KJWI-QA-24 培养基配制 .docx

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1、文件修改记录版本数修次修订日期修订内容002011-02-14A12012-05-25修订A22013-07-25增加6.9营养琼脂分发号：（仅适用于控制文件）（仅盖有红色印章的文件才有效）1.O目的规定了培养基配制的基本要求及方法。2.0范围适用于大肠菌群、细菌总数、霉菌及酵母菌检测时用培养基配制。3.0术语无4.0职责微生物检验员负责对培养基的正确配制。5. O工作流程图无6. O内容及要求6.1 乳糖胆盐发酵培养基6.1.1 用途：用于测定大肠菌群的乳糖发酵实验；6.1.2成分（gl）：蛋白陈（20g）、乳糖（IOg）、猪胆盐（5g）、漠甲酚紫（0.01g）；6.1.3配制方法：称取乳糖

2、胆盐发酵培养基35g,加入100Oml蒸t水中，加热煮沸溶解，分装于有倒立发酵管的试管中，115C高压灭菌15Inin,备用；6.1.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.1.5储存条件：常温、密封、干燥处。6.2平板计数琼脂6.2.1用途：用于细菌总数测定；6.2.2成分（gl）：胰蛋白陈（5g）、酵母浸粉（2.5g）、葡萄糖（Ig）、琼脂（15g）；6.2.3 配制方法:称取本品23.5g,加入100OnIl蒸馈水中,加热煮沸溶解，分装，121高压灭菌15min后备用；6.2.4 注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.2.5储存条件：常温、

3、密封、干燥处。6.3月桂基硫酸盐胰蛋白陈（LST）肉汤6.3.1用途：用于大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠菌群的初发酵试验及大肠杆菌（MPN）计数；6.3.2成分（gl）：胰蛋白腺（20g）、月桂基硫酸钠（0.1g）、乳糖（5g）、硫酸氢二钾（2.75g）氯化钠（5g）、磷酸二氢钾（2.75g）；6.3.3配制方法:称取本品35.6g,加入100OmI蒸馄水中，加热煮沸溶解，分装到有玻璃小导管的试管中，每管IOmI,121高压灭菌15Inin后备用；6.3.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6. 3.5储存条件：常温、密封、干燥处。6.4煌绿乳糖胆盐肉汤6. 4.1用途：用

4、于大肠菌群复发酵试验，（MPN）计数及证实试验。7. 4.2成分：蛋白陈10g,牛胆粉20g,乳糖10g,煌绿0.0133g.8. 4.3配制方法：称取本品40克，加入100OML蒸馈水中，加热煮沸溶解，分装到有玻璃小导管的试管中，每管IomI,121C高压灭菌15Inin后备用；9. 4.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6. 4.5储存条件：常温、密封、干燥处。7. 5EC肉汤7.1.1 用途：用于大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠菌群的初发酵试验及大肠杆菌（MPN）计数；7.1.2 成分：胰蛋白陈（20g）、三号胆盐（1.5g）、乳糖（5g）、硫酸氢二钾（4g）、氯化钠

5、（5g）、磷酸二氢钾（1.5g）；6.5.3配制方法：称取本品37克，加入100OML蒸储水中，加热煮沸溶解,分装到有玻璃小导管的试管中，每管8mL121C高压灭菌15min后备用；6.5.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.5.5储存条件：常温、密封、干燥处。6.6.1用途：用于霉菌及酵母菌的计数；6.6.2成分：蛋白陈（5g）、磷酸二氢钾（Ig）、葡萄糖（IOg）、孟加拉红（虎红）（0.033g）、硫酸美（0.5g）、琼脂（18.5g）、氯霉素（0.1g）；6.6.3配制方法：称取本品35克，加入100OML蒸锵水中，加热煮沸溶解，分装，121高压灭菌,20mi

6、n后备用；6.6.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.6.5储存条件：常温、密封、干燥处。6.7结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）6.7.1用途：用于大肠菌群的固体平板检测；6.7.2成分：蛋白陈（7g）、酵母浸膏粉（3g）、氯化钠（5g）、中性红（0.03g）、胆盐（1.5g）、结晶紫（0.002g）s乳糖（IOg）琼脂（15g）；6.7.3配制方法：称取本品41.5克，加入100OML蒸镭水中，静止儿分钟，充分搅拌，溶解、煮沸灭菌2分钟，将培养基冷却至45-50倾注灭菌平皿；6.7.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.7.5储存条件：常

7、温、密封、干燥处。6.8伊红美蓝琼脂6.8.1用途：用于肠道致病菌的分离，亦可用于大肠埃希氏菌和产气杆菌的分离和鉴别；6.8.2成分：豚（IOg）牛肉浸粉（3g）、氯化钠（5g）、曙红钠（0.4g）、亚甲蓝（0.065g）、乳糖（IOg）琼脂（14g）；6.8.3配制方法：称取本品42.5克，加入100OML蒸储水中，加热煮沸溶解，分装，12Ie高压灭菌,20min后备用；6.8.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。6.8.5储存条件：常温、密封、干燥处。6.9.1用途：用于细菌总数测定、保存菌总及细菌纯化培养6.9.2成分（gL）：蛋白豚IOg氯化钠5g牛肉膏粉3g琼脂15g6. 9.3配制方法：称取本品33克，加入100OmI蒸馄水中，加热煮沸溶解，分装，121C高压灭菌15分钟备用；7. 9.4注意事项：灭菌后应在无菌环境下操作，出现结块严禁继续使用。8. 0相关文件无9. 0质量记录表单8.1KJWIF-QA-69培养基配制使用记录表