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1、动物实验基本技术1.实验动物的分组:分组原则:实验动物分组应严格按照随机分组的原则进行,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组中去,尽量避免人为因素对实验造成的影响。建立对照组:空白对照:指在对照组不加任1可处理的空白条件下进行观察、研究;实验对照:指在一定实验条件下所进行的观察、对比;标准对照:是以正常值或标准值作为对照,在所谓标准条件下进行观察的对照;自身对照:在观察的不同时期接受不同疗法,然后比较它们的差异,这种方法也称自身交叉对照;相互对照:各实验相互对照。2.目前实验动物学常用的标记编号方法有染色法、耳孔法、烙印法、挂牌法等。此外还有针刺法、断趾编号法、剪尾编号法、被毛剪号法、笼子
2、编号:去等。3常用的实验动物被毛去除方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法、脱毛法4种。4.实验动物的给药和采血:小鼠:给药方法:灌胃给药、注射给药【皮下注射给药、皮内注射给药、肌内注射给药、静脉注射给药、腹腔注射给药;采血:剪尾采血、摘除眼球采血、心脏采血、断头采血。大鼠:给药方法:灌胃给药、注射给药【皮下注射给药、皮内注射给药、肌内注射给药、静脉注射给药、腹腔注射给药;采血:剪尾采血、割尾静脉取血、眼眶静脉丛(窦)取血、摘除眼球采血、心脏采血、断头采血。5.实验动物麻醉方法:对实验动物进行麻醉的目的是,消除实验过程中引起的痛苦和不适,确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行。全身麻醉药:常用的包括非挥
3、发性和挥发性两大类,非挥发性麻醉药如戊巴比妥钠、异戊巴比妥钠、硫喷妥钠、乌拉坦、氯胺酮等,以及挥发性麻醉药入乙酶氯仿等。全身麻醉方法:有吸入麻醉法和注射麻醉法两种途径,吸入麻醉法用挥发性麻醉药,注射麻醉法用非挥发性麻醉药。其中,麻醉药经呼吸道吸入而产生麻醉者称吸入麻醉法,动物实验大都采用开放吸入法。而注射麻醉法,在动物实验中比较常用,麻醉药物中使用频率最高的是戊巴比妥钠;家兔、猫、犬、猴等实验动物常用腹腔注射或静脉注射戊巴比妥钠进行全麻,啮齿类实验动物则仅用腹腔注射戊巴比妥钠麻醉。局部麻醉药物:常用的有普鲁卡因、丁卡因等。局麻方法:表面麻醉:主要用于局部黏膜麻醉,常用药物为2%盐酸丁卡因溶液;
4、局部浸润麻醉:主要用于手术切口等麻醉,使用药物为05%-1.0%盐酸普鲁卡因溶液。6.实验动物的病例剖检:(详见P207)基本要求:实验动物背景资料记录、体表检查、病理取材基本要求;病理剖检基本操作:常用器械及使用方法:解剖刀、手术剪、血管钳、手术撮、拉钩;基本操作:切开、组织分离法、结扎、止血(纱布块压迫止血法、钳夹止血法、结扎止血法)。剖检取材程序:实验动物尸体的固定:通常为仰卧位固定;剖检顺序:多为先腹腔后胸腔,再脑、脊髓、骨髓、皮肤肌肉等,取材顺序基本与此相同;检查内容:位置、大小、色泽、附加物、质地、切面、中空、器官的黏膜面;剖检和取材程序:腹腔和腹腔器官、盆腔器官、胸腔口腔及其器官、颅腔及脑。7实验动物处死方法:颈椎脱臼处死法、断头处死法、击打头盖骨处死法、放血处死法、空气栓塞处死法、过量麻醉处死法、二氧化碳吸入法。