门负责刷瓶子的阿姨,有着更大范围的合作,更精细的分工,更加规模化的实验平台。与之相比,高校小作坊式的研究单位中研究生大包大揽,承担几乎所有的体力劳动与脑力劳动,有人才浪费之虞。四、科研工作与课题进展在科研工作
14、上,在导师丰富的经验和严谨的工作态度熏陶下,开拓了视野,学会了怎样让自己克服惰性、保持学习的斗志,并认真研读经典论著,逐步明确了研究方向。在前期科研工作中参与了前沟藻属甲藻次生代谢产物的分离提纯与结构鉴定等工作,掌握了微型海藻养殖与代谢产物提取等基本的实验技能与试验方法。在这期间,查阅资料、综合分析等基本素质得到不断提高,书面表达能力也得到了锤炼,尤其是独立思考、判断和研究的能力,有了很大进步,这些对于未来的工作也大有裨益。同时还提高了与同事之间的沟通交流能力,团队协作意识、坚韧和奉献的精神也得以培养,为走出校园融入社会做好了准备。我的科研课题名为“一株海洋前沟藻属甲藻(Amphidinium
15、C回”)的次生代谢产物研究”课题进展处于第一阶段,Amphidiniumcarterae藻株的规模化培养。五、下一步研究路径及工作计划下一步工作计划是进一步推进我的科研课题,待AmphidiniumCarterae藻株培养到100OL以上之后,在藻种密度到达平台期末尾时收取。在得到浸膏后对其进行粗萃和分离,将其分别分配分离至二氯甲烷层,正丁醇层和水层,而后取正丁醇层用Sephadex柱进行进一步的分离,最后利用RPLC得到单体化合物。等到得到单体化合物后进行结构鉴定的工作,利用紫外、红外、核磁、COSY、HMBC等技术对其平面结构进行确定,利用二维NOE谱、Mosher方法等对其立体构型进行确
16、定。而后对其可能具有的生物活性进行研究。总而言之,我在这一学年收获颇丰,从学业、科研工作,到个人素质,都得到了充分的培养和锻炼。相信这些经历和积累都将成为我人生路上的宝贵财富。以上我总结了前阶段研究生阶段的生活,当然,存在一些不足之处,比如做事决策上不够自信、果断;深入性思考和融会贯通能力有待提高,这些都是我在日后工作学习中要特别注意的地方。对于我,下阶段任务更加重大,在完成毕业设计的路上,要付出更大的努力。合理安排时间,理论和实践两者共同发展,共同进步,并争取早日完成自己的毕业设计。今后的时间里,我将扬长避短,再接再厉,不断提高思想素质和政治修养,通过多阅读经典的专业著作、汲取前人的经验教训、多参与项目实践积累经验,提高自身专业技能,以期在工作和学习中能取得更大的进步。