医院检验科钠离子及氯、钙的测定方法介绍.docx

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1、钠离子测定1.实验原理VitroS钠试剂是一种干燥，多层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份，用直接电位法进行钠离子测试的干片。该干片由两个离子选择电极组成，每一电极含有甲基莫能菌素（钠离子载体），一个参照层和一个银和氯化银层。将一滴IOul的患者样品和IOul的Vitros电解质参考液分别滴于干片左右两侧，于是两边的液体就向纸桥的中央移动，从而在参考电极和样品指示电极之间形成一条稳定的液流。每个电极会产生与其钠离子活性相应的电位，两极间的电位差与样品中钠离子浓度成正比。测定方式：电极电位法测试时间和温度：37C下约2分钟。2.标本：2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰

2、。2.2样品类型：血清、肝素抗凝血浆；定时或随时采集的尿液。2.3标本采集与处理：2.3.1血清和血浆样品特别要注意的是：不要从正进行静脉注射的手臂上采血。纤维凝块会引起加样不完全，为避免此类情况发生，可以：让标本完全凝固后再离心取血清：观察血浆中是否有纤维凝块。样品采集后2天内要离心标本，吸出血清。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不需加防腐剂，并且防腐剂可能会产生干扰。样品测试前要将其冷藏在2-8C。从冰箱中取出VitroS尿液电解质稀释液，放至室温，18-28C。轻轻将稀释液颠倒混匀（注意：不能摇晃）。在一个清洁、干燥的容器中加入一份

3、尿样和四份Vitros尿液电解质稀释液（稀释5倍）。迅速将稀释液盖好，放回冰箱。将样品与稀释液充分混匀。测试预处理后的样品，将测试结果乘以5,就得到原始尿样中的Na+浓度。处理样品时要将其当成生物污染品。3.标本的存放：血清、血浆：室温下可最多保存4天；冷藏最多1周：冷冻保存可保存长达半年。尿液样品在测试前要冷藏，保存在室温下最多1天：冷藏最多7天:冷冻保存可达半年。4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。5.标本拒收的标准：氟化钠/草酸钠，EDTA或枸柳酸盐抗凝的血浆。加防腐剂或未冷藏的尿样。6.试验材料：6.1测试Na所需的物品包括：VitroS化学定标物Kit2；VitrO

4、S特制质控液；VitrOS参考液；VitroS尿液电解质稀释液。强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是银，氯化银，氯化钠和甲基莫能菌素。其它成份有聚合物，增塑剂，稳定剂，缓冲剂，表面活性剂和集。干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。6.1.2试剂准备：从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态1828。因此从冰箱中取出的试剂盒至少要在室温下要放置120分钟，而冷臧的试剂盒至少要在室温下放置90分钟。去除内包装后立即将干片

5、盒放入仪器的储藏器中。说明：在试剂盒达到室温后的24小时之内必须将其装入仪器中。6.1.3试剂稳定性与贮存未开封的干片盒：存储在T8。C或低于该范围（为减少试剂预温时间或当冷冻空间有限时，也可将试剂盒在2-8C冷藏，最多保存三个月）.三在机内干片储藏器中的干片盒：在仪器上放置时间不能超过10天，否则要更换新试剂。当仪器关闭时间不超过2个小时时，可将干片盒留在储藏器中。出现以下情形要做质控检测：仪器关闭时间超过2小时；再次装载从仪器储臧器中取出的干片盒。如果储臧正确，VitrOSNa.干片可保质到包装盒上标明的有效期限。参见VITROS250干化学分析仪试剂稳定性及贮存S0P文件。6.1.4变质

6、指示：超过有效期的试剂干片不能使用。6.1.5注意事项：为避免干片盒打开以前其内包装受损，不能摔打干片盒；不要让尖利物刺入内包装。6.2校准品：用VitroS化学定标物Kit2。血清、血浆、尿液都用相同的定标液，不过各自的SAVS值不同。有关标准液的配制，使用及保存的配制，保存和稳定的详情，可参阅VITRoS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：使用Vitros特制的质控物品：若使用其它的一些质控物品，当与别的Na测试方法比较时就会出现差异。有关质控液的配制，保存和稳定的详情，可参阅VlTROS50干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。7.仪器美国强生厂家VITR0S5

7、0全自动干式生化分析仪。具体测试程序请参阅操作手册的介绍。8.操作步骤：将试剂复温后直接放入仪器，样品编程，仪器5分后自动打印结果。具体测试程序请参阅VITRoS250操作手册.SOP。具体定标程序：用VitrOS化学定标物Kit2,定标液复溶后必须在1小时以内使用，以免PH值发生变化。参阅操作手册的相关章节内容。何时进行定标：在维护和保养时更换了仪器的重要部件。质控结果持续超出线性范围内时，详情参阅操作手册。管理条例上指定的时间，在美国，CLlA要求至少每6个月定标一次。说明:进行尿钠定标时，仪器会自动进行尿钾的定标。9.检验结果的判断与分析10.质量控制：操作建议：将质控物质当成生物污染品

8、来处理；将质控液与患者样品同时进行测试；每天至少做一次质控以检测仪器运行状况；选择质控浓度来检杳与临床的相关性；其它详情参阅操作手册质控章节的有关内容。有关质控操作的常规性条例可参照国际质控检测(IQCT)的内容。在每一批标本中都应把质控血清做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以用VitroS化学定标物校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。12.参考值范围血清/血浆137-145mmolL尿液30-90mmolLf40220mmol/day

9、以上参考范围值是通过测试59位健康成人，然后取靶值附近95%的结果计算所得。男性和女性的结果无明显差异。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别.根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13.临床意义：钠离子是细胞外液中的主要阳离子，人体内的钠平衡由肾脏维持。尿液排泄过多，腹泻，AddiSon氏综合症，肾小管肾炎等都可引起钠浓度降低。严重脱水，某些类型的脑外伤，糖尿病昏迷和盐摄入过量可导致钠浓度升高。14.操作性能14.1线性范围血清/血浆：75-250mmolL;尿液：5-25OnInIol/L(乘以稀释倍数5后的结果)。14.2精密度：在VitroS250生化仪上用质控液来

10、测精密度。结果反映了该方法的精密度。当仪器维护，周围环境，干片处理和保存，质控液的复溶以及样品处理等方面发生变化都会影响结果的重复性。日间精密度血清X(mmolL)S(mmolL)CV(%)室间精密度n=20天X(mmolL)S(mmolL)CV(%)样品1n-801270.8样品11271.10.9样品2n=781471.0样品21471.51.0日间精密度尿液X(mmolL)S(mmolL)CV(%)室间精密度n=20天X(mmol/L)S(mmolL)CV(%)样品1n=74240,4样品1241.04.4样品2n=73.420.6样品2421.74.2*日间精密度是将2至3份相同的样品

11、在一天中运行两次，然后对测试结果进行统计计算。*室间精密度是用同一个批号的干片每周定标一次，然后对测试结果进行统计计算。14.3方法学比较：用VitrOS700仪器和火焰光度参考方法分别测试相同的血清/尿液样品，对比结果显示VitroS方法的准确度良好；用Vitros250仪器与Vitros700仪器测试相同的血清/尿液样品，对比结果显示Vitros250方法的准确度良好，血清：Y=LO2X-1.64（r=0.998,N=89,检测范围1-219mmolL）；尿液：Y=1.03X+1.90（r=0.998,N=86,检测范围11l-213mmolL）14.4灵敏度：血清/血浆：75mmol/L

12、:尿液5mmol/L14.5特异性：经测试，以下物质对VitroSNa+干片法均无干扰（偏差4.3mmolL）。维生素C（3mgdL）、胆红素（20mgdL）、钙（4mmolL）、葡聚糖（IOoOmgdL）、乙醇（150mgdL）、异烟腓（0.4mgdL）、锂（ImEq/L）、镁（1.85mmol/L）、乐疾宁（1.5mgdL）、卵磷脂（400mgdL）,钾（8mEqL）、总蛋白（IOgdL）、甘油三酯（800mgdL）、尿素氮（100mgdL）。14.6病人结果可报告范围：血清/血浆：75-250mmolL;尿液5-250mmol/L（乘以稀释倍数5后的结果）。15.超出范围结果处理：本法线

13、性上限血清/血浆：250mmolL:尿液25Ommo1/L（乘以稀释倍数5后的结果M血清或血浆：钠浓度一般不会超出系统的测试线性范围。VitroS干片法不能测试稀释后的样品，因为稀释液会同时改变血浆液中的固体浓度和离子强度。尿液：如果尿样中的钠浓度超出系统的测试线性范围，请按以下步骤进行稀释：在一份样品中加入等量的试剂级别的水。按照尿液样品准备的程序，在以上稀释后的一份样品中加入4份Vitros尿液电解质稀释液；重新测试；将测试结果乘以10，就得到原始样品中的钠浓度。16.病危报警值的处理当血清/血浆：钠216OmmoI/L或W120mmolL,应在复查该标本检测结果后，报告上级检验医师（或科

14、主任）后，及时报告临床医生，必要时可以再抽血复查。17.方法局限性17.1本法线性上限为250mmol/Lo血清或血浆：钠浓度一般不会超出系统的测试线性范围。Vitros干片法不能测试稀释后的样品，因为稀释液会同时改变血浆液中的固体浓度和离子强度。尿液：如果尿样中的钠浓度超出系统的测试线性范围，请按以下步骤进行稀释：在一份样品中加入等量的试剂级别的水。按照尿液样品准备的程序，在以上稀释后的一份样品中加入4份Vitros尿液电解质稀释液；重新测试；将测试结果乘以10,就得到原始样品中的钠浓度。17.2干扰物质：以下尿液防腐剂在钠浓度为90mmol/L时，于所示浓度会引起一定的结果偏差。冰醋酸（I

15、omL/L尿时，平均偏差9%）：浓盐酸（IomL/L尿时，平均偏差9%）：甲苯（1.3mL/L尿时，平均偏差6%）；麝香草酚（6.7mL/L尿时，平均偏差27%）；六甲基羟化四甲核（1片/3OmI尿时，平均偏差6%）：硼酸（144mg/27ml尿时，平均偏差6%）；硼酸300mg/27ml尿时，平均偏差13%）。有些药物和患者的自身状况也会影响钠的测试值。18.补救措施：仪器出了故障可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先做，如别的实验室无同类仪器，可用本实验室的OLYMPUSIse分析仪或Easylyte电解质分析仪测定样品。19.参考文献强生厂家提供的方法学手册20.其它：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处理.SOP文件处理。氯的电极电位法测定1.实验原理Vitros氯试剂是一种干燥，多层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份，用直接电位法进行氯离子测试的干片。该干片由两个离子选择电极组成，每一电极含有保护层，银和氯化银层。保护层能阻止正常水平澳化物和尿酸的干扰。将一滴IOul