血清、肝素抗凝血浆氯的电极电位法测定.docx

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1、血清、肝素抗凝血浆氯的电极电位法测定1 .实验原理Vitros氯试剂是一种干燥,多层的,在聚合物支撑基片上涂有分析成份,用直接电位法进行氯离子测试的干片。该干片由两个离子选择电极组成,每一电极含有保护层,银和氯化银层。保护层能阻止正常水平溟化物和尿酸的干扰。将一滴IOul的患者样品和IOul的Vitros电解质参考液分别滴于干片左右两侧,于是两边的液体就向纸桥的中央移动,从而在参考电极和样品指示电极之间形成一条稳定的液流。每个电极会产生与其氯离子活性相应的电位,两极间的电位差与样品中氯离子浓度成正比。测定方式:电极电位法测试时间和温度:37C下约2分钟。2 .标本:2 .1病人准备:无特殊要求

2、。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2样品类型:血清、肝素抗凝血浆。3 .3标本采集与处理:特别要注意的是:不要从正进行静脉注射的手臂上采血。纤维凝块会引起加样不完全,为避免此类情况发生,可以:让标本完全凝固后再离心取血清;观察血浆中是否有纤维凝块。样品采集后4小时内要离心标本,吸出血清。处理样品时要将其当成生物污染品。4 .标本的存放:血清、血浆:室温下可最多保存7天;冷藏最多4周;冷冻保存可超过4周。5 .标本的运输:样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。6 .标本拒收的标准:氟化氯/草酸氯,EDTA或枸椽酸盐抗凝的血浆。7 .试验材料:6.1测试CI所需的物品包括:VitrOS化学

3、定标物Kit2;Vitros特制质控液;VitroS参考液;VitroS尿液电解质稀释液。强生厂家提供原装进口,试剂盒外包装上标明了测试项目名称,试剂标签代码,有效期限和储藏温度。6.1.1试剂组成:干片成分:反应成份是银,氯化银。其它成份有聚合物,增塑剂,表面活性剂和锲。干片标记:试剂盒外包装上标明了测试项目名称,试剂标签代码,有效期限和储藏温度。6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒,在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态1828C。因此从冰箱中取出的试剂盒至少要在室温下要放置60分钟,而冷藏的试剂盒至少要在室温下放置30分钟。去除内包装后立即将干片盒放入仪器的储

4、藏器中。说明:在试剂盒达到室温后的24小时之内必须将其装入仪器中。6.1.3试剂稳定性与贮存未开封的干片盒:存储在2-8C或低于该范围。在机内干片储藏器中的干片盒:在仪器上放置时间不能超过2周,否则要更换新试剂。当仪器关闭时间不超过2个小时时,可将干片盒留在储藏器中。出现以下情形要做质控检测:仪器关闭时间超过2小时;再次装载从仪器储藏器中取出的干片盒。如果储藏正确,VitrosCL-干片可保质到包装盒上标明的有效期限。参见VITRoS250干化学分析仪试剂稳定性及贮存.SOP文件。6.1.4变质指示:超过有效期的试剂干片不能使用。6.1.5注意事项:为避免干片盒打开以前其内包装受损,不能摔打干

5、片盒;不要让尖利物刺入内包装。1.2 校准品:用VitroS化学定标物Kit2。血清、血浆用相同的定标液,不过各自的SAVS值不同。有关标准液的配制,使用及保存的配制,保存和稳定的详情,可参阅VITROS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。1.3 质控品:使用VitroS特制的质控物品;若使用其它的一些质控物品,当与别的Na测试方法比较时就会出现差异。如:用人血清/血浆混合物分离制成的质控物品,含有高浓度防腐剂,稳定剂和其它化学添加剂的质控物品;含有或高或低总蛋白浓度的质控物品;乙烯乙二醇作稳定剂的质控物品不能使用。有关质控液的配制,保存和稳定的详情,可参阅VITRoS250干化学分

6、析仪校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器:美国强生厂家VITRoS250全自动干式生化分析仪。具体测试程序请参阅操作手册的介绍。8 .操作步骤:将试剂复温后直接放入仪器,样品编程,仪器5分后自动打印结果。具体测试程序请参阅VITR0S250操作手册.S0P。具体定标程序:用Vitros化学定标物Kit2,定标液复溶后必须在1小时以内使用,以免PH值发生变化。参阅操作手册的相关章节内容。何时进行定标:在维护和保养时更换了仪器的重要部件。质控结果持续超出线性范围内时,详情参阅操作手册。管理条例上指定的时间,在美国,CLlA要求至少每6个月定标一次。说明:进行尿氯定标时,仪器会自动进行尿钾的定标。

7、9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制:操作建议:将质控物质当成生物污染品来处理;将质控液与患者样品同时进行测试;每天至少做一次质控以检测仪器运行状况;选择质控浓度来检查与临床的相关性;其它详情参阅操作手册质控章节的有关内容。有关质控操作的常规性条例可参照国际质控检测(IQCT)的内容。在每一批标本中都应把质控血清做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法:以用VitrOS化学定标物校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmolL报告。12 .参考值范围:血清

8、/血浆:98-107mmolLc以上参考范围值是通过测试60位健康成人,然后取靶值附近95%的结果计算所得。男性和女性的结果无明显差异。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义:氯离子是细胞外液中的主要阴离子,它的生理重要性在于能保持人体正常的水代谢,渗透压和细胞外液中正常的离子平衡。在脱水,肾小管酸中毒(高氯代谢酸中毒),食盐摄入过多等情况下,氯的浓度会升高。在水含量过多,慢性呼吸性酸中毒,失盐性肾炎,代谢性碱中毒和充血性心脏衰竭等情况下,氯的浓度会降低。14 .操作性能14.1线性范围:血清/血浆:50-175mmo

9、lL014.2精密度:在VitroS250生化仪上用质控液来测精密度。结果反映了该方法的精密度。当仪器维护,周围环境,干片处理和保存,质控液的复溶以及样品处理等方面发生变化都会影响结果的重复性。日间精密度血清X(mmolL)S(mmolL)CV(%)室间精密度n=20天X(mmolL)S(mmolL).CV(%)样品1n=801270.8样品11271.10.9样品2n=781471.0样品21471.51.0*日间精密度是将2至3份相同的样品在一天中运行两次,然后对测试结果进行统计计算。*室间精密度是用同一个批号的干片每周定标一次,然后对测试结果进行统计计算。14.3方法学比较:用Vitro

10、s700仪器和库仑参考方法分别测试相同的血清/尿液样品,对比结果显示Vitros方法的准确度良好;用Vitros250仪器与Vitros700仪器测试相同的血清/尿液样品,对比结果显示Vitros250方法的准确度良好,血清:Y=0.99X+1.53(r=0.998,N=89,检测范围71T22mmolL).14.4灵敏度:血清/血浆:50mmolLo14.5特异性:经测试,以下物质对VitroSCl干片法均无干扰(偏差1.lmmol/L)。扑热息痛5mg/Dl阿司匹林30mg/dL、对氨基水杨酸23mg/dL、维生素C3mg/dL、胆红素20mg/dL、葡聚糖1000mg/dL、乙醇300m

11、g/dL、龙胆酸0.5mg/dL、葡萄糖600mgdL谷胱甘肽1mgdL血红蛋白150mg/dL、异烟期10.54mg/dL、L-多巴0.6mg/dL、安宁(安定药)2mgdL乐疾宁1.5mgdL苯巴比妥3mg/dL、苯妥因2mg/dL、水杨酸35mg/dL、磺胺噬唾6mg/dL、甲糖宁22mgdL.甘油三酯800mg/dL、酪氨酸24mg/dL、尿素氮IOoIngdL14 .6病人结果可报告范围血清/血浆:75-250mmolL;尿液5-250mmolL(乘以稀释倍数5后的结果)。15 .超出范围结果处理:本法线性上限血清/血浆:250mmolL;血清或血浆:氯浓度一般不会超出系统的测试线性

12、范围。VitroS干片法不能测试稀释后的样品,因为稀释液会同时改变血浆液中的固体浓度和离子强度。16 .病危报警值的处理当血清/血浆:氯2115mmolL或W80mmolL时,应在复查该标本检测结果后,报告上级检验医师(或科主任)后,及时报告临床医生,必要时可以再抽血复查。17 .方法局限性17.1本法线性上限血清/血浆:250mmolL;氯浓度一般不会超出系统的测试线性范围。Vitros干片法不能测试稀释后的样品,因为稀释液会同时改变血浆液中的固体浓度和离子强度。17.2干扰物质:治疗性药物和软膏中的1克漠化物和碘化物分别会使结果产生大约3mmolL和4mmolL的偏差。正常生理水平的漠化物和碘化物对此法无干扰。有些药物和患者的自身状况也会影响氯的测试值。一些文献中收集了有关于此的报道。18.补救措施:仪器出了故障可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先做,如别的实验室无同类仪器,可用本实验室的OLYMPUSISE分析仪或Easylyte电解质分析仪测定样品。

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