猪圆环病毒最新进展.ppt

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1、猪猪圆环疫苗研究圆环疫苗研究进展进展PCV2 PCV2 遍布全球养遍布全球养猪业猪业全球没有全球没有PCVPCV阴性阴性群，群，PCVDPCVD世界头号猪病世界头号猪病.病原分类地位v 猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)为圆环病毒科圆环病毒属成员，是脊椎动物病毒中最小的一种。单股DNA病毒圆环病毒科PCV1PCV2PCV2aPCV2bPCV2cpcv2d细小病毒科猪细小病毒PCV形态特征理化特性二十面体对称，无囊膜，病毒粒子大小为 17nm。PCV2 PCV2对对外界的抵抗力较强外界的抵抗力较强,pH3,pH3存活很长时间存活很长时间,对氯仿不敏对氯仿不敏感，在感，在5

2、656或或7070处理处理一段时间不被灭活，在高温下可存活一一段时间不被灭活，在高温下可存活一段段时间对时间对一般的消毒剂抵抗力强一般的消毒剂抵抗力强,很难从感染猪场清除很难从感染猪场清除PCV2PCV2。PCV理化特性PCV2基因组概况 PCV-2 基因组为闭合环状单链DNA，全长有1767bp或 1768bp两种，PCV2基因组含有11个可能的开放阅读框（ORFs），其中，ORF1、5、7和10位于病毒基因组的正链上；ORF2、3、4、6、8、9和11位于病毒基因组的互补链上。PCV2基因组概况ORF1编码Rep和Rep蛋白，ORF2编码Cap蛋白Cap蛋白可自我装配成病毒衣壳样颗粒Cap

3、蛋白对PCV2检测和疫苗研究具有重要意义 Phylogenetic tree constructed by the neighbor-joining method based on the complete 702-nt sequence of the PCV2 ORF2.Fifty two strains whose entire or partial sequences have been reported were included for comparison.The comparison with Chilean strains revealed an identity rangin

4、g from 97.5%to 98.7%and 92%to 95%at nucleotideAnd amino acid level.PCVPCVPCVAD（porcine circovirus-associated disease）PMWS（postweaning multisystemic wasting syndrome）自1911年在加拿大发现PMWSPMWS后，13年后，首个圆环疫苗在法国和德国被获特殊批准使用；在疫苗使用之前主要依靠管理手段防治圆环。之前更多的是关于疾病本身的报道，近年来，越来越多的人开始关注商业化疫苗的研究进展。商品化圆环病毒疫苗全球圆环疫苗的使用情况商品化圆环病

5、毒疫苗的类型 2006 2006年，梅里亚的圆环灭活疫苗（年，梅里亚的圆环灭活疫苗（Circovac）首首先开始推向市场，该疫苗开始是用于怀孕母猪，先开始推向市场，该疫苗开始是用于怀孕母猪，（2ml/2ml/头份）；现在也用于仔猪（头份）；现在也用于仔猪（0.5ml/0.5ml/头份）。头份）。中国首例中国首例 灭活苗（灭活苗（株），是由株），是由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所刘长明研究员成功中国农业科学院哈尔滨兽医研究所刘长明研究员成功地研制出，地研制出，并于并于20102010年年9 9月，月，哈尔滨维科生物技术开发公司，第一份国产疫苗问世在国内第一份国产疫苗问世在国内 。灭活苗公司公司商

6、品名商品名毒株毒株上海海利圆必净猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）哈尔滨维科猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）南农高科圆克清猪圆环病毒2型灭活疫苗（SH株）洛阳普莱克圆健猪圆环病毒2型灭活疫苗（SH株）武汉中博圆环力康猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）中牧圆满猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）瑞普诸元妥猪圆环病毒2型灭活疫苗（ZJ/C株）福州大北农诸欢泰猪圆环病毒2型灭活疫苗（DBN-SX07株）成都天邦圆力佳猪圆环病毒2型灭活疫苗（DBN-SX07株）武汉科前猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）杭州荐量圆量猪圆环病毒2型灭活疫苗（ZJ/C株

7、）南京天邦园必宁猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）齐鲁动保圆捷猪圆环病毒2型灭活疫苗（ZJ/C株）诺倍威圆净诺猪圆环病毒2型灭活疫苗（ZJ/C株）广东永顺圆顺猪圆环病毒2型灭活疫苗（WH株）华派生物圆环康猪圆环病毒2型灭活疫苗（ZJ/C株）杆状病杆状病毒表达毒表达ORF2ORF2勃林格（Circoflex）英特威/默沙东（Circumvent）默沙东/先灵葆雅（Porcillis PCV）Circumvent跟Porcillis PCV，是相同疫苗的不同制剂除在韩国同时出售以外，不在相同的国家进行销售，Circumvent在北美进行销售，Porcillis PCV主要在欧洲。亚单位疫苗 辉瑞辉瑞

8、/富道公司的富道公司的PCV1-PCV2PCV1-PCV2嵌合灭活疫苗（嵌合灭活疫苗（PCV1-PCV1-PCV2PCV2）（）（FosteraFostera PCV PCV）（将）（将PCV1PCV1基因组骨架中的基因组骨架中的ORF2ORF2用用PCV2PCV2的的ORF2ORF2替换）也于替换）也于20042004年推向市场，在年推向市场，在20082008年年的时候在加拿大的一个猪场里发现了嵌合疫苗的序列，的时候在加拿大的一个猪场里发现了嵌合疫苗的序列，辉瑞辉瑞/富道回收了该疫苗，于富道回收了该疫苗，于20112011年重新投放市场。年重新投放市场。嵌合疫苗疫苗免疫效果疫苗免疫效果的评

9、估的评估 缺少一致、准确以及可重复的缺少一致、准确以及可重复的PMWSPMWS的模型是难以建立的模型是难以建立PCV2PCV2疫疫苗评价效果标准的主要难点。总体来说，疫苗效果评价主要基于以苗评价效果标准的主要难点。总体来说，疫苗效果评价主要基于以下几点：下几点：1 1、临床表现；、临床表现；2 2、可见的典型病变；、可见的典型病变；3 3、PCV2PCV2的病变情况。的病变情况。另外一项评价标准是血清中的病毒载量，试验数据表明，血清中另外一项评价标准是血清中的病毒载量，试验数据表明，血清中的病毒载量可以反映的病毒载量可以反映PCV2PCV2的感染情况。此外，在的感染情况。此外，在PCV2PCV

10、2感染的猪上，感染的猪上，病毒载量的降低与病毒载量的降低与NasNas以及以及IFN-SCsIFN-SCs的出现是一致的。的出现是一致的。免疫免疫抑制抑制PDNSPDNSPRDCPRDC繁殖繁殖消化消化PMWSPMWS这就是这就是PCVDPCVDn广泛流行，猪群中血清阳性率高达广泛流行，猪群中血清阳性率高达60-100n急性发病猪群中，病死率可达急性发病猪群中，病死率可达10%n传播途径：传播途径：消化道、呼吸道途径，也能垂消化道、呼吸道途径，也能垂直感染直感染流行特点：流行特点：n临床表现：临床表现：n猪只进行性消瘦，生长缓慢猪只进行性消瘦，生长缓慢n皮肤苍白皮肤苍白n呼吸困难呼吸困难n皮下

11、淋巴结肿大明显皮下淋巴结肿大明显n偶尔可见腹泻、黄疸偶尔可见腹泻、黄疸断奶仔猪多系统衰竭综合症断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS）症状可联合或单独出现！症状可联合或单独出现！PCV2+KLH/ICFAPCV2+KLH/ICFA组猪生长迟缓组猪生长迟缓 PCV2+KLH/ICFAPCV2+KLH/ICFA组病死猪组病死猪临床症状临床症状淋巴结肿大淋巴结肿大PCV2+KLH/ICFAPCV2+KLH/ICFA组猪肺间质增宽，出血组猪肺间质增宽，出血对照组对照组 正常猪肺脏正常猪肺脏 皮炎与肾病综合征（皮炎与肾病综合征（PDNS）n主要发生于保育后期、生长肥育期和成年主要发生于保育后期、生长肥育期和

12、成年猪猪n呈散发，发病率低于呈散发，发病率低于1，死亡率很低，死亡率很低n猪皮肤上形成圆形或形状不规则、呈红色猪皮肤上形成圆形或形状不规则、呈红色到紫色的病变。病变中央呈黑色，常融合到紫色的病变。病变中央呈黑色，常融合成大的斑块成大的斑块n病变通常出现在猪的后腿、腹部，可扩散病变通常出现在猪的后腿、腹部，可扩散到全身到全身n感染轻的可自行康复，感染严重的表现出感染轻的可自行康复，感染严重的表现出跛行，发热，体重降低跛行，发热，体重降低n皮肤继发化脓、溃烂皮肤继发化脓、溃烂n肾脏肿胀、苍白，为斑驳状肾脏肿胀、苍白，为斑驳状呼吸道疾病综合征（呼吸道疾病综合征（PRDS）nPCV2是猪呼吸道疾病综合

13、征（是猪呼吸道疾病综合征（PRDS）的原发性病原的原发性病原n可引起猪的肺炎可引起猪的肺炎n表现出呼吸道症状表现出呼吸道症状繁殖障碍繁殖障碍nPCV2可致晚期流产、死胎可致晚期流产、死胎n很少发生很少发生致病机理致病机理nSegales等发现等发现T淋巴细胞和淋巴细胞和B淋巴细胞减少，淋巴细胞减少，不成熟粒细胞的密度偏低。不成熟粒细胞的密度偏低。nPCV-2引起了淋巴细胞凋亡，引起了淋巴细胞凋亡，APC递呈抗原能递呈抗原能力的减弱，同时降低了力的减弱，同时降低了B细胞和细胞和CD4+细胞细胞的机能。的机能。nPCV-2具有免疫抑制性，具有免疫抑制性，感染感染PCV-2的猪一般的猪一般都发生免疫

14、缺陷。都发生免疫缺陷。致病机理致病机理n其它病原协同感染或免疫刺激等均可能在一定程其它病原协同感染或免疫刺激等均可能在一定程度上促进度上促进PCV-2的增殖，的增殖，引起淋巴组织损伤。引起淋巴组织损伤。病病猪处于免疫抑制状态，导致严重的猪处于免疫抑制状态，导致严重的PMWS。nPMWS感染猪对其他免疫原不能增进有效的免疫感染猪对其他免疫原不能增进有效的免疫应答，成为本病致病机制的重要原因，使猪群中应答，成为本病致病机制的重要原因，使猪群中同时有多种疾病综合征发生。同时有多种疾病综合征发生。二、当前猪圆环病毒病流行现状二、当前猪圆环病毒病流行现状n2000年，中国首次有报道年，中国首次有报道n2

15、000年今，陆续分离到年今，陆续分离到PCV2病毒病毒n2002年以来，猪群年以来，猪群PMWS增多，呈爆发增多，呈爆发性流行性流行n2009年，年，PCV2毒力增强毒力增强中国动物卫生与流行病学中心（青岛）检测中国动物卫生与流行病学中心（青岛）检测-李晓成研究员结果李晓成研究员结果PCVPCV2 2感染状况感染状况n几乎所有的猪场都存在猪圆环病毒几乎所有的猪场都存在猪圆环病毒2 2型型（PCV2PCV2）感染）感染n保育仔猪和生长育肥猪感染率最高，很保育仔猪和生长育肥猪感染率最高，很多猪场达多猪场达100%100%n猪群带毒（血清中猪群带毒（血清中PCV2PCV2检测）十分普遍检测）十分普遍

16、n猪圆环病毒病呈高感染率猪圆环病毒病呈高感染率n感染日龄早（产房哺乳仔猪）感染日龄早（产房哺乳仔猪）n与与PRRSV共感染共感染n继发副猪嗜血杆菌、链球菌等感染继发副猪嗜血杆菌、链球菌等感染nPCV2呈现多基因型呈现多基因型n分为两个群（分为两个群（Group1和和Group2）n不同的基因型（不同的基因型（1A,1B,1C,2A,2B,2C,2D,2E和和2F）。）。n我国目前我国目前2B为主型，还有为主型，还有2D、2E。毒力增强！毒力增强！nGauger P C;Lager K M;Vincent A L;等等.Veterinary microbiology,2011-Dec-15(Epub 2011 May 30)nPCV2a和和PCV2b分离株均可单独引起高分离株均可单独引起高的死亡率。的死亡率。PCV2b毒力更强。毒力更强。n Guo Longjun;Lu Yuehua;Wei Yanwu;等等.Virology，2011-Oct-25(Epub 2011 Sep 03)nPCV2b(JF11)/2a(CL1)和和 PCV2b(YJ)/2a(CL1)。两个重组突变体的。两个