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1、第一节第一节 汉坦病毒汉坦病毒又名肾病综合征出血热病毒,又名肾病综合征出血热病毒,是流行性出血热的病原体。是流行性出血热的病原体。微生物检验微生物检验(一一)病毒分离与抗原检查病毒分离与抗原检查 采集病人血液及尸体标本,或采集疫区采集病人血液及尸体标本,或采集疫区 鼠肺标本,经适当处理后,接种于人胚肺鼠肺标本,经适当处理后,接种于人胚肺 二倍体细胞或人肺传代细胞中培养。连续二倍体细胞或人肺传代细胞中培养。连续 传传3 35 5代,阳性细胞数增多,制备待检病代,阳性细胞数增多,制备待检病 毒细胞抗原片。用已知恢复期病人血清,毒细胞抗原片。用已知恢复期病人血清,采用免疫荧光法、免疫酶染色法检测抗采
2、用免疫荧光法、免疫酶染色法检测抗 原。新分离到的病毒也可通过电镜观察原。新分离到的病毒也可通过电镜观察 鉴定其形态特征。鉴定其形态特征。(二二)核酸检查核酸检查 近年来,许多学者根据汉坦病毒基近年来,许多学者根据汉坦病毒基 因组核苷酸序列设汁特异性引物,因组核苷酸序列设汁特异性引物,应用应用RT-PCRRT-PCR技术测病毒核酸。此法技术测病毒核酸。此法 快速、敏感、准确。快速、敏感、准确。(三三)抗体检测抗体检测 用感染该病毒的动物组织或培用感染该病毒的动物组织或培 养细胞制成已知抗原,以免疫荧光养细胞制成已知抗原,以免疫荧光 法或免疫酶染色法检测患者血清中法或免疫酶染色法检测患者血清中 特
3、异性特异性IgMIgM或或IgGIgG抗体。单份血清抗体。单份血清lgMlgM 抗体阳性或双份血清抗体阳性或双份血清IgGIgG抗体效价增抗体效价增 高高4 4倍或倍或 4 4倍以上者,有诊断意义。倍以上者,有诊断意义。应用敏感性与特异性均高的抗体捕应用敏感性与特异性均高的抗体捕 获获ELISAELISA法也可检测特异性法也可检测特异性IgMIgM,适,适 用于早期诊断用于早期诊断 第二节第二节 新疆出血热病毒新疆出血热病毒 在分类上属于布尼雅病毒科内罗病在分类上属于布尼雅病毒科内罗病 毒属的克里米亚毒属的克里米亚-刚果出血热病毒血刚果出血热病毒血 清组成员。在我国是从新疆塔里木清组成员。在我
4、国是从新疆塔里木 盆地出血热病人以及硬蜱中分离获盆地出血热病人以及硬蜱中分离获 得,故名新疆出血热病毒。得,故名新疆出血热病毒。是自然疫源性疾病。有严格的地区性是自然疫源性疾病。有严格的地区性和明显的季节性。野生塔里木鼠以及和明显的季节性。野生塔里木鼠以及山羊、骆驼和马等是主要储存宿主,山羊、骆驼和马等是主要储存宿主,硬自传播媒介。人被带病毒蜱叮咬后硬自传播媒介。人被带病毒蜱叮咬后发病,表现为发热发病,表现为发热,全肌肉疼痛、中全肌肉疼痛、中毒症状和出血。但无肾综合征。病死毒症状和出血。但无肾综合征。病死率率 10103030。病后获得持久免疫。病后获得持久免疫力。力。微生物特性微生物特性 病
5、毒呈球形,直径病毒呈球形,直径9090120nm120nm,核酸为,核酸为 单股正链单股正链RNARNA,核衣壳为,核衣壳为2020面体立体对面体立体对 称,外有包膜表面有血凝素。能用鸡称,外有包膜表面有血凝素。能用鸡 胚分离传代。胚分离传代。1-41-4日龄乳鼠对本病毒有日龄乳鼠对本病毒有 很高的感受性,可用于病毒分离及传很高的感受性,可用于病毒分离及传 代。抵抗力与代。抵抗力与HFRSVHFRSV相似。其抗原性与相似。其抗原性与 HFRSVHFRSV无交叉反应。无交叉反应。微生物检验微生物检验 主要是进行病毒分离和应用主要是进行病毒分离和应用ELISAELISA、免疫荧光法检测中和抗体、补体结免疫荧光法检测中和抗体、补体结 合抗体及血凝抑制抗体,常用于流合抗体及血凝抑制抗体,常用于流 行病学调查。行病学调查。