KJWI-QA-24 培养基配制 .docx

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1、文件修改记录版本数修次修订日期修订内容002011-02-14A12012-05-25修订A22013-07-25增加6.9营养琼脂分发号:(仅适用于控制文件)(仅盖有红色印章的文件才有效)1.O目的规定了培养基配制的基本要求及方法。2.0范围适用于大肠菌群、细菌总数、霉菌及酵母菌检测时用培养基配制。3.0术语无4.0职责微生物检验员负责对培养基的正确配制。5. O工作流程图无6. O内容及要求6.1 乳糖胆盐发酵培养基6.1.1 用途:用于测定大肠菌群的乳糖发酵实验;6.1.2成分(gl):蛋白陈(20g)、乳糖(IOg)、猪胆盐(5g)、漠甲酚紫(0.01g);6.1.3配制方法:称取乳糖

2、胆盐发酵培养基35g,加入100Oml蒸t水中,加热煮沸溶解,分装于有倒立发酵管的试管中,115C高压灭菌15Inin,备用;6.1.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.1.5储存条件:常温、密封、干燥处。6.2平板计数琼脂6.2.1用途:用于细菌总数测定;6.2.2成分(gl):胰蛋白陈(5g)、酵母浸粉(2.5g)、葡萄糖(Ig)、琼脂(15g);6.2.3 配制方法:称取本品23.5g,加入100OnIl蒸馈水中,加热煮沸溶解,分装,121高压灭菌15min后备用;6.2.4 注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.2.5储存条件:常温、

3、密封、干燥处。6.3月桂基硫酸盐胰蛋白陈(LST)肉汤6.3.1用途:用于大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠菌群的初发酵试验及大肠杆菌(MPN)计数;6.3.2成分(gl):胰蛋白腺(20g)、月桂基硫酸钠(0.1g)、乳糖(5g)、硫酸氢二钾(2.75g)氯化钠(5g)、磷酸二氢钾(2.75g);6.3.3配制方法:称取本品35.6g,加入100OmI蒸馄水中,加热煮沸溶解,分装到有玻璃小导管的试管中,每管IOmI,121高压灭菌15Inin后备用;6.3.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6. 3.5储存条件:常温、密封、干燥处。6.4煌绿乳糖胆盐肉汤6. 4.1用途:用

4、于大肠菌群复发酵试验,(MPN)计数及证实试验。7. 4.2成分:蛋白陈10g,牛胆粉20g,乳糖10g,煌绿0.0133g.8. 4.3配制方法:称取本品40克,加入100OML蒸馈水中,加热煮沸溶解,分装到有玻璃小导管的试管中,每管IomI,121C高压灭菌15Inin后备用;9. 4.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6. 4.5储存条件:常温、密封、干燥处。7. 5EC肉汤7.1.1 用途:用于大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠菌群的初发酵试验及大肠杆菌(MPN)计数;7.1.2 成分:胰蛋白陈(20g)、三号胆盐(1.5g)、乳糖(5g)、硫酸氢二钾(4g)、氯化钠

5、(5g)、磷酸二氢钾(1.5g);6.5.3配制方法:称取本品37克,加入100OML蒸储水中,加热煮沸溶解,分装到有玻璃小导管的试管中,每管8mL121C高压灭菌15min后备用;6.5.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.5.5储存条件:常温、密封、干燥处。6.6.1用途:用于霉菌及酵母菌的计数;6.6.2成分:蛋白陈(5g)、磷酸二氢钾(Ig)、葡萄糖(IOg)、孟加拉红(虎红)(0.033g)、硫酸美(0.5g)、琼脂(18.5g)、氯霉素(0.1g);6.6.3配制方法:称取本品35克,加入100OML蒸锵水中,加热煮沸溶解,分装,121高压灭菌,20mi

6、n后备用;6.6.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.6.5储存条件:常温、密封、干燥处。6.7结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)6.7.1用途:用于大肠菌群的固体平板检测;6.7.2成分:蛋白陈(7g)、酵母浸膏粉(3g)、氯化钠(5g)、中性红(0.03g)、胆盐(1.5g)、结晶紫(0.002g)s乳糖(IOg)琼脂(15g);6.7.3配制方法:称取本品41.5克,加入100OML蒸镭水中,静止儿分钟,充分搅拌,溶解、煮沸灭菌2分钟,将培养基冷却至45-50倾注灭菌平皿;6.7.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.7.5储存条件:常

7、温、密封、干燥处。6.8伊红美蓝琼脂6.8.1用途:用于肠道致病菌的分离,亦可用于大肠埃希氏菌和产气杆菌的分离和鉴别;6.8.2成分:豚(IOg)牛肉浸粉(3g)、氯化钠(5g)、曙红钠(0.4g)、亚甲蓝(0.065g)、乳糖(IOg)琼脂(14g);6.8.3配制方法:称取本品42.5克,加入100OML蒸储水中,加热煮沸溶解,分装,12Ie高压灭菌,20min后备用;6.8.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。6.8.5储存条件:常温、密封、干燥处。6.9.1用途:用于细菌总数测定、保存菌总及细菌纯化培养6.9.2成分(gL):蛋白豚IOg氯化钠5g牛肉膏粉3g琼脂15g6. 9.3配制方法:称取本品33克,加入100OmI蒸馄水中,加热煮沸溶解,分装,121C高压灭菌15分钟备用;7. 9.4注意事项:灭菌后应在无菌环境下操作,出现结块严禁继续使用。8. 0相关文件无9. 0质量记录表单8.1KJWIF-QA-69培养基配制使用记录表

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