高等生理.ppt

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1、Lack of miRNA misregulation at early pathological stages in Drosophila neurodegenerative disease models 小组成员introduction 迟发型人类神经退化疾病的特征是神经元的紊乱、退化、组织特异性神经元的丢失。它们包括的疾病如老年痴呆症或者是帕金森综合症并且大多数的病症呈现更底的发生率如小脑萎缩症和额颞叶变性。在神经退化性疾病中在神经退化性疾病中miRNAmiRNA最近被确最近被确定起主要的作用。定起主要的作用。在这篇文章中，我们是在果蝇模型相关的七个不同的神经退化性疾病中处理这些问题的。

2、在这篇文在这篇文章中，我章中，我们是在果们是在果蝇模型相蝇模型相关的七个关的七个不同的神不同的神经退化性经退化性疾病中处疾病中处理这些问理这些问题的。题的。MATERIALS AND METHODS 1、果蝇的培养及处、果蝇的培养及处理理果蝇系的果蝇系的选取及其选取及其培养培养果蝇的液氮冻果蝇的液氮冻存处理存处理2、RNA的提取分离的提取分离冻存冻存果蝇果蝇果蝇果蝇头部头部裂解裂解D管管By sieving果蝇果蝇体部体部裂解矩阵珠1 ml qiazol用用匀匀浆浆机机磨磨碎碎4C离心离心10min上清液上清液对照取上清液 加三氯甲烷溶解RNA的提取分离的提取分离RNARNA3.测序和数据分析

3、测序和数据分析4、蛋白质印迹（、蛋白质印迹（western blotting）5、实时含量测定（、实时含量测定（REAL-TIME QUANTITATIVE RTPCR）1、应用果蝇模型在早期疾病阶段研究一代的、应用果蝇模型在早期疾病阶段研究一代的mRNA的数据分析的数据分析应用快速引诱应用快速引诱TDP-43表达，在控制条件下，从果蝇头表达，在控制条件下，从果蝇头部得到了蛋白提取物，应用部得到了蛋白提取物，应用Western blot分析，人类分析，人类表达基因在表达基因在57KDa中表达，而在中表达，而在43KDa中没有表达。中没有表达。resultsATXN3的长度扩增的毒副性试验。加入

4、的长度扩增的毒副性试验。加入RU486引诱引诱获得获得ATXN3-Q70蛋白，使多数果蝇的寿命明显减少，蛋白，使多数果蝇的寿命明显减少，存活率有存活率有50天到天到35天。加入天。加入RU486引诱获得引诱获得ATXN3-Q19蛋白，使多数果蝇的寿命无明显减少。蛋白，使多数果蝇的寿命无明显减少。ATXN1的长度扩增的毒副性试验。加入的长度扩增的毒副性试验。加入RU486引引诱获得诱获得ATXN3-Q82蛋白，使多数果蝇的寿命明显蛋白，使多数果蝇的寿命明显减少，存活率有减少，存活率有45天到天到28天。天。2、应用、应用SCAs模型对模型对miRNA数据分析数据分析A图可看出，正常阅读区的相关图

5、可看出，正常阅读区的相关性性,无诱导剂入下，总蛋白中数无诱导剂入下，总蛋白中数的分布和的分布和ATXN1-82Q蛋白的分布蛋白的分布呈线性相关。呈线性相关。B图，相关性系数，出图，相关性系数，出一组在一组在0.99以下外，其以下外，其他相关都在他相关都在0.99以上。以上。由图可得，左边是头部表达大于在全身的基因编由图可得，左边是头部表达大于在全身的基因编码，右边的基因变大多数是全身性表达。码，右边的基因变大多数是全身性表达。3、应用、应用PD模型对模型对miRNA的数据分析的数据分析重复性的基因在杀虫剂的存在下，并表达没有太大的变化。并重复性的基因在杀虫剂的存在下，并表达没有太大的变化。并且

6、相比起上两种模型，此模型使果蝇大量死亡。此模型中模拟且相比起上两种模型，此模型使果蝇大量死亡。此模型中模拟了帕金森综合症。了帕金森综合症。DISCUSSIONDISCUSSION在这项研究中，我们应用了几种果蝇的神经退行在这项研究中，我们应用了几种果蝇的神经退行性病变模型，以观察毒性蛋白表达后，性病变模型，以观察毒性蛋白表达后，miRNA是是否会表达错误。否会表达错误。However,no statistical significant variations in miRNA expression were observed in any of the cases.尽管多数相关蛋白不会在尽管多数相关蛋白不会在miRNA改变了后表改变了后表现破坏性伤害，相关蛋白却会诱导进行误转现破坏性伤害，相关蛋白却会诱导进行误转录录。