《复旦大学开题报告演示版.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《复旦大学开题报告演示版.ppt(34页珍藏版)》请在优知文库上搜索。
1、Therapeutic Effects of Capsule TONGBI on Human Knee Osteoarthritis and Its Influence on the mRNA Expression Of Chondrocytes Type II Collagen in A Rat Model 研究目的与意义研究目的与意义文献综述文献综述选题依据选题依据科研假说与技术构科研假说与技术构思思研究方法和技术路线研究方法和技术路线指导人员指导人员计划进度计划进度研究基础研究基础预期成果预期成果文献资料文献资料2023-4-104研究目的研究目的证明痛痹胶囊通过整体调节作用能够上调软骨
2、细胞型胶原mRNA的表达、调节关节软骨基质胶原的生成与降解的平衡、促进软骨细胞增殖 证明痛痹胶囊的软骨保护剂样作用 通过随机、平行、对照临床观察进一步证明其临床疗效 2023-4-105骨关节炎定义骨关节炎定义骨关节炎是以进行性关节透明软骨变性、破坏及丧失,关节软骨及软骨下骨边缘骨赘形成为特征的骨关节病变。骨关节炎的最新定义:在力学和生物学因素共同作用下导致软骨细胞、细胞外基质以及软骨下骨三者降解和合成正常耦联失衡的结果,并伴有不同程度的滑膜炎症。 Kelley WN,Ruddy S,Harris ED,et al.Textbook of Rheumatology.15th ed. Phila
3、delphia:Saunders,1997,1 3691 3822023-4-106国内外研究现状、水平和发展趋势国内外研究现状、水平和发展趋势 最新流行病学统计最新流行病学统计发病机制研究进展发病机制研究进展治疗进展治疗进展中医药研究进展中医药研究进展讨论讨论2023-4-107最新流行病学统计最新流行病学统计 全世界大约有1.9亿骨性关节炎患者 据世界卫生组织一份调查表明,50岁以上的人群中,各种骨关节炎发病率占6070 我国患有OA的人数占总人口的3% 美国,总人口中的15%患关节炎,其中43%为,达1600万高发病高发病率率骨关节炎发病机制研究进展骨关节炎发病机制研究进展透明软骨软骨细
4、胞软骨基质胶原蛋白聚糖金属蛋白酶(MMP)IL-1TNF-aNO.破坏软骨细胞基质胶原蛋白聚糖增龄磨损创伤生化代谢异常免疫紊乱遗传变异等 软骨降解酶(MMPs)细胞因子(IL-1,TNF-,)等分解合成2023-4-1011胶原蛋白胶原蛋白 目前能从正常成目前能从正常成年关节软骨和软年关节软骨和软骨细胞培养基中骨细胞培养基中提取的胶原有提取的胶原有5种:种:型胶原、型胶原、胶胶原、原、型胶原、型胶原、型胶原、型胶原、型型胶原胶原 结构图2023-4-1012胶原生理胶原生理 各型胶原在软骨内的排列高度有序,表现在型胶原、型胶原、型胶原组成的软骨内纤维网架结构 该网架结构构成软骨的骨架,如遭到破
5、坏,软骨就不能维持正常的结构和功能 型胶原构成纤维网架结构中的主体 生理状况下,软骨基质胶原的合成和降解维持动态平衡。 胶原的合成分细胞内和细胞外两个阶段,受软骨细胞调控。 2023-4-1013OA关节软骨胶原的变化关节软骨胶原的变化轻度损伤所致骨关节炎软骨中,软骨细胞代谢活跃,合成代谢增强,型胶原合成增加,同时伴有型胶原增加;中度损伤所致骨关节炎软骨中,型胶原在中间层、深层的合成和变性增强,以合成为主;重度损伤所致骨关节炎软骨中,型胶原变性、溶解的速度明显大于合成,使得型胶原纤维的数量明显减少,主要位于单个和簇聚软骨细胞周围 2023-4-1014OA关节软骨胶原的变化关节软骨胶原的变化型
6、胶原总量丢失 型胶原表达的改变 2023-4-1015参与参与OA发病的其他病理机制发病的其他病理机制 软骨降解酶 细胞因子 自由基 免疫紊乱 骨内高压 2023-4-1016治疗进展治疗进展非药物治疗非药物治疗 (1) 病人教育;(2) 自我调理;(3) 通过电话联系以得到社会支持;(4) 减轻体重(如果超重的话);(5) 户外锻炼;(6) 物理治疗;(7) 增加关节活动范围的锻炼;(8)增强肌力的锻炼; (9) 行走的辅助装置;(10) 穿刺抽液;(11) 选择合适的鞋袜;(12)鞋底外侧加垫(对膝内翻者);(13) 使用支架;(14) 职业疗法;(15) 保护关节和保存能量;(16) 使
7、用日常生活活动的辅助装置。 American college of Rheumatology Subcommittee on Osteoarthritis. Recommendations for the medicial management of osteoarthritis of the hehipand knee. Arthritis Rheum,2000,43(9):19051915. 2023-4-1017治疗进展治疗进展药物治疗药物治疗控制症状的药物改善病情药物及软骨保护剂 晚近,治疗骨关节炎的策略主要集中在:金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)、启动软骨细胞修复和软骨生长的刺激剂、
8、细胞因子抑制剂、NO合成酶抑制剂等。 2023-4-1018控制症状的药物控制症状的药物对乙酰氨基酚 国外推荐首选 非甾体抗炎药(NSAIDs) 值得关注的是,一些研究发现某些NSAIDs药如阿司匹林、水杨酸、保泰松、吲哚美辛和萘普生等对关节软骨基质蛋白聚糖合成有抑制作用,加速软骨退化,不利于OA,故不宜选用,至少不应长期使用 2023-4-1019改善病情药物及软骨保护剂改善病情药物及软骨保护剂 硫酸氨基葡萄糖 (维骨力)许多短程和长程随机双盲对照观察GS治疗膝OA的结果都提示,该产品既能抗炎止痛,又有延缓膝OA发展的作用。被认为是第一个改变OA病情的药物。 其他SOD(自由基)、四环素族抗
9、生素(软骨基质金属蛋白酶抑制物)、葡糖胺聚糖(外源性软骨基质成分)、S腺苷基蛋氨酸(促进蛋白聚糖合成及软骨细胞分化)、阿仑磷酸盐(固邦,双膦酸盐类,抑制软骨及骨质吸收)、合成基质金属蛋白酶抑制物(U24522)、转化生长因子B、胰岛素样生长因子2(促进软骨修复的细胞固子)、 VitC、 VitK(保护软骨) 2023-4-1020选题依据选题依据中医经典医著记载的治疗骨痹的效方甚多,备急千金要方中的“独活寄生汤”具有益肝肾、补气血、祛风湿、止痹痛之功,颇切合骨关节炎的病机。 痛痹胶囊是对千古名方独活寄生汤进行化裁,在补益肝肾的基础上重用活血化瘀,兼以祛风除湿、加用化痰、滋阴之品。 2023-4
10、-1021选题依据选题依据前期临床研究表明:20例治疗组与10例维骨力对照组进行比较,痛痹胶囊能明显减少骨关节炎者疼痛、肿胀、压痛程度,疗效较好,治疗组有效率达95%,且无其他不良反应。 动物实验证明:痛痹胶囊对致炎大鼠关节炎模型具有明显的抗炎、镇痛作用,并可改善急性血瘀大鼠的血液流变学,具有一定的活血化瘀作用;对老年鼠血液SOD和MDA含量的影响实验表明痛痹胶囊具有较好的抗氧化作用 2023-4-1022课题研究内容课题研究内容实验研究实验研究临床研究临床研究理论研究理论研究2023-4-1023痛痹胶囊血清对体外培养大鼠膝关节软骨痛痹胶囊血清对体外培养大鼠膝关节软骨细胞细胞型胶原基因转录的
11、影响实验研究型胶原基因转录的影响实验研究 痛痹胶囊血清药理学研究痛痹胶囊血清药理学研究 软骨细胞培养软骨细胞培养 软骨细胞损伤模型的制备软骨细胞损伤模型的制备 痛痹胶囊血清对软骨细胞增痛痹胶囊血清对软骨细胞增殖的影响殖的影响 痛痹胶囊血清对软骨细胞痛痹胶囊血清对软骨细胞型胶原型胶原mRNA表达的影响表达的影响 2023-4-1024痛痹胶囊血清对软骨细胞痛痹胶囊血清对软骨细胞型型胶原胶原mRNA表达的影响表达的影响 引物设计与合成 总RNA的提取 RNA的浓度测定 总RNA逆转录成第一链cDNA PCR扩增 1琼脂糖凝胶电泳 2023-4-1025临床研究临床研究诊断标准诊断标准中医症候标准中
12、医症候标准病情进展分期病情进展分期病情轻重分级病情轻重分级纳入标准纳入标准随机分组随机分组治疗方法治疗方法观察指标观察指标疗效判定标准疗效判定标准统计学处理统计学处理2023-4-1026病例数计算病例数计算 采用样本含量计算软件NCSS2002进行 根据文献的资料及前期的临床工作,4周治疗后WOMAC指数下降16,标准差在20.5为标准疗效评估,每组30例患者的样本,power为80%,为0.05是已足够能比较出痛痹胶囊组和对照药组间的统计学差异 理论上计算最少每组30例的样本量已可以达到80%的统计权力 2023-4-1027盲法设计盲法设计 试验设计为随机、西药软骨保护剂(维骨力,意大利
13、罗达药厂)对照,因为西药对照药维骨力如做成与中药对照同剂型及外观、用量,则存在生物利用度差异,难以双盲。但在负责 WOMAC 评估的医生中仍进行盲法设计。 2023-4-1028随机化与随机数字隐藏随机化与随机数字隐藏 将全部入选患者按就诊顺序编号随机数字来自NCSS2004专业软件,采用区组随机化分组方法采用“信封法”将随机化分配序列进行隐藏 2023-4-1029相关要点说明相关要点说明 根据OA治疗周期和相关国际临床试验(CLASS和VIGOR试验),拟定本次临床研究疗程为4周。Silverstein FE, Faich G, Goldstein JL, et al. Gastroint
14、estinal toxicity with celecoxib vs nonsteroidal anti-inflammatory drugs for osteoarthritis and rheumatoid arthritis: the CLASS study: a randomized controlled trial. JAMA. 2000;284:1247-1255. Bombardier C, Laine L, Reicin A, et al. Comparison of upper gastrointestinal toxicity of rofecoxib and naprox
15、en in patients with rheumatoid arthritis. VIGOR study group. N Engl J Med. 2000;343:1520-1528.目前治疗OA替代医学类药物停药后追踪的报道较少,且缺乏与西药对比的数据,因此本研究有理由在停药后设置2周的追踪时间 2023-4-1030观察指标和方法观察指标和方法 安全性观察安全性观察一般体检项目血、尿、便常规化验,试验前后各查一次。肝、肾功能检查,试验前后各查一次。不良反应。疗效性观测疗效性观测相关症状、体征,VAS疼痛指数,WOMAT关节炎指数,起效时间。 2023-4-1031可行性分析可行性分析
16、本课题是在大量查阅国际国内最新相关文献资料,并结合相关的前期工作的基础上,采用了多种学科、多种技术相结合的综合性研究方法,从而保证了立题的新颖性、科学性和可靠性。 理论上依据充分 本课题实验中所需应用的细胞培养、引物设计、RTPCR、血清药理学等先进技术,通过前期实验,均能熟练掌握。完全具备完成本研究的技术力量。 2023-4-1032计划进度计划进度第一阶段:(2005.52005.6)准备阶段,调研及资料检索。按课题设计首先申购实验用各种试剂(盒)。准备临床病例观察表。第二阶段:(2005.62006.3)按照课题设计,完成全部实验及病例临床观察工作。第三阶段:(2006.3-2006.5)资料汇总、总结、处理数据、分析与研究成果撰写论文。 2023-4-1033预期研究成果预期研究成果 理论上系统总结骨关节炎中医文献、病因病机、治法方药,提出骨痹发病“肾虚血瘀”新见解,发展中医理论,为痛痹胶囊防治骨关节炎提供理论依据。 实验方面,从细胞和基因转录水平上证明痛痹胶囊通过整体调节作用能够上调软骨细胞型胶原mRNA的表达、调节关节软骨基质胶原的生成与降解的平衡、促进软骨细胞增殖,从而证