第23章血细胞分析仪的检测技术及临床应用.ppt

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1、一、血液的组成和功能:一、血液的组成和功能:红细胞(红细胞(RBC)(内含血红蛋白)(内含血红蛋白)血细胞分为血细胞分为3种种 白细胞(白细胞(WBC)(俗称血球)(俗称血球)血小板(血小板(PLT)三者在血液中的数量比约为三者在血液中的数量比约为RBC:WBC:PLT=500:1:30。(Granulocyte)嗜碱性粒细胞(嗜碱性粒细胞(Basophil)WBC又分为又分为 淋巴细胞(淋巴细胞(25%)(Lymphcyte)单核细胞(单核细胞(5%)(Monocyte)嗜中性粒细胞(嗜中性粒细胞(Neutrophil)粒细胞(粒细胞(75%)嗜酸性粒细胞(嗜酸性粒细胞(Eosinophil

2、)3 3、7 70 0 年年代代计计算算机机技技术术快快速速发发展展,将将血血小小板板计计数数的的繁繁琐琐手手续续(手手工工分分离离富富血血小小板板血血浆浆后后在在进进行行血血小小板板计计数数),改改进进为为血血小小板板与与红红细细胞胞同同时时计计数数。4 4、8 80 0 年年代代,发发展展迅迅速速,在在 8 8 项项检检测测基基础础上上加加上上红红细细胞胞指指数数、三三个个直直方方图图的的报报告告,不不仅仅提提供供是是否否贫贫血血,且且可可对对贫贫血血的的类类型型和和原原因因进进行行分分析析;而而且且血血小小板板参参数数对对止止血血和和血血栓栓疾疾病病的的诊诊断断及及一一些些疾疾病病的的疗

3、疗效效观观察察有有重重要要价价值值。不同年代血液细胞分析仪的检测参数 80年代 90年代白细胞白细胞 WBC WBCWBC WBC 五分群五分群 二分群、三分群二分群、三分群 二分群、三分群二分群、三分群红细胞红细胞 RBCRBC、HGBHGB、HCTHCT、MCV RBCMCV RBC、HGBHGB、HCTHCT、MCV MCV MCH MCH、MCHCMCHC、RDWRDW、HDW MCHHDW MCH、MCHCMCHC、RDWRDW、HDWHDW RET RET、HFRHFR、LFRLFR、MFRMFR血小板血小板 PLTPLT、MPVMPV、PCTPCT、PDW PLTPDW PLT、

4、MPVMPV、PCTPCT、PDWPDW 各种代号的意义各种代号的意义 WBC WBC 白细胞总数白细胞总数 PDW PDW 血小板体积分布宽度血小板体积分布宽度 RBC RBC 红细胞总数红细胞总数 PCT PCT 血小板比积血小板比积 HGB HGB 血红蛋白浓度血红蛋白浓度 HDW HDW 血红蛋白分布宽度血红蛋白分布宽度 HCT HCT 红细胞比积红细胞比积 RET RET 网织红细胞网织红细胞 MCV MCV 平均红细胞体积平均红细胞体积 HFR HFR 高高荧光强度网织红细胞荧光强度网织红细胞 MCH MCH 平均红细胞血红蛋白含量平均红细胞血红蛋白含量 MFR MFR 中中荧光强

5、度网织红细胞荧光强度网织红细胞 MCHC MCHC 平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度 LFR LFR 低低荧光强度网织红细胞荧光强度网织红细胞 RDW RDW 红细胞体积分布宽度红细胞体积分布宽度 MPV MPV 平均血小板体积平均血小板体积 PLT PLT 血小板总数血小板总数二、三分群血液分析仪的检测原理二、三分群血液分析仪的检测原理 电阻抗法血细胞计数:利用血细胞电阻抗法血细胞计数:利用血细胞通过微孔时通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。白细胞、。白细胞、红细胞的稀释标本在一个负压的控制下,分别通红细胞的稀释标本在一个负压的控制下,分别

6、通过各自的计数微孔,流入各自通道,然后通过两过各自的计数微孔,流入各自通道,然后通过两个光电传感器,将细胞信号甄别、放大、计数。个光电传感器,将细胞信号甄别、放大、计数。其原理示意图如下(图其原理示意图如下(图1 1):):图中阴影部分是稀释标本,稀释液是由图中阴影部分是稀释标本,稀释液是由NaClNaCl等导电物质组等导电物质组成的导电液,当图中所示恒流源起作用时,稀释液将和线路一成的导电液,当图中所示恒流源起作用时,稀释液将和线路一起组成一个回路,由于负压的作用,血细胞(不良导体)通过起组成一个回路,由于负压的作用,血细胞(不良导体)通过计数微孔时,稀释液被细胞代替,引起了阻抗的变化,从而

7、在计数微孔时,稀释液被细胞代替,引起了阻抗的变化,从而在测量线上产生了电脉冲(如上图),仪器就记录下此电脉冲的测量线上产生了电脉冲(如上图),仪器就记录下此电脉冲的数量及幅度(细胞的大小)数量及幅度(细胞的大小)(1 1)、微微孔孔管管:在在其其下下端端镶镶有有一一个个标标准准尺尺寸寸大大小小的的红红宝宝石石孔孔。R RB BC C管管道道孔孔径径:8 80 0 微微米米;W WB BC C 管管道道孔孔径径:1 10 00 0 微微米米。易易堵堵塞塞,防防止止堵堵孔孔和和维维护护。(2 2)、微微粒粒计计数数:细细胞胞以以外外的的杂杂质质将将被被误误认认为为细细胞胞。保保证证稀稀释释液液的的

8、质质量量和和环环境境的的洁洁净净。(3 3)、细细胞胞可可相相互互重重叠叠通通过过微微孔孔,产产生生偏偏差差:血血样样要要充充分分稀稀释释 W WB BC C 1 1:4 45 50 0,R RB BC C 1 1:6 62 20 05 5,设设计计上上要要有有纠纠正正偏偏差差的的技技术术。(4)、细胞和杂质的鉴别计数:白细胞体积:)、细胞和杂质的鉴别计数:白细胞体积:1201000fl,红细胞体积:红细胞体积:8298fl,血小板体积:,血小板体积:230fl。依照脉冲和。依照脉冲和细胞成比例的关系,设置不同的阈值电位(门限),对同一细胞成比例的关系,设置不同的阈值电位(门限),对同一杯稀释

9、液中细胞成分的电脉冲高低分别计数,并对杂质和细杯稀释液中细胞成分的电脉冲高低分别计数,并对杂质和细胞碎片进行剔除。因白细胞和红细胞的体积大小之间有交叉,胞碎片进行剔除。因白细胞和红细胞的体积大小之间有交叉,故红细胞要用白细胞故红细胞要用白细胞225倍的稀释标本,分别测量。倍的稀释标本,分别测量。1 1、直方图的产生:直方图的产生:直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得到,是反映细胞大小异质性的资料。如图(图到,是反映细胞大小异质性的资料。如图(图 2 2)所示,)所示,左图是示波器显示所分析细胞的脉冲大小,右图是相应的左图是示波器显示所分析细胞

10、的脉冲大小,右图是相应的体积分布直方图。体积分布直方图。淋巴细胞:淋巴细胞:353595fl95fl;中间细胞:中间细胞:9595130fl130fl;粒细胞粒细胞 130fl130fl 依照三群细胞在白细胞体积分布的直方图上所分布区依照三群细胞在白细胞体积分布的直方图上所分布区域的面积,计算得出每群细胞的百分比,并依照白细胞域的面积,计算得出每群细胞的百分比,并依照白细胞计数计数总数,求得每群细胞的绝对值。总数,求得每群细胞的绝对值。红细胞通过微孔时,形成的相应大小的脉冲,将脉冲的高红细胞通过微孔时,形成的相应大小的脉冲,将脉冲的高度叠加,经换算可得红细胞的比积。有的仪器先以单个细胞高度叠加

11、,经换算可得红细胞的比积。有的仪器先以单个细胞高度计算红细胞平均体积,再乘以红细胞数,得出红细胞比积。度计算红细胞平均体积,再乘以红细胞数,得出红细胞比积。阻抗法血液分析仪各项参数测试原理,如图(图阻抗法血液分析仪各项参数测试原理,如图(图 4 4)三、三、检测参数的代号及临床意义:检测参数的代号及临床意义:1 1 白细胞计数(白细胞计数(WBCWBC):):4.4.0 01010.0 010109 9/L/L(G/LG/L)静脉血比毛细血管血静脉血比毛细血管血 WBCWBC 数略低。数略低。2 2 白细胞“三分群(类)”:白细胞“三分群(类)”:淋巴细胞群(淋巴细胞群(LYMLYM):绝对值

12、):绝对值 1.01.03.3G/L3.3G/L,18.718.747%47%。中间细胞群(中间细胞群(MIDMID):绝对值):绝对值 0.20.20.7G/L0.7G/L,3.53.57.9%7.9%粒细胞群(粒细胞群(GRANGRAN):绝对值):绝对值 1.81.86.4G/L6.4G/L,464676.5%76.5%3 3 红细胞计数(红细胞计数(RBCRBC):):男:男:4.04.05.55.510101212/L(T/L)/L(T/L)女:女:3.53.55.05.010101212/L(T/L)/L(T/L)4 4 血红蛋白(血红蛋白(HGBHGB):):男:男:120120

13、170g/L170g/L 女:女:110110155g/L155g/L 5 5 红细胞比积(红细胞比积(HCTHCT):):男男:0.400.400.500.50 女女:0.350.350.450.45 6 6 红细胞的三项平均指数:红细胞的三项平均指数:红细胞平均体积(红细胞平均体积(MCVMCV):):828295fl95fl 红细胞平均血红蛋白量(红细胞平均血红蛋白量(MCHMCH):):272730Pg30Pg 红细胞平均血红蛋白浓度红细胞平均血红蛋白浓度(MCHMCHC C):):320320360g/L360g/L 7 7 红细胞分布宽度(红细胞分布宽度(RDWRDW):):15%

14、15%。它是由红细胞体积的变异系数表示,比红细胞大小不它是由红细胞体积的变异系数表示,比红细胞大小不均的观察更为客观准确。其增大的临床意义:均的观察更为客观准确。其增大的临床意义:(1 1)用于用于 IDAIDA 诊断与疗效观察:诊断与疗效观察:IDAIDA 时,升高。时,升高。当当 MCVMCV 正正常时,常时,RDWRDW 增大为早期缺铁的指征,补铁后,增大为早期缺铁的指征,补铁后,RDWRDW 正常。正常。(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断:用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断:IDA IDA 时时RDWRDW升高,而轻型地中海贫血时,升高,而轻型地中海贫血时,RDWRDW正常。正常。(

15、3)对贫血分类(对贫血分类(Bessmanff分类法):将分类法):将MCV与与RDW结合对贫血分类更完善。结合对贫血分类更完善。MCVMCV RDWRDW IDAIDA 巨幼贫巨幼贫 溶贫溶贫 铁粒幼贫血铁粒幼贫血 再障再障 单纯小细胞性贫血单纯小细胞性贫血 8 8 血小板计数(血小板计数(PLTPLT):):10010030030010109 9/L/L(G/LG/L)9 9 血小板平均体积(血小板平均体积(MPVMPV):):9.49.412.5fl12.5fl MPV MPV 应与应与 PLTPLT 相结合进行分析。相结合进行分析。(1 1)鉴别血小板减少的原因:鉴别血小板减少的原因:

16、【1 1】骨髓造血功能损伤时,骨髓造血功能损伤时,PLTPLT,MPVMPV;【2 2】血小板在周围血中破坏增多时,血小板在周围血中破坏增多时,PLTPLT,MPVMPV;【3 3】血小板分布异常时,血小板分布异常时,PLTPLT,MPVMPV 正常。正常。MPV MPV 作为骨髓造血功能恢复的早期指征:骨髓造血功作为骨髓造血功能恢复的早期指征:骨髓造血功能衰竭时,能衰竭时,MPVMPV 与与 PLTPLT 同时持续下降,造血功能抑制越严同时持续下降,造血功能抑制越严重,重,MPVMPV 越小;当造血功能恢复时,越小;当造血功能恢复时,MPVMPV 增大先于增大先于 PLTPLT 的的升高。升高。其它:其它:MPVMPV 增大见于:骨髓纤维化、增大见于:骨髓纤维化、ITPITP、血栓性疾病、血栓性疾病、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症。脾切除、慢粒、巨大血小板综合症。MPVMPV 减小见于:脾亢、化疗后、再障、巨幼贫。减小见于:脾亢、化疗后、再障、巨幼贫。10 10 血小板比积(血小板比积(PCTPCT):):男:男:1.081.082.72mL/L2.72mL/L 女:女:1.141.

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