蛋白电泳临床应用.ppt

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1、正确认识、理解电泳的临正确认识、理解电泳的临床应用床应用临床电泳概述临床电泳概述n电泳概念:n电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小,形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离,鉴定或提纯的技术.蛋白家族比高低阴极跑到阳极去电弱体沉拖后腿身轻电足跑第一裁判断电比赛止赛场排开五兄弟电泳图形的五个区带，并不是都由单一组分构成，而是分别包括数个成分。临床蛋白电泳的功能临床蛋白电泳的功能n电泳可用来鉴定体内是否存在异常的蛋白电泳可用来鉴定体内是否存在异常的蛋白n鉴定血清或尿液中蛋白区带的升高或降低鉴定血清或尿液中蛋白区带的升高或降低n鉴

2、定单克隆蛋白鉴定单克隆蛋白n鉴定本周氏蛋白鉴定本周氏蛋白临床中何时需要病人的电泳结果临床中何时需要病人的电泳结果n怀疑有多发性骨髓瘤病怀疑有多发性骨髓瘤病(单克隆蛋白单克隆蛋白)n不明的外周神经病（糖尿病、毒素照射、化疗除外）不明的外周神经病（糖尿病、毒素照射、化疗除外）n根据其他实验室的数据，需要做蛋白电泳根据其他实验室的数据，需要做蛋白电泳 总蛋白异常或白蛋白异常总蛋白异常或白蛋白异常 尿蛋白升高尿蛋白升高 由于恶变而引起的血钙过多（如临床相关的症状为失重，疲劳，由于恶变而引起的血钙过多（如临床相关的症状为失重，疲劳，骨痛，异常出血）骨痛，异常出血）WBC、RBC升高升高n临床上出现如下症

3、状时临床上出现如下症状时 炎症疾病、自身免疫性疾病、肾病、肝病、炎症疾病、自身免疫性疾病、肾病、肝病、蛋白丢失的相关疾病蛋白丢失的相关疾病n总蛋白总蛋白/白蛋白正常白蛋白正常血清蛋白电泳血清蛋白电泳n从阳极到阴极，电泳区带及其主要成分如下：前白蛋白区前白蛋白区：前白蛋白（Pre A）白蛋白区：白蛋白区：白蛋白（Alb）1球蛋白区：球蛋白区：1脂蛋白（1LP）、1酸性糖蛋白（1-AG）、1抗胰蛋白酶（1-AT）、1抗糜蛋白酶（1-AC）、C1脂酶抑制物(C1 Inh)血清蛋白电泳血清蛋白电泳1-2 球蛋白区球蛋白区：GC糖蛋白（GC）、铜蓝蛋白（Cer）2球蛋白区球蛋白区：2巨球蛋白（2M）、胆

4、碱酯酶（Che）、结合珠蛋白（Hpt）、2脂蛋白（2LP）1球蛋白区：球蛋白区：脂蛋白（LP）、运铁血红素（HPX）、转铁蛋白（Tf）、C反应蛋白（CRP）血清蛋白电泳血清蛋白电泳2球蛋白区：球蛋白区：纤维蛋白原（Fibr）、抗凝血酶-III(AT-III)、纤溶酶原（PI）、因子B(FB)、补体C1q、C1r、C1s、C3、C4、C5球蛋白区：球蛋白区：免疫球蛋白IgA、IgD、IgE、IgG、IgM 血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n正常血清蛋白图谱正常血清蛋白图谱 在电泳图谱中，白蛋白、1和带可出现均一且完整的波段；而2和带则是弥散的区带，且带更显强烈一些。血清蛋白电泳的临床

5、应用血清蛋白电泳的临床应用在脱色后的醋纤膜上检在脱色后的醋纤膜上检测前白蛋白区带很困测前白蛋白区带很困难。难。n前白蛋白浓度增加前白蛋白浓度增加：怀孕，肾病综合症n前白蛋白浓度减少前白蛋白浓度减少：营养不良、肝病、急性炎症血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用白蛋白白蛋白：机体严重失水，：机体严重失水，如腹泻、呕吐及长时间出如腹泻、呕吐及长时间出汗等。汗等。白蛋白白蛋白：低白蛋白血症低白蛋白血症（肝病、遗传缺陷、营养（肝病、遗传缺陷、营养不良、饥饿等），由于肾不良、饥饿等），由于肾损伤，严重烧伤或椎管内损伤，严重烧伤或椎管内出血导致蛋白质的丢失。出血导致蛋白质的丢失。急性炎症，怀孕和肿瘤

6、急性炎症，怀孕和肿瘤可使白蛋白浓度大量减少。可使白蛋白浓度大量减少。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用双蛋白区带双蛋白区带 白蛋白的遗传性变异，导致在白蛋白区带中出现两个波峰。这两个波段所显示的浓度基本相同。这种情况经常是由一个正常白蛋白（Albn）和一个迁移率较慢的白蛋白（Albsl）所组成，Albsl区带在白蛋白和1区带之间,它无临床意义。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用无白蛋白血症无白蛋白血症由于先天因素导致血清中白蛋白浓度极低或缺乏。无白蛋白血症主要特点是白蛋白产生明显减少，其血清水平低于10g/L。虽然血清中白蛋白含量非常低，但病人一般无症状。血清蛋白电泳的临床

7、应用血清蛋白电泳的临床应用n1 1区带区带 这条区带包括这条区带包括1-1-抗胰蛋白抗胰蛋白酶酶，1-1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白和和脂脂蛋白蛋白。普通的染料不能使。普通的染料不能使1-1-酸性糖蛋白着色，而酸性糖蛋白着色，而1-1-抗胰蛋白酶却很容易被抗胰蛋白酶却很容易被着色，所以着色，所以11主要是指主要是指1-1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶的浓度。的浓度。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n1 1区带区带 正常的1区带在白蛋白和2区带之间，波峰平滑 1-1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶：在炎症反应中，1-抗胰蛋白酶明显增高，它是急性时相反应蛋白之一。1-1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶：肺脏疾病（严重的

8、肺气肿）血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n1 1区带区带提示：提示：-在血清蛋白图谱中，1区带偶尔会出现双峰现象，它预示着既有单克隆成分单克隆成分存在又有1-1-抗抗胰蛋白酶的改变胰蛋白酶的改变。在一些罕见病例中，1泳带中会出现另一个较宽的波峰，它提示可能有甲胎蛋白甲胎蛋白存在。-病人遭受严重创伤后（如手术）1波峰明显升高，同时1-抗胰蛋白酶也会升高。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用2 2区带区带 2-2-巨球蛋白（巨球蛋白（2-M2-M）靠近阳极端，是蛋白酶抑制剂在抑制内生蛋白酶活性过程中起着重要的作用，如胰岛素，血浆酶和激肽释放酶等。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电

9、泳的临床应用n2 2区带区带2-2-巨球蛋白巨球蛋白：在幼年和妊娠期是正常的生理性增高。病理性增高主要表现在肾病综合症和急性炎症。2-2-巨球蛋白巨球蛋白：肝病导致的蛋白丢失、类风湿性关节炎、服用一些药物及骨髓瘤。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n2 2区带区带结合珠蛋白结合珠蛋白(Hp)(Hp)l靠近阴极一端 l结合珠蛋白可以防止血红蛋白从肾丢失而为机体有效的保留铁。结合珠蛋白不能结合亚铁血红素和非正常的血红蛋白。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n2 2区带区带结合珠蛋白结合珠蛋白(Hp)(Hp)大量的血管内溶血最后会导致血清结合珠蛋白的耗尽，在电泳图谱中，靠近阴极一

10、端的2区带会缺失。结合珠蛋白结合珠蛋白：急性或慢性炎症，外科手术，心肌梗塞。在炎症反应中，由于结合珠蛋白的合成明显增加而导致2电泳区带的波峰增高。结合珠蛋白结合珠蛋白：溶血性贫血，肝病（肝硬化，肝炎，肝癌）。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n在泳带中可出现:转铁蛋白 C3和C4补体成分 脂蛋白 转铁蛋白成分比C3补体的稍多，染色更强一些 血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n区带区带脂蛋白脂蛋白 在醋纤膜上产生的是在醋纤膜上产生的是弥散的区带。脂蛋白的弥散的区带。脂蛋白的电泳迁移率通常与在样电泳迁移率通常与在样品中的浓度有关。在电品中的浓度有关。在电泳图谱中，不同样品中泳图

11、谱中，不同样品中的的脂蛋白表现的迁移率脂蛋白表现的迁移率有着明显的不同。有着明显的不同。脂蛋脂蛋白可能在转铁蛋白或白可能在转铁蛋白或C3补体区带或在补体区带或在-区间出区间出现。现。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n转铁蛋白转铁蛋白转铁蛋白转铁蛋白：妊娠期、缺铁性贫血。转铁蛋白转铁蛋白：肝病，肾病，恶性肿瘤，慢性炎症，慢性贫血等血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用nC3补体补体 它在区带中靠近阴极的一端 C3补体：肾小球链球菌性肾炎 系统性红斑狼疮（SLE）自身免疫溶血性贫血 肝脏疾病 血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用n区带区带：高免疫球蛋白血症，肝病，慢性炎症

12、，系统性红斑狼疮（SLE），单克隆或多克隆多发性骨髓瘤，淋巴瘤：慢性淋巴性白血病，轻链疾病，丙种球蛋白缺乏症，一些药物的影响等。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用肝硬化肝硬化 影响肝脏的疾病会使白蛋白影响肝脏的疾病会使白蛋白和和11的合成降低，使血清的合成降低，使血清中这两种蛋白的浓度下降。中这两种蛋白的浓度下降。然而，白蛋白血症表现为众然而，白蛋白血症表现为众多的肝细胞损伤和硬化，导多的肝细胞损伤和硬化，导致酒精对蛋白合成的抑制，致酒精对蛋白合成的抑制，及激素的改变。及激素的改变。IgAIgA合成的合成的增高，并由酒精所引起的肝增高，并由

13、酒精所引起的肝脏疾病，导致脏疾病，导致“-”桥的桥的出现。出现。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用低丙种球蛋白血症低丙种球蛋白血症 低丙种球蛋白血症是低丙种球蛋白血症是遗传或获得性疾病，其遗传或获得性疾病，其主要特点是一类或几类主要特点是一类或几类免疫球蛋白浓度的减少，免疫球蛋白浓度的减少，而这种缺陷大部分是由而这种缺陷大部分是由遗传引起的，获得性的遗传引起的，获得性的低丙种球蛋白血症与单低丙种球蛋白血症与单克隆丙种球蛋白血症有克隆丙种球蛋白血症有关，或与再次免疫抑制关，或与再次免疫抑制治疗有关。治疗有关。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳

14、的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病（M.G.M.G.）单克隆丙种球蛋白病所单克隆丙种球蛋白病所涉及的临床情况较复杂。涉及的临床情况较复杂。单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病（M.G.M.G.）的存在并不总是）的存在并不总是和多发性骨髓瘤病相一致，和多发性骨髓瘤病相一致，而是与其不同的的临床表而是与其不同的的临床表现也表现出一定的相关性。现也表现出一定的相关性。血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用尿蛋白电泳的临床应用尿蛋白电泳的临床应用 n正常尿液蛋白含量正常尿液蛋白含量150mg/天天

15、n肾小球能够过滤的主要血浆蛋白肾小球能够过滤的主要血浆蛋白:白蛋白、低分子量片段、白蛋白、低分子量片段、免疫球蛋白免疫球蛋白其他残余物：来源于尿道其他残余物：来源于尿道正常尿液电泳带型正常尿液电泳带型:微量白蛋白微量白蛋白 转铁蛋白（偶尔）转铁蛋白（偶尔）尿蛋白电泳尿蛋白电泳临床做尿蛋白电泳过程临床做尿蛋白电泳过程n随机尿蛋白定量随机尿蛋白定量 10mg/L搜集搜集24小时尿小时尿测测定尿蛋白总量（如果尿蛋白总量定尿蛋白总量（如果尿蛋白总量 200mg/24h）做高分辨率尿蛋白电泳做高分辨率尿蛋白电泳描述电泳带型结果描述电泳带型结果出报告出报告n根据报告形式如根据报告形式如“可见到宽的白蛋白带

16、；高可见到宽的白蛋白带；高 区带；介于区带；介于 2和和 区域间的成分；区域间的成分；2区带区带”，临床医生可进一步进行其他的临床医生可进一步进行其他的定量分析定量分析如特定如特定蛋白定量分析和免疫固定实验做出明确的诊断蛋白定量分析和免疫固定实验做出明确的诊断肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿n尿蛋白带型尿蛋白带型 白蛋白浓染白蛋白浓染 1区带较宽，着色较深区带较宽，着色较深 转铁蛋白着色明显，带宽转铁蛋白着色明显，带宽血清蛋白带型血清蛋白带型 白蛋白明显减低白蛋白明显减低 1 酸性糖蛋白和酸性糖蛋白和 -1 抗胰蛋白酶明显升高抗胰蛋白酶明显升高 大分子蛋白升高：大分子蛋白升高：2 巨球蛋白，巨球蛋白，脂蛋白脂蛋白肾病综合征肾病综合征严重的蛋白尿严重的蛋白尿n尿蛋白尿蛋白3-5g/天天n低白蛋白血症和低脂蛋白血症低白蛋白血症和低脂蛋白血症大面积的水肿大面积的水肿与肾病综合征相关的疾病与肾病综合征相关的疾病 肾小球性疾病增生性肾小球肾病其它疾病 -感染 -药物 -肿瘤 -遗传病 -多系统损害性疾病病历分析病历分析 -出现肾小球性蛋白尿的肾病综合征的病人n病史病史:糖尿病糖尿病/肾病综合征肾病综