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1、第九章紫外可见吸取光谱法9-1概述利用紫外可见分光光度计测搔物质对紫外可见光的吸取程度(吸光度)和紫外可见吸取光谱来确定物顺的组成、含量,推想物质构造的分析方法,称为紫外可见吸收光谱法或紫外可见分光光衣法(u1.travio1.etandvisib1.eSpectrophotometryjUV-VIS)它具有如下特点:(1)灵岐度高适于微盘组分的测定,一般可测定10.g级的物质,其原尔吸取系数可以到达2)准确度较高1.Cn1.紫外可见分光光度法用于定量分析的依据是朗伯-比尔定律,即物版在肯定波特长的吸光度与它的浓度呈线性关系。故通过测定溶液对泞定波长入射光的吸光度,便可求得溶液的浓改和含量,紫
2、外可见分光光度法不仅用于测定微址组分,而且用于常盘组分和多组分混合物的测定.1.单级分物切的定晶分析(1) 比较法在样条件下配制样品溶液和标准溶液(与待测组分的浓度近似),在一样的试验条件和H大波长入S处分别测得吸光度为A,和Aii,然后JS展比较,求出样品溶液中待测组分的浓度即CX=QNAxAs)。(2) 标准曲战法首先配制,系列浓度的玩准溶液,在人处分别测得标准溶液的吸光度,然后,以吸光度为纵坐标,标准溶液的浓度为横坐标作图,得A-C的校正曲跳图(抱负的曲战应为通过原点的直线),在完全样的条件下测出试液的吸光度,并从曲线上求得相应的试液的浓度.2.多组分物场的定JB分析依据吸光度加和性原理
3、,对于两种或两林以上吸光组分的混合物的定房分析,可不需分别而且接测定。依据吸取峰的相互干扰状况,分为以下三种,如图9-8所示。a.b的吸取峰(1)吸收光潜小电A如图9-8(八),!i,6相互不干就,即在h处,组分b处.无吸取.而在h处,组分a无吸取,因此,可按单组分的洌定方法分别在h和h处测得组分a和b的浓度.吸取光潜单向正亮如图A8(b)所示,在乃处冽定组分a,殂分b有干扰,在h处测定级分b,组分a无干扰,因此可先在尼处测定拊分b的吸光度A-OA:Kc1.2由上式求得组分b的浓度,然后再在h处冽定组分H和组分b的吸光度A,0IAabAAbK-*c1.I1.1.1.式中.A、A分别为组分ab在
4、h处的摩尔吸取系数,它们可由各自的标准a溶液求得,从而可由上式求出组分的浓度,(3) 吸取光港双向重投如图9-8(C)所示,组分a,b的吸取光潜相互重AAfb叠同样做光度加和性原则在h和h处分刎得总的吸光度、A;A*bAAbt.hmbbhn,C1.KC1.式中K:为组分b在处的摩尔吸取系数,中出组分b的标准溶液求斛,故可式中,K,K,K、K分别为组分a、b在h、h处的摩尔吸取系数,它们同样可由各自的标准加液求得.因此.通过解方程求得组分a和b的浓度,和明显,有n个组分的混合物也可用此法测定,联立n个方程组便可求得各自组分的含好,但随着组分的增多,试验结果的误差也会增大,准确度降低.H)用双波长
5、分光光度法进展定址分析对于吸取光谱相互电型的多组分混令物,除用上述解联立方程的方法测定外,还可用双波长法1定,旦能提高测定以敏度和准确度.M99刈段K=止我在冽定组分a和b的混合样品时一般承受作图法确定参比波长和测定波长,如图94,选组分a的最大吸取波长刀为测定波长,而参比波长的选择.应考虑能消退干扰物版的吸取,即使组分b在刀处的吸光度等于它在尼处的吸光度,即A:=A:,依据吸光段加和性原则,混合物在A1和尼处的吸光度分别为bAABII1.bA*Ab由双波长分光光度计测得AAhh尤AhA.AbI2IUt(t-FAnA所以AAA:Kc1.K:c1.i2A(K.KJ1.I2K、K.分别为加分a在乃和22处的摩尔吸取系数,可由组分a的标准溶液在2和2:处测汨的吸光度求得,由上式求得组分a的浓度,I可理,也可以冽得组分b的浓度.双波长法还可用于测定混浊样品、吸光度相差很小而干扰又多的样品及颜色较深的样品,测定的准确位和灵敏度都较岛.四、示差分光光度法(量程扩展技术)常规的分光光度法是承受空白溶液作参比的,对于高含相物质的测定,相对误差较大,示差分光光度法是以与试液