溶血性贫血的实验室检测.ppt

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1、 溶血性贫血的实验室检测溶血性贫血的实验室检测 什么叫溶血性贫血?什么叫溶血性贫血? 各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速,骨髓代偿造血功能不足时所发生的一类贫血。什么叫代偿性溶血病?什么叫代偿性溶血病? 指骨髓代偿能力足以补偿 红细胞的损耗而不出现贫血 n溶血性贫血的分类溶血性贫血的分类n1、RBC内在缺陷所致的溶贫n(1) RBC膜缺陷:PNHn(2) HB结构异常:地中海贫血n(3)RBC内酶缺陷:G-6PD缺陷症2、RBC外来因素所致的溶贫nAIHA、药物、化学因素、感染因素n1、血管内溶血:RBC在循环血n 液中直接破坏如PNHn2、血管外溶血:RBC在脾脏破n 坏如球形R

2、BC增多症、脾亢n3、原位溶血:幼RBC在骨髓中n 溶血如AL、巨幼贫n如何诊断溶血性贫血?如何诊断溶血性贫血?n第一步第一步 确定是否有溶血确定是否有溶血n第二步第二步 哪一类溶贫哪一类溶贫n一、首先确定有溶血一、首先确定有溶血n1、找出RBC破坏增多的依据n(1)RBC寿命测定15天(正常半衰期n 2532天)n(2)血片见RBC碎片n(3)血浆游离HB增高(血管内溶血)n(4)HB尿检测(),酱油色n(5)尿含铁血黄素试验()n(6)血清非结合胆红素(间接胆红素)n 增高n(7)尿胆原增高n(8)血清结合珠蛋白检测 均减低n(9)血浆高铁血红素清蛋白检测n 电泳法 :区带n2、 找出RB

3、C代偿增生的依据n(1) 网织RBC增多n(2) 外周血见有核RBCn(3) 骨髓红系统增生明显活跃n二、哪一类溶血性贫血?二、哪一类溶血性贫血? 红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验 (Ham)蔗糖水试验 红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验 (Ham)蔗糖水试验 n1、 红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验n原理原理:是测定红细胞对不同浓度是测定红细胞对不同浓度 低滲氯化钠溶血的抵抗能低滲氯化钠溶血的抵抗能 力力 n 渗透脆性减低渗透脆性减低 渗透脆性增高渗透脆性增高方法:方法:0.60.40.2NaCln 参考值参考值 n开

4、始溶血:开始溶血:0.42%0.46%(4.24.6g/L)NaCL 完全溶血:完全溶血:0.28%0.34%(2.83.4g/L)NaCLn临床意义临床意义 (1)脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 (2)脆性减低 小细胞低色素性贫血:海洋性贫 血、缺铁性贫血 红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验 (Ham)蔗糖水试验 红细胞孵育渗透脆性试验原理 37孵育24小时,细胞内葡萄糖消耗增加,ATP减少,钠离子泵出减少,细胞膨胀脆性增高 。参考值参考值 未孵育未孵育 50%溶血溶血44.45% 孵育孵育 50%溶血溶血4.655.9%意义意义 脆性增高 遗传性球形红细

5、胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 2、酸溶血试验、酸溶血试验 (Ham) 原理:原理:红细胞+弱酸血清(pH6.66.8) 37 1小时 红细胞膜对补体敏感, 备解素作用下溶血。 临床意义:临床意义:正常人阴性, 阵发性睡眠性 血红蛋白尿阳 性(PNH)PNH不同时间尿样不同时间尿样含铁血黄素含铁血黄素Ham试验试验红细胞膜缺陷的检验红细胞膜缺陷的检验 红细胞渗透脆性试验 酸溶血试验 (Ham)蔗糖水试验 3、蔗糖水溶血试验、蔗糖水溶血试验 离子浓度低,增强补体离子浓度低,增强补体与红细胞结合,膜与红细胞结合,膜 孔,孔,水进入水进入-细胞破坏细胞破坏(二)红细胞内酶缺陷的

6、检验(二)红细胞内酶缺陷的检验 1、自身溶血试验及纠正试验 原理:原理:细胞内酶缺陷(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6PD)(丙酮酸激酶),葡萄糖效解障碍,不能提供足量ATP,红细胞在自身血浆中温育48小时,不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源,ATP减少,不能维持红细胞内钠泵作用,导致溶血增加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物,看溶血能否纠正。参考值:参考值: 正常人轻微溶血,溶血度3.5%; 加葡萄糖、ATP溶血明显纠正, 溶血度1%。临床意义:临床意义: ( 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 G-6PD缺乏症 蚕豆病)溶血增加,加葡萄糖、ATP溶血部分纠正,(丙酮酸激酶缺乏症)加葡萄糖不能纠

7、正。加入ATP能纠正。 高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验 G-6PD缺乏症筛选试验 高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验 G-6PD缺乏症筛选试验 (三)珠蛋白合成异常的试验(三)珠蛋白合成异常的试验 血红蛋白电泳检测: 醋酸纤维膜电泳法,检查有无 异常血红蛋白区带 诊断海洋性贫血 地中海贫血异常异常HB带带+醋酸纤维蛋白膜电泳醋酸纤维蛋白膜电泳 免疫性溶血的检验免疫性溶血的检验 抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验 ( Coombs) 原理原理 直接抗人球蛋白试验: 自身免疫性溶血性贫血(AIHA)血清中有抗自身红细胞的不完全抗体,他与表面附有相应抗原的红细胞结合,成为致敏红细胞,加入抗人球蛋白与红细胞表面不完全抗体结合,使红细胞相互连接起来出现凝集现象。来证实红细胞表面有不完全抗体。抗人球蛋白直接试验阳性; 间接抗人球蛋白试验 :检查血清中有无游离的不完全抗体,敏感性差。抗人球蛋白抗人球蛋白IgG不完不完全抗体全抗体RBC直接抗球蛋白试验(直接抗球蛋白试验(DAT) 阳性(右)阳性(右)临床意义临床意义 1、正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性,2、自身免疫性溶血性贫血(温抗体型 37条件下作用最强 IgG),(冷抗体型 4条件下进行试验 IgM) 3、新生儿同种免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL 可阳性。

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