CAMP试剂盒中文说明书.docx

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1、a纽原生丽科技.KlVLAIRlOSCieNCes人口引口朵胺2,3-双加氧酶(IDO)ELlSAKIT英文名称：Human(IDO)ELISAKIT规格：96T货号：NLH7501尊敬的客户：感谢您选用本公司EUSA系列产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造，仅供科研使用。本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中口川朵胺2,3-双加氧酶(IDO)活性具体适用样本请咨询。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。如有疑问，请咨询:武汉纽莱生物科技有限公司EmaiksaIe(三)电话：027-65563553本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断。武汉纽莱生物

2、科技有限公司WuHanNewLAIBiosciencesCo.,LTD实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人口引珠胺2,3-双加氧酶（IDO）水平。用纯化的人叫ID朵胺2,3-双加氧酶（ID。）抗体包被微孑版,制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入口引珠胺2,3-双加氧酶（IDO）,再与HRP标记的口如朵胺2,3-双加氧酶（IDO）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的叫I口朵胺2,3-双加氧酶（IDO）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通

3、过标准曲线计算样品中人口川朵股2,3-双加氧酶（ID。）活性浓度。用途：本肺盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中咧噪胺2,3双加氯酶（IDO）活也基本性能：性能灵敏度0.175IU/L检测范围0.7IL-32IU/L特异性可检测样本中的计算样品中人吗珠胺2,3-双加氧酶（IDO）活性浓度。且与其他类似物无明显交叉反应。重复性板内，板间变异系数均10%武汉纽莱生物科技有限公司WuHanNewLAIBiosciencesCo.,试剂盒组成及保存中文名称规格开封后保存条件ELISA酶标板96T：8孔12条48T：8孔6条2-8C90天标准品96T：0.5ml1(64IU/L)48T：0.25mlx

4、12-8C90天HRP标记抗体96T：6mlx148T：3mlx12-8C90天样品稀释液96T：6mlx148T：3mlx12-8C180天标准品稀释液96T：1.5mlx148T：1mlx12-8180天显色剂A96T：6mlx148T：3mlx128（避光）180天显色剂B96T：6mlx148T：3mlx12-8C（避光）180天终止液96T：6mlx148T：3mlx12-8C180天180天30倍浓缩洗涤液96T：20mlx148T：10mlx12-8180天180天说明书1份封板膜2张密封袋1个说明；未拆封的试剂盒可以在2-8。C保存六个月试剂盒所需自备物品1 .酶标仪（45On

5、m波长滤光片）2 .高精蟒液器，E唯及一次性吸头：0.5-10L,2-20L,20-200L,200-1000L3 .37恒温箱4 .双蒸水或去离子水5 .吸水纸6 .加样槽Email:saleWeb:武汉纽莱生物科技有限公司 WuHan New LAI Biosciences Co.,Tel:027-65563553样品收集方法（具体处理方法请咨询）1.血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8。C条件离心2除钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合Io-20分钟

6、后，2-8。C条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成应该再次离心。3尿液：用无菌管收集，2-8条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。4.组织匀浆：用预冷的PBS（0.01M,PH=7.4）冲洗组织，去除残留血液，称重后将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将

7、匀浆液于2-8C,5000g离心5-10分钟取上清检测。5细成取液:贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，IOooXg离心5分钟后收集细胞。悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每106个细胞中加入150-200LPBS重悬（推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积）并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8（,150OXg离心10分钟，取上清检测。6细胞培养上湘旗他生物体液;收集液体后于2-8C,IOoOXg离心20分钟，除去杂质及细胞碎片，取上清检测。试剂盒注意事项1 .试剂盒从冷凝境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包

8、被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2 .浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3 .各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多,推荐使用其外仓加样。4 .请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（n5）5 .封板膜只限T欠性使用，以避免交叉污染。6 .底物请避光保存。7 .严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8 .所有样品，洗涤液和

9、各种废弃物都应按传染物处理。9 .本试剂不同批号组分不得混用。Email:saleWeb:武汉纽莱生物科技有限公司 WuHan New LAI Biosciences Co.,Tel:027-65563553样本收集注意事项1不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。2标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试3佥，可将标本放于-20。C保存，但应避免反复冻融。3.我们罗列的是通用的样本处理方法，无法涵盖各种样本，对于一些特殊样本，建议实验人员多参考已发表的文献，自行设等釉样本处理方法。检测前准备工作1 .请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，以平衡至室温。2 .用双蒸

10、水将30浓缩洗涤液稀释成IX工作液。未用完的放回403 .标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。32IU/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液16IU/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液8IU/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液4IU/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液2IU/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液武汉纽莱生物科技有限公司 WuHan New LAI Biosciences Co.,Email:saleWeb:Tel:027-6556

11、3553操作步骤1加样：分别设空白孔（空白对照孑昧加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液.40l,然后再加待测样品10l（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底）部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。2 .温育：用封板膜封板后置37。C温育30分钟。3 .洗涤：/如。揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。4 .加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。5 .温育：操作同26 .洗涤：操作同37 .显色：每孔制叭显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀，3

12、7。C避光显色10分钟.8 .终止：每孔加终止液50l,终止反应（此时蓝色立转黄色）。9 .测定：以空白孔调零，45Onm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作一览表操作程序武汉纽莱生物科技有限公司 WuHan New LAI Biosciences Co.,Email:saleWeb:Tel:027-65563553结果判断：1.每个标准品和标本的OD值应减去空白孔的OD值。2 .以标准品的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，利用计算机软件采用直线回归的拟合方法创建标准曲线方程,通过样本的吸光度（OD值）,利用方程计算样品的浓度值。3 .若样本的OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。典驾孀由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。详情请看质检报告.Email:sale武汉纽莱生物科技有限公司 WuHan New LAI Biosciences Co. jWeb:Tel:02765563553