免疫球蛋白的检测与临床应用.pptx

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1、免疫球蛋白(Ig)是由浆细胞合成和分泌的一组具有抗体活性的蛋白质。由两条重链和两条轻链通过二硫键连接而构成。重链分为IgG,IgA,IgM,IgD,IgE.轻链分为(kappa),(Lambda)两个类别血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量测定方法一般有单向环状免疫扩散法,火箭免疫电泳法,ELISA,免疫比浊法,放射免疫分析法等,但临床常用单向环状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白含量。作为血清中最主要的抗体成分,约占人体血清中总免疫球蛋白含量的75%。是唯一能通过胎盘的Ig,IgG是血液和细胞外液中的主要抗体,也是机体再次免疫应答的主要抗体,大多数抗感染抗体与自身抗体都为IgG

2、 类。16岁以上成年人IgG临床参考范围为:6.016.0g/L在正常人血清中的含量仅次于IgG,占血清免疫球蛋白含量的1020%。新生儿血清中无IgA抗体,但可从母乳中获得分泌型IgA。分为血清型IgA和分泌型IgA:其中血清型IgA含量占总IgA的85%左右,虽然血清型IgA虽有IgG和IgM的某些功能,但在血清中并不显示重要的免疫功能。分泌型IgA存在于分泌液中,如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等。机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。故又称粘膜局部抗体。16岁以上成年人IgA临床参考范围为:0.763.9g/LIgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体,是机体抗感染的

3、先头部队,血清中检出IgM,提示新近发生感染,可用于感染的早期诊断。分泌型IgM为五聚体,是分子量最大的Ig,沉降系数为19S,称为巨球蛋白,一般不能通过血管壁,主要存在于血液中。16岁以上成年人IgG临床参考范围为:0.43.45g/L。慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎,原发性胆汁性肝硬化,隐匿性肝硬化患者血清中可见三种免疫球蛋白均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎,肺结核,血 IgG可升高,宫内感染时脐血或出生的新生儿血清中IgM含量可增高。有先天性和获得性两类,先天性低免疫球蛋白血症,主要见于体液免疫缺陷病和联合免疫缺陷病。另一种情况是3种Ig中缺1种或2种,如IgA缺乏患者,易发生反复呼吸道

4、感染;IgG缺乏患者,易发生化脓性感染;IgM缺乏患者,易发生革兰阴性菌败血症。获得性低Ig血症,血清中IgG常小于5 g/ L,引起原因较多,如大量蛋白流失的疾病(剥脱性皮炎、肠淋巴管扩张症和肾病综合征)、淋巴系统肿瘤(淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤)、中毒性骨髓疾病、长期使用免疫抑制剂等。正常人血清中IgD含量很低,仅占血清免疫球蛋白总量的0.2%。IgD可在个体发育的任何时间产生,半衰期2.8天。血清IgD的生物学功能尚不清楚,膜结合型IgD(mIgD)构成BCR,是B细胞分化发育成熟的标志,未成熟的B细胞仅表达mIgM,成熟B细胞可同时表达mIgM和mIgD,称为初始B细胞(native B

5、cell);活化的B细胞或记忆B细胞其表面的mIgD逐渐消失。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌。其重要特征为糖含量高达12%。IgE为亲细胞抗体,可引起I型超敏反应。此外,IgE可能与机体抗寄生虫免疫有关。(一)测定方法 IgD的测定方法有放射免疫分析法,乳胶颗粒免疫比浊分析法、酶联免疫吸附试验。在临床用得最多的是酶联免疫吸附试验测定IgD。(二)临床意义 目前IgD的生物功能尚未完全阐明,血清中IgD升高主要见于妊娠末期,IgD型骨髓瘤,甲状腺炎和大量吸烟。IgD降低见于原发性无丙种球蛋白血症、肺硅沉着病(矽肺)、细胞毒药物治疗后。(一)测定方法1

6、.总IgE的测定方法 有化学发光免疫分析法、放射免疫分析法、乳胶颗粒免疫比浊法及酶联免疫吸附试验等。在临床上用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附试验测定总IgE较为常见。2.特异性IgE的检测方法 主要有免疫斑点法和酶联免疫吸附试验。商品化的试剂盒提供了多种特异性的变应原,包括食物、吸入物以及药物过敏原,利用这些特异性变应原就可以检测血清中特异性IgE。(二)临床意义1.I型变态反应性疾病,如特发性哮喘、特发性皮炎、过敏性鼻炎等IgE常升高。2.非变态反应性疾病,如IgE骨髓瘤、寄生虫感染等IgE升高。3.急性或慢性肝炎、SLE、类风湿关节炎等疾病IgE可升高。4. IgE降低见于原发性无丙种球

7、蛋白血症、肿瘤及化疗药物应用后。与重链结合成免疫球蛋白的轻链称为结合轻链,未与重链结合的轻链称为游离轻链。游离轻链的量最终取决于B细胞的合成分泌与肾脏清除的动态平衡结果,临床上多种疾病都可导致血清中游离轻链浓度异常,例如:免疫抑制,自身免疫,肾脏清除率降低及浆细胞病等。游离轻链通过肾小球滤过而从血液中快速清除,然后被近端肾小管重吸收和分解,因此游离轻链的检测可以实时评估病情进展,研究表明大量的游离轻链可以被肾脏吸收,所以只有非常少的游离轻链逃过近端肾小管的重吸收,在正常的尿中含有极少量的游离轻链。本周氏蛋白血清蛋白电泳免疫固定电泳免疫比浊法检测游离轻链高敏感性:可达到5-10mg/L高特于性高

8、检测速率定量检测:可同时检测型和型轻链的水平以及两者的比值,有利于鉴别诊断和监测病情的变化型游离轻链或型游离轻链中某一个指标浓度异常增高和比值异常,常提示有单克隆类疾病,如多发性骨髓瘤,巨球蛋白血症,原发性淀粉样变性,轻链沉积病等。型或型游离轻链同时增高,可能原因有感染,肾功能受损或结缔组织类疾病。多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种浆细胞单克隆恶性增生性疾病, 其特征为由晚期B细胞分化的肿瘤性浆细胞分泌单克隆免疫球蛋白或重链, 并伴有溶骨性病变和/或骨质疏松。血常规血常规 大多数MM患者血红蛋白(hemoglobin, Hb)含量和红细胞(red blood cel

9、l, RBC)计数会有一定范围的降低, 大多数患者表现为正细胞正色素性贫血, 也有小部分出现小细胞低色素性贫血症状, 贫血程度会随着病情的进展逐渐加重。白细胞计数多正常, 但也可增高或降低。血小板计数早期正常或增高, 病情进展时可减少。外周血涂片成熟RBC的形态大致正常, 常见RBC重叠排列呈缗线状。白蛋白/球蛋白比值(A/G)在疾病初期, 大部分MM患者的球蛋白增高, 直接导致总蛋白明显增加, 白蛋白水平正常或降低。随着病情的进展, 肝细胞合成功能降低导致白蛋白生成降低, 且MM患者蛋白丢失增加, 摄入减少, 也会使白蛋白降低, 导致A/G倒置。肾功能检测 MM患者肾脏损害的发生由多种因素导

10、致, 其中骨髓瘤细胞所分泌的单克隆免疫球蛋白轻链在肾脏的沉积是导致MM肾病的主要原因。实验室检查特征表现为血尿素氮及肌酐水平增高、肌酐清除率降低等, 晚期甚至可出现尿毒症。免疫球蛋白检测 IgG型MM患者64%80%出现IgG含量增高而IgA和IgM 含量降低, IgA型MM患者只有58%出现IgA含量增高, IgG和IgM 含量减低的占75%100%; 100%IgM型MM患者的IgM 含量都增高, 其它2种免疫球蛋白降低的占61%75%; 71%100%的轻链型MM患者IgA、IgG、IgM含量都部分降低。在对MM的免疫球蛋白含量的检测中, IgG型和IgM型阳性率最高, IgA型次之, 而轻链型由于其免疫球蛋白含量增高不明显, 导致阳性率不高。免疫球蛋白定量检测不能提示单克隆免疫球蛋白的存在, 但当某种类型免疫球蛋白含量极度增高的同时, 其它类型免疫球蛋白含量极度减低, 应高度怀疑MM。血清游离轻链的增加骨髓细胞学是诊断MM的重要手段, 骨髓瘤细胞或异常浆细胞通常占10%90%以上。 谢谢!谢谢!

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