病的实验室检测及其意义名师编辑PPT课件.ppt

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1、性病的实验室检测及其意义性病的实验室检测及其意义 淋病的实验室诊断淋病的实验室诊断 淋病的主要实验室诊断方法淋病的主要实验室诊断方法 直接显微镜检查；直接显微镜检查；分离培养淋球菌；分离培养淋球菌；非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原 或或DNADNA（EIA,PCR/LCREIA,PCR/LCR）显微镜检查的临床意义显微镜检查的临床意义 男性尿道标本男性尿道标本:多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌具诊断价值具诊断价值 敏感性及特异性：敏感性及特异性：95%99%宫颈标本、无症状男性尿道标本宫颈标本、无症状男性尿道标

2、本 敏感性：敏感性：4070%不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。感染。如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需进一步培养确认。双球菌，需进一步培养确认。淋球菌培养淋球菌培养n培养法为诊断淋病的金标准。培养法为诊断淋病的金标准。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。n初步鉴定淋球菌的主要依据初步鉴定淋球菌的主要依据 菌落特征菌落特征 氧化酶试验氧化酶试验 革兰染色革兰染色淋球菌培养的的临床意义淋球菌培养的的临床意义 n培养特异性：培养特异性：100%

3、，敏感性，敏感性 81-100%。n宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等应做淋球菌培养应做淋球菌培养n可发现无症状淋球菌感染患者；可发现无症状淋球菌感染患者；n可用于进一步作药敏试验；可用于进一步作药敏试验；n可用于治疗后的判愈试验。可用于治疗后的判愈试验。淋病其它诊断技术淋病其它诊断技术核酸检测的特点及临床意义核酸检测的特点及临床意义 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件；不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件；敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用尿液、阴道标本；尿液、阴道标本；不能进行抗生

4、素敏感性试验；不能进行抗生素敏感性试验；用于判愈试验需在治疗后至少用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行周以上进行.沙眼衣原体感染的实验室诊断沙眼衣原体感染的实验室诊断 细胞培养法细胞培养法 免疫层析快速抗原检测免疫层析快速抗原检测 酶联免疫抗原检测酶联免疫抗原检测 核酸扩增检测核酸扩增检测衣原体培养的临床意义衣原体培养的临床意义 敏感性敏感性70708080 特异性特异性100100 可用于判愈可用于判愈 可用于确诊可用于确诊 缺点缺点 费时（需费时（需3 35 5天），费力，技术要求高天），费力，技术要求高 不宜作为临床常规检查不宜作为临床常规检查 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查不宜

5、用于大规模的筛查和流行病学调查衣原体抗原快速检测的临床意义衣原体抗原快速检测的临床意义优点：优点：简易，方便，快速，尤其简易，方便，快速，尤其适用于基层单位适用于基层单位宫颈标本宫颈标本阴道标本阴道标本敏感性敏感性50%33%特异性特异性98%99%缺点：缺点：标本中需要足够数量的沙眼衣标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果原体抗原，否则有假阴性结果现有的核酸检测方法现有的核酸检测方法 PCR PCR LCR LCR SDA SDA TMA TMA Real time PCRReal time PCR衣原体核酸检测衣原体核酸检测优优 点点:敏感性：敏感性：-98-98 特异性特异

6、性:-99:-99 缺缺 点：点：实验室条件和技术要求高实验室条件和技术要求高 成本高、费时、假阳性成本高、费时、假阳性衣原体核酸检测的临床意义衣原体核酸检测的临床意义 生殖器疱疹实验室诊断生殖器疱疹实验室诊断HSV实验室诊断的意义实验室诊断的意义 临床诊断的准确性：临床诊断的准确性：50%70%，通过实验室检测手段，通过实验室检测手段可帮助诊断可帮助诊断 亚临床感染亚临床感染:孕妇、性伴的检测等孕妇、性伴的检测等进行进行HSV分型的意义分型的意义 HSV-2是该病的主要病原体，是该病的主要病原体，HSV-1约占该病的约占该病的30%两型两型HSV感染的预后不同感染的预后不同生殖器疱疹实验室诊

7、断方法生殖器疱疹实验室诊断方法病原学诊断病原学诊断 病毒检测病毒检测 抗原检测抗原检测 DNA检测检测血清学检测血清学检测-抗体检测抗体检测 HSV血清学检测的意义血清学检测的意义nHSVHSV感染的血清流行病学调查感染的血清流行病学调查n感染者性伴的感染者性伴的HSVHSV感染状况的判断感染状况的判断n孕妇产前监测孕妇产前监测 HSVHSV型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症状生殖器状生殖器HSVHSV感染者的最可行手段，对于防止性伴间感染者的最可行手段，对于防止性伴间和母婴间和母婴间HSVHSV传播有着重要意义传播有着重要意义HPV-DNA检测的意义

8、检测的意义nHPVHPV感染流行病学调查感染流行病学调查nHPV DNA定型定型 高危型高危型HPV病毒负荷的增加可使病毒负荷的增加可使女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加 梅毒实验室监测及临床意义梅毒实验室监测及临床意义 梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)，是一种小而纤细的，是一种小而纤细的螺旋状微生物，长螺旋状微生物，长515 m，直径约，直径约0.2 m，活体，活体平均有平均有814个规则的螺旋。个规则的螺旋。梅毒螺旋体透明而不

9、易被染色，在普通显微镜梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光或或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到镀银染色等特殊染色下才能观察到。梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死亡，其生存最适温度为亡，其生存最适温度为37。煮沸、干燥、肥。煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。梅毒螺旋体不耐热，加热至梅毒螺旋体不耐热，加热至42 2个小时可将个小时可将它杀死，它杀死，100时立即死亡；但耐低温，在时立即死亡；但耐低温，在0时

10、可存活时可存活48小时，置于小时，置于-78数年仍具有传染数年仍具有传染性。性。梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生长繁殖，用于抗原制备和实验研究。长繁殖，用于抗原制备和实验研究。梅毒螺旋体传代时间为梅毒螺旋体传代时间为3033小时，繁殖方式主小时，繁殖方式主要为横断分裂。要为横断分裂。1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。梅毒实验室检测的特点梅毒实验室检测的特点病原学检测病原学检测血清学检测血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清学检测非梅毒螺旋

11、体抗原血清学检测梅毒螺旋体抗原血清学检测梅毒螺旋体抗原血清学检测暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查VDRLFTA-ABS银染色镜检银染色镜检USRTPPA/APHA核酸检测核酸检测RPRELISATRUST发光法发光法 胶体金法胶体金法不同原理的方法：检测策略不同原理的方法：检测策略临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 原理原理 暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系暗视野映光检查是采

12、用一个特殊的聚光器，分为干系和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断的价值。的价值。梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 材料材料 暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、

13、暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、注射针头、无菌等渗盐水。注射针头、无菌等渗盐水。梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为1.01.01.2mm1.2mm）上滴加）上滴加5050100L100L盐水备用。然后用棉拭子盐水备用。然后用棉拭子取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀，避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀，

14、加盖玻片置暗视野显微镜下检查。加盖玻片置暗视野显微镜下检查。梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用无菌干棉球淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用无菌干棉球擦干。用擦干。用1mL1mL无菌注射器配无菌注射器配1212号针头，吸取无菌等渗号针头，吸取无菌等渗盐水盐水0.250.250.5mL0.5mL，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，反复水，再吸入注射器内，反复2 23 3次后，取少量淋巴次后，取少量淋巴液于载玻片上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查液于载玻片上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查 梅毒螺旋体暗视

15、野检查梅毒螺旋体暗视野检查 方法方法 在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加一滴甘油缓冲液（甘油和一滴甘油缓冲液（甘油和0.1mol/L PBS0.1mol/L PBS，pH 7.0pH 7.0按按7:37:3配制）。配制）。载玻片置载物台上，上升聚光器使甘油缓冲液接触载玻片置载物台上，上升聚光器使甘油缓冲液接触载玻片，先用载玻片，先用1010倍物镜，使物像清晰，再用倍物镜，使物像清晰，再用4040倍物倍物镜观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体镜观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解

16、释结果及解释 暗视野显微镜下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光暗视野显微镜下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光,其其螺旋较密而均匀。运动规律，运动性较强，其运动螺旋较密而均匀。运动规律，运动性较强，其运动方式包括旋转式，围绕其长轴旋转；蛇行式方式包括旋转式，围绕其长轴旋转；蛇行式,全全身弯曲如蛇行；伸缩其螺旋间距离而移动。观察身弯曲如蛇行；伸缩其螺旋间距离而移动。观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解释结果及解释 未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断，阴性结果可能未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断，阴性结果可能说明：说明：螺旋体数量不足螺旋体数量不足(单次暗视野显微镜检查阳单次暗视野显微镜检查阳性率小于性率小于50%)。患者已接受抗生素或杀灭梅毒螺患者已接受抗生素或杀灭梅毒螺旋体的药物治疗。旋体的药物治疗。损害接近自然消退。损害接近自然消退。损害不损害不是梅毒。是梅毒。梅毒实验室检测的特点梅毒实验室检测的特点 临床表现临床表现 取材部位取材部位 检查方法检查方法一期梅毒一期梅毒 溃疡溃疡 淋巴结淋巴结 病原学检查病原学检