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1、计数培养基适用性检查计数培养基适用性检查1、一般要求2010版2015版范围固体培养基微生物计数用的成品培养基、由脱水培养墓或按照处方配制的培养基均应进行培养基紊用性检查,包括液体及固体培养基.试验菌大、金、枯、白、黑金、绿、枯、白、黑加菌量50-100cfu不大于100cfu培养温度营养琼脂:30-35C玫瑰红钠:23-28C胰酪大显腺琼脂:30-35C培养胰酪大豆膝液体:30-35C培养沙氏葡萄糖琼脂:20-25C培养培养时间细菌:4h;真菌:72h细菌不大干3天,真菌不大于5天接受标准70%固体培养墓:0.5-2(50%200%)液体蜡养基:生长良好2、胰酪大豆陈琼脂(TSA)无菌性检查
2、:取已灭菌TSA注皿,于30-35培养3天,应无菌落生长。试验用菌种:金葡、铜绿、枯草、白念、黑曲接种方法:涂布法:分别接种不大于100cfu试验用菌悬液于TSA平板表面;倾注法:分别接种不大于100CfU试验用菌悬液于无菌平皿中,倾注约15ml该培养基,轻轻摇匀。适用性检查:枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌于30-35培养不超过3天;白色念珠菌、黑曲霉于30-35培养不超过5天。判断标准:与对照培养基比较,菌落平均数比值在05-2(50%-200%)范围内,且菌落形态大小一致。3、胰酪大豆腺液体(TSB)无菌性检查:取已灭菌的TSB,于30-35培养不少于3天,培养基应澄清。试验用
3、菌种:金葡、铜绿、枯草接种方法:涂布法:分别接种试验用菌悬液于该培养基中,接种量不大于IoOCfu,摇匀,培养。适用性检查:30-35C培养不超过3天。判断标准:金葡、铜绿、枯草接种后,与对照培养基比较,试验菌生长良好。备注:该培养基同时用于稀释液的制备和控制菌检查时,需考虑同时满足计数和控制菌检查培养基适用性检查控制要求。4、沙氏葡萄糖琼脂(SDA)无菌性检查:取已灭菌的SDA注皿,于20-25培养5天,应无菌落生长。试验用菌种:臼色念珠菌、黑曲霉接种方法:涂布法:分别接种不大于100cfu允试验用菌悬液于该平板表面倾注法:接种大于Icfu试验用菌悬液于无菌平皿中,倾注约15ml该培养基,轻
4、轻摇匀。适用性检查:白色念珠菌、黑曲霉于20-25培养不大于5天判断标准:与对照培养基比较菌落平均数比值在0.5-2(50%200%)范围且菌落大小、形态一致。备注:如该培养基用于控制菌白色念珠菌的检查时,同时需要满足捌菌项下培养基适用性检查要求。5、沙氏葡萄糖琼脂+抗生素无菌性检查:取已灭菌的SDA注皿,于20-25培养5天,应无菌落生长。试验用菌种:抑菌性检查:枯草芽徇杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌促生长能力:白色念珠菌、黑曲毒O常用抗生素:1、庆大霉素:广谱。对G-,G+菌有较好的抗菌作用。2、氯霉素:广谱。对G-菌作用强;对G+菌作用不及青霉素与四环素。接种方法:抑菌性:接种枯草、金葡、铜绿菌悬液不少于100cfuo促生长能力:接种白色念珠菌、黑曲霉菌悬液不大于100Cfu。适用性检查:白色念珠菌、黑曲霉于20-25培养不大于5天。与对照培养基比较,菌落平均数比值在0.5-2范围内。判断标准:枯草芽抱杆菌、金黄色菊萄球菌、铜绿假单胞菌不得生长。