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1、沉降菌检测标准操作规程1方法概述:本测试方法采用沉降法,即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经若干时间,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室(区)的洁净度。2所用的仪器和设备2. 1高压消毒锅使用时应严格按照仪器说明书操作。2. 2恒温培养箱必须定期对培养箱的温度进行校验。2.3 培养皿一般采用90nX1511Hn的硼硅酸玻璃培养皿。2.4 普通肉汤琼脂培养基的准备及灭菌见附件A3测试步骤3. 1采样方法将已制备好的培养皿,按洁净室沉降菌采样点布置图的要求放置,打开培养皿盖,使培养基面暴露30分钟(
2、静态),再将培养皿盖盖上后倒置。3. 2培养32.1全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。3. 2.2在30。035。C培养箱中培养,时间不少于48h。4. 2.3每批培养基应有对照试验,检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。3.3菌落计数1. 3.1用肉眼直接计数,标记或在菌落计数器上点计,然后用5T0倍放大镜检查,看是否有遗漏。3. 3.2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。4注意事项3.1 测试用具要作灭菌处理,以确保测试的可靠性,准确性。4. 2采取一切措施防止人为对样本的污染。4.1 对培养基、培养条件及其他参数做详细
3、的记录。4.2 由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。4.3 采样前仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质,破损或污染的应剔除。5测试规则4.4 沉降菌检测前,被检测洁净室(区)的温湿度须达到规定的要求,静压差、换气次数、空气流速控制在规定值内。5.1.2沉降菌检测前,被检测洁净室(区)已经过消毒。5. 1.3测试状态有静态和动态两种,测试状态的选择必须符合生产的要求,并在报告中注明测试状态。5. 2测试人员5.2. 1测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。5.2.2静态测试时,室内测试人员不得多于二人。5. 3测试时间5.3. 1对单向流,测试应在净化空调系统运行不少于15min后开始。5.3.2对非单向流,测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。5.4沉降菌计数5.4.1采样点数目及其布置最少采样点数目如下表面积洁净度级别m2ABCD102-32-32210-20552220-50882250-100161652100-8C的环境中存放。6.2附件B:采样点布置洁净区采样点的布置力求均匀,避免采样点在某局部区域过于集中,某局部区域过于稀疏。