离体模拟消化实验的测定.docx

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离体模拟消化实验的测定离体模拟消化程序采用胃蛋白BS-胰酶两步消化法。样品干物质和粗蛋白分别参照GB/T6435-2014和GB/T6432-2018胃消化阶段：准确称取0.5-LOg试样（40目），置于三角瓶中，准确加入0.2molLPH=6.0磷酸缓冲溶液15mL,0.2molL盐酸溶液IOmL,新鲜胃蛋白酶溶液（4OmgmL）lmL,0.5%氯霉素溶液0.5mL,用ImOl/L盐酸调节溶液调节pH=2.0,封口，在40恒温摇床120rmin震荡4h。小肠消化阶段：待胃消化阶段结束以后，向食糜中加入0.2moLLpH=68磷酸缓冲溶液10mL,0.6molL氢氧化钠溶液5mL,新鲜胰酶溶液（80mgmL）1mL,用ImoI/L氢氧化钠溶液调节溶液调节pH=6.8,封口，在40恒温摇床120rmin震荡4h小肠消化阶段结束以后，向食糜中加入5mL20%磺基水杨酸溶液，静止30min,然后将所有食糜转移至滤纸过滤，温水冲洗残渣，105C烘干残渣至恒重，测定干物质和粗蛋白的含量。根据样品及其消化残渣中的干物质和粗蛋白含量，分别计算干物质体外消化率和粗蛋白体外消化率。公式：干物质体外消化率妒（样品干物质-消化残渣干物质）/样品干物质XlO0%粗蛋白体外消化率妒（样品粗蛋白含量X称样量-残渣粗蛋白含量X残渣量）/（样品粗蛋白含量X称样量）100%