血液细胞分离仪.ppt

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1、血液细胞分离仪血液细胞分离仪-机型COBE Spectra 6.1 PBSC(Peripheral Blood Stem Cell)COBE Spectra 7.0 LRS(Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet)COBE 2991 B.MFenwal CS-3000 PlusFenwal CS-3000 PlusCOBE SPECTRA 6.1,7.0COBE 2991血液细胞分离仪-kit、圆盘血液细胞分离仪-项目 WBC:1.MNC-DLI(Donor Lymphocyte Infusion)2.PMN-Therapeutic Leukocytopher

2、esis(pt)Granulocytapheresis(donor)3.AutoPBSC-Peripheral Blood Stem Cell 4.BMP-Bone Marrow ProcessingCOBE 2991机型TPE:Therapetic Plasma ExchangeELP:Therapetic Thrombocytapheresis(pt)Extended Life Platelet(donor)LRS:Leukocyte-Reduced Apheresis PlateletRBC:Therapetic Phlebotomy目前不用,以放血方式治疗PMN(Polymorphon

3、uclear Cell;多形核细胞)MNC(Mononuclear Cell;单核细胞)血液细胞分离仪-事前准备Pt/donor同意书医师声明书Pt/donor声明书会诊单抽血检验项目 血液常规检查(Blood Routine)、ABO血型、Rh血型、不规则抗体筛检、肝功能(ALT)、梅毒血清反应(VDRL)、C型肝炎病毒抗体(anti-HCV)、B型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、爱滋病毒抗体(HIV-I、HIV-II)、人类嗜T淋巴球病毒抗体(HTLV-I、HTLV-II)、游离钙(Free Ca)。执行收集的前几日,口服钙片、喝温牛奶以预防低血钙反应。按时前往,务必进食,但勿吃太油腻的食

4、物(如炸排骨、炸鸡腿,包括豆浆)。禁烟、尼古丁、咖啡(因会增加血管收缩)。血液细胞分离仪-原理 藉由各种血液成分比重不同的不同及利用不同的离心速度将血液分离,并利用光学透视原理测细胞之密度,即由献血人身上收集所需之血液成分或由病人身上收集或移除所需的血液成分,而将其余的血液成分经由血液分离机持续性的运转回输给病人或献血者。5 buffy coat(WBC、Lym、plt、stem cell)55 plasma45 RBC血液细胞分离仪-应用 执行各项稀有血液成分收集,提供临床病人输血需求可协助临床急症病人异常血液成分移除、减轻及避免立即性的生命威胁。血液细胞分离仪-符合条件WBC 3000 l

5、HB 9.0 mg/dlPlt 30,000 l血液细胞分离仪-勿错1.Kit2.圆盘3.步骤血液细胞分离-步骤装圆盘装Kit装saline、ACD(Anticoagulant Citrate Dextrose;抗凝剂)机器priming 排除空气Pt/donor携带病历报到 Pt/donor躺于病床或献血椅并盖好被子量血压、量体温机器priming ok扎针两手臂(血管粗access、return)或一中央静脉管(access)一手臂(return)确定扎针 ok机器RUN设置预设值随时注意access端之血量达到预设值量血压移除access端机器Rineback 将其余血液成分回输体内移除

6、return端卸除kit处理collect productsKitWBCTPEELPLRS项目DLI(Donor Lymphocyte Infusion)Therapeutic Leukocytopheresis(pt)Granulocytapheresis(donor)PBSC(Peripheral Blood Stem Cell)Therapetic Plasma ExchangeTherapetic Thrombocytapheresis(pt)Extended Life Platelet(donor)Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet步骤MNCPM

7、NDepletePMNColletAutoPBSCTPEELPDDepleteELPC ColletLRSEnd point5000 ml约4000ml约4000ml10000 mlCollet/replac volume130 ml700 ml250 ml50 ml 或依机器TBV 11.5倍700 ml300 ml300 mlPlasma volume0 ml60 mlTBV 11.5倍Time约2 hrs23 hrs34 hrs4 hrs34 hrs23 hrs约2 hrs约2 hrsIntel flow(ml/min)45554555455545554555455545554555In

8、tel:AC Ratio13.010.011.010.011.013.013.513.013.510.011.011.012.011.012.0血液细胞分离仪-产物检验项目DLI(Donor Lymphocyte Infusion)Therapeutic Leukocytopheresis(pt)Granulocytapheresis(donor)PBSC(Peripheral Blood Stem Cell)Therapetic Plasma ExchangeTherapetic Thrombocytapheresis(pt)Extended Life Platelet(donor)Leuk

9、ocyte-Reduced Apheresis PlateletWBCWBCWBCWBCPlateletPlateletPlateletWBCWBCWBCWBCPlateletPlateletPlateletLym-Surface makerWBCCBC+DCCD34+CFU-CBlood culturePlateletPlateletPlateletWBC 1106 lPRBC Priming对象 小小孩预防因收集后导致Hb 于RUN前用相同血型之2 PRBC先行Priming使kit中充满RBC,使小小孩减少RBC lossKit中大约130 ml的血量残留,会造成收集(移除)后Hb不变或

10、降低 血液细胞分离-过程可能之反应l血管损伤l血肿l血压降低l血量减少l过敏l溶血l空气栓塞l呼吸窘迫l淋巴球及血小板减少l蛋白质及免疫球蛋白减少l凝血因子减少l最常见的为因抗凝剂(ACD)造成而有低血钙的症状(如肢端、脸部麻感、肌肉震颤感、胸闷、心律不齐、休克)l需告知医师并立即处理发生低血钙时,怎么办?喝温牛奶Calcium Gluconate(葡萄糖钙)1.对水喝 1Amp(10ml):10ml water 2.第三条静脉注射 1Amp+90ml saline 以50ml/1hr滴速 3.正压pump 1Amp以5ml/1hr滴速PBSC 理想 collect products通常收集2

11、3次 达到 MNC 4 8 108/kg CD34+2.0 106/kg MNC:Mononuclear Cell CD34+:CD34阳性细胞 为Stem Cell之maker collect bag中MNC=Total WBC量 Total collect量 DC Pt体重 (扣除seg及band)CD34+以Flow cytometry检测 不可照光(照光-杀死Lymphocyte)PBSC冷冻自体移植异体移植Pt与donor时间无法配合时仪器:Planer kyro 560-16微电脑控制可程序冷冻仪 MVEXLC 1200自动充填液态氮存贮系统PBSC冷冻 PBSC冷冻2.置入Pla

12、ner kyro 560-16微电脑控制可程序冷冻仪开始+4慢慢以 -1.0/min to-8 -25.0/min to-50 +8.0/min to-20 -1.0/min to-60.0 -5.0/min to-120.0 3.再置入 MVEXLC 1200自动充填液态氮存贮系统存贮 可程序冷冻仪 自动充填液态氮存贮PBSC解冻、回输37 水浴用15滴的IV set(静脉输注器)慢慢回输5分钟 后再快速输完一袋10分钟输完一袋 快速输完,避免细胞解冻后DMSO因高温放出毒性毒杀细胞DMSO(细胞冷冻保护剂)DMSO与Plasma(protein)混合会放热而使Plasma变性,故Plasm

13、a在与DMSO混合前后均置于0冰水中降温,以防混合后的放热造成Plasma变性,因DMSO在0温度以上会对细胞产生毒性,因而毒杀细胞。GVHD(graft-vs-host disease;移植物抗宿主疾病)CD4+、CD8+Tcell引发在移植后23周发生急性:移植后830天 -皮肤(红疹及脱屑)、胆道(黄疸)、胃肠(严重腹泻)慢性:移植后100200天 -皮肤、肝、眼、口腔黏膜、其它器官GVHD(graft-vs-host disease;移植物抗宿主疾病)最后终因感染或肝、肾功能衰竭或DIC (Disseminated Intravascular Coagulation,散播性血管内凝固症)而死亡,死亡率高达7590 。预防方法移植前后给予免疫抑制剂cyclosporine,若仍发生GVHD则给予高剂量类固醇治疗。若移植后一直没有GVHD反应给DLI(Donor Lymphocyte Infusion)产生轻微GVHD癌症细胞才不易复发。感想受训之感想谢谢聆听!

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