乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作规程.docx

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1、乳酸脱氢酶(LDH)测定标准操作规程1.检验原理：(乳酸底物法)乳酸脱氢酶催化乳酸氧化生成丙酮酸，使氧化型辅酶I(24/T)还原为还原型辅酶I(NADH),引起34Onm处吸光度的增加，吸光度的增加速率与样品中乳酸脱氢酶活性成正比。1.-乳酸+NAD，乳酸脱氢陶丙酮酸+NADH+才2.试剂主要组成成分组成成分浓度RlTriS缓冲液1OOmmo1/LL-乳酸锂500mmolLR2TriS缓冲液1OOmmo1/LNAD+1.18mmolL明胶1%(V/V)TritonX-1000.5%(VV)3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225保存8小时，28保48小时,避免冰冻保存样本，以免破坏肝同工酶。样

2、本在低温保存时，建议加入NAO(10mgmL)或谷胱甘肽(3.Img/mL),避免LDH活性丧失。4.检验方法；仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5参考范围：样本参考范围(U/L)血清成年人109-2456.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用O.9%(WV)的氯化钠溶液稀释样本。7. 2.单位换算：ukatL=UL16.67IO-38. 检验结果的局限性8.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7 .2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度大于0.50时不能使用。8 .产品性能指标8.1 试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀物。8.

3、2装量：不低于标识值8.3试剂空白吸光度：在37、34Onm波长，光径ICnI时，空白吸光度AW0.50o8.4试剂空白吸光度变化率：在37、34Onm波长，光径ICm时，用生理盐水作为样品加入试剂测试时AminW0.002.8.5分析灵敏度:在340nm处，光径Icm时，测定已知浓度的样品换算成1U/L的乳酸脱氢酶时，吸光度变化4AULmin2LXi。8.4线性区间：试剂的线性区间为25-750UL,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)25T00UL区间内，线性绝对偏差不超过土10ULo100-750U/L区间内，线性相对偏差不超过10机8.7重复性：CV5%8.8批

4、间差:R10%8. 9准确度：相对偏差应不大于10机9. 8稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为18个月.取到期后一个月的试剂进行测试，应满足8.7、8.9的要求。10. 床意义：乳酸脱氢酶(LDH)是广泛分布于人体组织中的酶，特别在心脏、肝脏、肌肉和肾脏中。血清中的LDH基于电泳迁移率能分成5种同工酶，每种同工酶是一个不同亚单位组成的四聚体。LDH确认有二种亚单位，心脏（三）和肌肉(M)o按迁移率分成LDHI(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)和LDH5(M4)o已观察到多种疾病时，血清LDH水平升高，最高水平见于巨幼红细胞性贫血，癌症扩散和休克。中度增高出现于肌肉损伤、肾衰和肝硬化。LDH活性轻度增高已报告在心肌或肺梗死、白血病、溶血性贫血和非病毒性肝炎等病例中出现。